《內皮細胞內質網應激在移植腎血管排異反應中的作用》是依託復旦大學，由陳思鋒擔任項目負責人的重點項目。
基本介紹
- 中文名：內皮細胞內質網應激在移植腎血管排異反應中的作用
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：重點項目
- 項目負責人：陳思鋒
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
器官移植排異是新的重大疾病，其關鍵是血管排異反應（AVR），內質網應激（ECR）對AVR的調節機制是急待闡明的重大科學問題。我們發現應激蛋白血紅素加氧酶-1(HO-1)介導IL-10的抗AVR作用；蛋白糖基化異常誘導ECR；過度應激損傷血管內皮細胞(EC)和內皮祖細胞(EPC)，HO-1保護EC和EPC。據此，我們從HO-1依賴性EC和EPC內ECR出發，觀察移植腎EC和循環EPC的ECR水平和HO-1含量以及兩者的關係對腎AVR的影響；用RNA干擾和轉基因改變移植腎EC和EPC內HO-1或ECR蛋白表達，研究不同ECR蛋白和HO-1依賴性ECR對AVR的調節；探討蛋白糖基化對HO-1依賴性ECR的影響；研究HO-1依賴性ECR在經典和新型抗腎AVR治療中的作用。以開創器官移植ECR新領域，揭示ECR參與AVR的機制，闡明HO-1與ECR的關係以及對腎AVR的調節，為防治AVR提供新策略。
結題摘要
慢性器官移植排異是新的重大疾病，其關鍵是血管排異反應。內質網應激是多種參與血管排異反應的因素如手術、免疫、缺血、氧化、高血糖等引起的應激反應的綜合表現，因而內質網應激對血管排異反應的調節機制是急待闡明的重大科學問題。本項目在前期研究發現內質網應激蛋白(包括血紅素氧合酶-1和經典的內質網應激蛋白)與慢性血管排異反應密切相關的基礎上，探討移植腎血管內皮細胞、循環內皮祖細胞和具有分化為血管內皮細胞潛力的幹細胞內的血紅素氧合酶-1(HO-1)和內質網應激蛋白在移植腎慢性血管排異反應中的作用及其機制。通過基因敲除和大鼠尾靜脈注射外源性血管內皮細胞以及可在體內分化為血管內皮細胞的間充質量幹細胞（MSC）和誘導性多能幹細胞（ｉＰＳ）等方法，證實HO-1對同種異基因移植腎的存活至關重要，HO-1基因敲除純合子小鼠所有移植腎都不能存活，細胞治療減輕慢性腎移植排異的作用依賴於HO-1；闡明了闡明經典抗腎移植排異反應藥物環孢素A（CSA）導致腎血管內皮細胞損傷的新機制，發現CSA通過氧化應激激活內質網應激反應，腎血管內皮細胞和MSC細胞內保護酶HO-1在整個過程中都是升高的，而保護性內質網應激分子GRP78主要在低濃度CSA刺激和早期內質網應激時升高，但高濃度和長期的CSA刺激時以具有促細胞凋亡作用的內質網應激分子IRE1、XPB1通路升高為主，阻斷氧化應激可防止損害性內質網應激，恢復細胞活力,抑制內質網應激蛋白合成可顯著減輕CSA引起的細胞損害,證明內質網應激蛋白在高濃度和長期的CSA刺激引起的細胞損傷中起重要作用；發現合適劑量的ＭＳＣ和ｉＰＳ對腎移植和腎移植相關性損傷如腎缺血再灌注損傷和移植血管具有保護作用， MCP-1預處理MSC能增強其治療作用，MCP-1的增強作用可被內質網應激蛋白CHOP或者ATF6的siRNA所阻斷；發現HO-1、內質網應激蛋白ATF-6和CHOP在IL-10轉基因和/或CD3+ 、CD4+ 、CD4+ CD25+ 雙陽性T細胞治療腎移植慢性排斥反應中，與移植腎排異反應程度呈負相關；發現HO-1是CHOP和ATF-6的上游分子，CHOP和ATF6有相互代償性調節作用。總之，本項目系統研究了內質網應激在腎移植排異反應發生和治療中的作用，在此基礎上發展出新的治療策略。
