《保健食品中泛酸鈣的測定(GB/T 22246-2008)》由中華人民共和國衛生部提出並歸口。本標準負責起草單位：中國疾病預防控制中心營養與食品安全所。本標準參加起草單位：河北省疾病預防控制中心。本標準主要起草人：楊大進、方從容、馬蘭、王竹天、秦振順。本標準為首次發布。
基本介紹
- 中文名：保健食品中泛酸鈣的測定
- 外文名：Determination of Calcium Pantothenate in Health Foods
- 發布日期：2008年7月31日
- 實施日期：2008年11月1日
- 語種：簡體中文
- ISBN：155066134145
- 出版社：中國標準出版社
- 頁數：8頁
範圍,原理,試劑和材料,儀器和設備,分析步驟,試樣製備,液相色譜參考條件,計算,精密度,
範圍
本標準規定了營養素補充劑類保健食品中泛酸鈣的測定方法。
本標準適用於營養補充劑類保健品中泛酸鈣的測定。
本標準的線性範圍:2. 5 µg/mL~80 µg/mL。
原理
根據泛酸鈣溶於水,對酸和鹼不穩定,但在中性( pH=5. 0~ 7. 0)條件下很穩定的理化性質,試樣中的泛酸鈣用水在超音波振盪下提取,定容,離心後取上清液過濾膜,經 C18反相柱分離,在紫外檢測器200 nm波長處檢測,根據色譜峰的保留時間定性,外標法定量 。
試劑和材料
乙腈(CH3CN):色譜純。
磷酸(H3PO4):分析純。
磷酸二氫鉀(KH2PO4) :分析純。
0.02 mol/L磷酸二氫鉀溶液:取磷酸二氫鉀2. 722 g,加水溶解成1 000 mL,用磷酸調節 pH 至3.0。
水(H2O):為實驗室一級用水,電導率(25℃)為 0.01 mS/m。
泛酸鈣標準儲備液:稱量泛酸鈣標準品約0. 1 g(精確至0.0001 g),置於100 mL容量瓶中,加水溶解並定容至刻度,混勻(4℃冰櫃中保存備用,該溶液可保存5 d) 。
泛酸鈣標準使用液:準確量取1. 0 mL標準儲備液置於10 mL容量瓶中,加水稀釋至刻度,混勻(4℃冰櫃中保存備用,該溶液可保存5 d)
儀器和設備
高效液相色譜儀:附紫外檢測器
超音波清洗器。
離心機:4 000 r/min。
分析步驟
試樣製備
固體片劑或膠囊試樣:稱取 0. 1 g~1.0 g粉碎後的均勻試樣(精確到 0.001 g),使試樣濃度位於標準曲線中。試樣置於25 mL容量瓶中,加水20 mL,超聲提取20 min後,加水至刻度,搖勻,離心後將上清液過 0. 45 µm濾膜,濾液待進樣 。
液體試樣:除碳酸飲料需超聲除去二氧化碳後再取樣外,其餘液體試樣均可直接準確量取適量樣液,使試樣濃度位於標準曲線中。試樣置於25 mL容量瓶中,加水稀釋至刻度後混勻,過 0. 45 µm濾膜,濾液備用 。
吸取 0. 25、0. 50、1.0、2. 0、4. 0、8.0 mL泛酸鈣標準使用液(相當於2. 5 µg、5.0 µg、10 µg、20 µg、40
µg、80 µg泛酸鈣) ,分別置於10 mL容量瓶中,加水稀釋至刻度,混勻。在給定的儀器條件下,進行色譜分析,以峰高或峰面積對濃度作標準曲線 。
液相色譜參考條件
色譜柱: ODS C18柱,250 mmx4.6 mm,5 µm。
柱溫:30℃。
紫外檢測器:檢測波長200 nm。
流動相: 0.02 mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調 pH=3.0)+乙腈=95十5。
流速:1.0 mL/min。
進樣量:10 µL。
色譜分析:取標準溶液系列及試樣溶液注入色譜中,以保留時間定性,以試樣峰面積或峰高與標準比較定量 。
計算
試樣中泛酸的含量按式(1)進行計算:
式中:
X-試樣中泛酸的含量,單位為克每百克或克每百毫升(g/100 g或 g/100 mL) ,
c-由標準曲線求得進樣液中泛酸的濃度,單位為微克每毫升(µg/mL) ;
V-試樣定容體積,單位為毫升(mL) ;
m-試樣的質量或體積,單位為克或毫升(g或 mL) 。
結果由泛酸換算為泛酸鈣的計算見式(2) :
式中:
X1-試樣中泛酸鈣的含量,單位為克每百克或克每百毫升(g/100 g或 g/100 mL) ;
X-試樣中泛酸的含量,單位為克每百克或克每百毫升(g/100 g或 g/100 mL) ;
219. 23、476. 54-分別為泛酸和泛酸鈣的分子質量。
計算結果保留三位有效數字 。
精密度
在重複性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對值差不超過算數平均值的10%。
色譜圖
泛酸鈣標準色譜圖和試樣色譜圖分別見圖1~圖2，泛酸鈣紫外光譜圖見圖3
泛酸鈣色譜圖及紫外光譜圖
泛酸鈣色譜圖及紫外光譜圖