低溫誘導染色體加倍

概念

低溫抑制紡錘體形成,染色體複製、著絲點分離後不能被拉向兩極,全部保留在同一細胞內,導致染色體加倍。

知識背景

利用一些誘發因素可以人工誘導植物產生多倍體，包括物理因素，如溫度的劇變，射線處理，嫁接和切斷等，還有化學因素，如植物鹼，植物生長激素，秋水仙素、茶嵌戊烷、異生長素、富民農等等。由於一些化學誘導物質有劇毒，且價格昂貴，比如：秋水仙素，所以我們將探究低溫對染色體數目的變化。

低溫和秋水仙素一樣，處理植物分生組織細胞，能夠抑制紡錘體的形成，導致分裂後期染色體不能移向兩極，細胞加大而不分裂，著絲點分裂後的染色體仍在一個細胞中，故細胞中的染色體數目加倍。如果用低溫處理根尖，則在根尖分生區內可以檢測到大量染色體加倍的細胞，如：處理植物幼苗的芽，則可以得到染色體加倍的植株。

大蒜（2n=16）。之所以選用大蒜而非洋蔥是因為在做觀察有絲分裂實驗時發現大蒜的效果比洋蔥好。

1、大蒜長出約1cm左右的不定根時，放入冰櫃的低溫室內（4℃），誘導培養36h。

2、剪取誘導處理的根尖約0.5～1cm，放入卡諾氏液（3份95%酒精與1份冰醋酸混合均勻）中浸泡0.5～1 小時，以固定細胞的形態，然後用體積分數為95%的酒精沖洗2次。

3、製作裝片：解離→漂洗→染色→製片（過程同觀察細胞的有絲分裂的製片方法一樣）

4、觀察：用顯微鏡觀察，並尋找發生了染色體數目變化的細胞。（視野中既有正常的二倍體細胞，也有染色體數目發生改變的細胞。）

1、固定是藉助於物理方法或化學藥物的作用，迅速滲入組織和細胞將之殺死，使其形態結構和內含物儘可能保持生活時的完整和真實狀態。

2、細胞中的染色體數目加倍，可以是變為原來的兩倍（變為32），也可能是變為原來的四倍（變為64）。

3、視野中大量細胞為有絲分裂間期的細胞，其特點為核膜、核仁明顯，核質呈均勻狀態。移動載玻片，先低倍鏡後高倍鏡，可觀察到有絲分裂各個時期的細胞，尤其是中期的細胞，染色體的形態和數目清晰可見。

4、改良苯酚品紅溶液和醋酸洋紅溶液都可以使染色體著色