《中國人群中胃癌患者5-Fu化療敏感性相關miRNA的研究》是依託蘭州大學，由謝小冬擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：中國人群中胃癌患者5-Fu化療敏感性相關miRNA的研究
- 依託單位：蘭州大學
- 項目負責人：謝小冬
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
胃癌在我國西北地區屬於高發的惡性腫瘤，化療是晚期胃癌患者的主要治療方式，但化療耐藥仍然是制約臨床治療的關鍵。目前許多證據揭示miRNAs與化療敏感性有關。本項目擬採用基於microRNA晶片結果分析的候選miRNA基因序列多態關聯研究策略與功能研究結合的方法進行研究。首先對microRNA晶片結果篩選、驗證，並確定相關microRNA組合，建立基於microRNA生物標誌物的胃癌化療個體化用藥檢測體系；然後利用生物信息學方法篩選出差異表達microRNA基因序列中的多態位點，採用兩步病例-對照的研究方法，在大規模胃癌化療臨床樣本中進行敏感性關聯分析，對陽性位點進行功能性分析及鑑定，建立基於miRNA多態性的胃癌化療個體化用藥檢測體系；最後，對上述兩個檢測體系進行臨床有效性評價。從而為了解miRNA自身受到調控的因素，探討胃癌化療敏感性的分子機理，指導臨床合理化用藥奠定研究基礎。
結題摘要
目前許多證據揭示miRNAs在抗癌藥物耐藥性中扮演著重要角色。本項目採用基於microRNA晶片結果分析的候選miRNA基因序列多態關聯研究策略與功能研究結合的方法進行研究。首先針對胃癌氟尿嘧啶耐藥細胞株利用晶片共篩選出29個差異miRNA。套用qRT-PCR驗證差異miRNA中的hsa-miR-125b、hsa-miR-125a、hsa-miR-100、hsa-miR-130a、hsa-miR-221、hsa-miR-194、hsa-miR-192 ；套用生物信息學分析預測miR-125b的靶基因有ERBB2、ERBB3。進一步雙螢光素酶報告基因實驗證實miR-125b分別與ERBB2、ERBB3基因的3'UTR區有直接的靶向結合作用。在胃癌耐藥細胞株中，過表達miR-125b可以使胃癌耐藥細胞對5-Fu的藥物敏感性顯著增強(P＜0.05)；轉染miR-125b inhibitors，耐藥細胞內miR-125b的表達進一步下調，耐藥性增強。針對上述研究中得到的7個候選miR-125b-5p、miR-125a-5p、miR-100-5p、miR-130a、miR-221-3p、miR192-5p和miR-194-5p，確立了重要的功能SNP和指標組合群，選擇了ERBB3基因rs1810132、rs2271194 ，BMPR1B rs1434536等29個位點在臨床樣本中進行驗證。研究發現ERBB2 rs1810132等5個位點的等位基因頻率分布在敏感組和耐藥組之間存在顯著性差異，有統計學意義。同時，還發現對於使用FOLFOX化療方案的患者ERBB2基因rs1810132位點的等位基因頻率分布在敏感組和耐藥組之間有顯著差異，而ERBB3基因rs2271194位點的等位基因頻率分布無顯著差異。上述結果有望成為臨床區分敏感患者和耐受患者的參考指標之一，有助於指導個體化用藥。
