不對稱式聚合酶鏈反應

不對稱式聚合酶鏈反應是指引物用量不對稱的聚合酶鏈反應。這兩個引物分別稱為非限制與限制性引物，反應中當低濃度的限制性引物消耗完後，高濃度的非限制性引物就引導產生大量的單鏈DNA。利用針對目的基因所設計的一對特異寡核苷酸引物，以目的基因為模板進行的DNA體外合成反應。

基本介紹

• 中文名：不對稱式聚合酶鏈反應
• 釋義：引物用量不對稱的聚合酶鏈反應

引物設計的基本原則是最大限度地提高擴增效率和特異性，同時儘可能抑制非特異性擴增。反應中的引物至少應含有18個與模板序列完全互補的核苷酸（常用軟體通常默認為20個），最大不能多於38個，否則最適延伸溫度會超過TaqDNA聚合酶的最適溫度（74℃），不能保證PCR擴增產物的特異性這樣才能保證擴增反應的特異性。