不孕不育的免疫學檢查

不孕不育的免疫學檢查包括男性抗精子自身免疫不育、女性抗精子同種免疫不育和女性抗透明帶免疫不育。

基本介紹

• 名稱：不孕不育的免疫學檢查
• 所屬分類：精液和前列腺液

正常值

各項免疫學檢查結果正常。

臨床意義

異常結果：多項免疫學檢查說明不孕不育。　需要檢查的人群：男性不育、女性不孕患者。

注意事項

不合宜人群：暫時未明。　檢查前禁忌：　一、採集精子時要求：　（1） 留精液前，病人應停止性交4-7天。檢查前1周不能用丙酸睪丸酮、苯乙酸睪丸酮、苯丙酸諾龍。檢查前1個月內應停止飲酒，這點必須做到。　（2） 採取精液時，可用軟皂或石蠟油做陰莖按摩，將標本收集在無菌的試管中;也可用保險套(沖洗乾淨，不含殺精子藥物)或採用性交中斷法收集精液，但這樣收集的量往往不多。　（3） 如用上述方法采不到精液，可經直腸內按摩精囊及輸精管末端、壓迫采尿，檢查沉渣中有無精子。　（4） 不要將精液暴露在過熱和過冷的環境中。及時交給醫生備查，不得超過30分鐘。冷天要注意保暖，送檢時可放在內衣口袋裡保溫。　（5） 如果要進行細菌培養，應先沖洗、消毒尿道口，再將精液收集在無菌試管中。　二、採集血清前要求：　（1） 控制飲食　① 大多數檢驗項目都要求在早晨空腹採血，應禁食咖啡、濃茶、高糖及可樂類飲料;　② 肝功、血脂、凝血等項目要求禁食12-16小時，且提前一天的晚餐應當避免飲酒，禁止高脂肪、高展蛋白飲食;　③ 飲食對血脂檢驗影響重大，至少應當在抽血前的3天以內注意保持正常飲食。　（2） 避免藥物影響　藥物對生化檢驗和細菌培養的影響是十分複雜的。因此，如有可能，受檢者在化驗前的1-2天應停服一切藥物。如果因治療需要必須服藥，則在分析化驗結果時應考慮藥物的影響。　（3） 避免運動的影響　① 劇烈運動可以使許多血液成分發生改變，甚至持續24小時以上，因此劇烈運動之後不應立即抽血快步行走之後，至少應休息10-15分鐘後再抽血;　② 應在平靜狀態抽血，避免情緒激動。　檢查時要求：　① 為了保證體檢後能準確的了解自己的體檢結果，請在體檢前認真填寫體檢表和每張化驗單，字跡要清楚，尤其是姓名。　② 採集血清後要靜坐休息15—20分鐘。

檢查過程

—、抗精子免疫不育的檢查　抗精子免疫包括抗精子體液免疫(抗精子抗體)和抗精子細胞免疫。　抗精子抗體的檢測　（1） 性交後試驗 於性交後6-24h內取宮頸粘液，在高倍鏡下觀察計數精子數。每高倍視野中，有≥21條極度活潑的精子者特異性因素干擾。若血清效價≥1：32，則可認為確含精子抗體。其他尚有毛細管凝集法及平板凝集法，較少用。　（2） 補體依賴性細胞毒試驗及精子制動試驗 精子抗體與精子抗原結合，激活補體系統，導致細胞膜通透性及完整性的損害，若為制動抗體，使精幹失去活動力，制動值≥2為陽性;若為細胞毒抗體，則用某些染料染色陽性，要求精子活率>70%。微量法僅需樣本幾微升，對精子活動率較低的樣本，可用上游法提取活精子，活率可達90%以上。奉法僅能檢測作用於精子尾乾的抗體。特異性強，敏感性差，假陰性率較高。　（3） 被動血凝法 用精子提取物及精漿包被經處理的紅細胞使之致敏，將致敏紅細胞與待測稀釋血清在微量反應板上進行反應，出現紅細胞凝集為陽性。此法不受精子活率、計數、精掖中微生物或組織碎片的影響，研究者認為此法特異、敏感，但報導較少，其可靠性及實用性尚待證實。　（4） 酶聯免疫吸附試驗(ELISA)及生物素—親合素酶聯免疫吸附法(BA—ELISA) 套用完整精幹或精子膜抗原包被固相載體，待測樣本中精子抗體與之培養後可結合於抗原表面。隨之酶標第二抗體亦可結合其表面，後經加酶底物，根據底物顯色情況判斷結果。可用肉眼觀察，亦可用酶標儀測定，後者客觀準確，一般以大於一組陰性血清光密度均值加2倍標準差為陽性。由於完整精子包被易致非特異性吸附，因此若以可溶性精子膜抗原包被，則本法敏感、特異、客觀、定量，能確定抗體類型，且易操作。BA—ELISA是在常規ELISA基礎上發展起來的新一代定量檢測法，其敏感性、特異性超過常規法。　（5） 免疫珠試驗(1mmunbead Test，IBT) 用抗人免疫球蛋白抗體包被的聚丙烯醯胺微球能結合於結合了精子抗體的精子表面，在相差顯微鏡或電子顯微鏡下可見到免疫珠隨精子運行，若結合一個或多個免疫珠的精子比例≥lo%為陽性。此法可確定抗體的部位、類型及結合精子的比例，能測出活精子表面結合的抗體。其敏感性、特異性及重複性較好，操作稍繁瑣，檢測所需樣本少，可用於宮頸粘液、輸卵管液等微量樣本的檢測。　（6） 放射性標記免疫球蛋白或A蛋白法 同位素標記的抗人免疫球蛋白或葡萄球苗A蛋白與結合在精子表面的精子抗體結合，用x計數器測定精於表面的放射活性。若以活精子作為抗原，其特異性及敏感性較高，且可確定抗體類型。但由於每次實驗活精子來源不同，其結果重複性較差，且設備昂貴。操作者易受放射性損害，故此法報導較少。　（7） 間接免疫熒尤試驗 精於表面結合於抗原後，能與標有螢光素的第二抗體結合，在螢光顯微鏡下觀察呈現螢光的陽性精子比例。因試驗中需要甲醇固定致精於膜損傷，內部抗原外露，而抗內部抗原的抗體在冗常人中普遍存在，故假陽性太高，無臨床實用價值。近年來，作液相培養，實驗過程中無需固定，又重新確定了本法的使用價值。　（8） 精卵相互作用直接檢查法　 精子—透明帶結合或穿透試驗：自腹腔鏡檢查中獲得的人卵與精於在一定條件F孵育後，觀察精子能否穿過透明帶進入卵細胞周圍的空間，若精子不能穿過透明帶，考慮有制動抗體存在。此試驗亦受其它因素干擾。　 精子—去透明帶倉鼠卵穿透試驗(SPA)：將最佳化提取的活精子與無帶倉鼠卵混合孵育，在相差顯微鏡下觀察，若卵內含腫脹精子頭(帶尾)為已經穿透。SPA可用於判定：①有精漿抗體的精子的受精能力;②各種抗體在阻止受孕時的重要性。此試驗也可受多種因素影響。　抗精子細胞免疫的檢測　對細胞介導的抗精幹免疫的研究資料較少，各家結論不一。動物實驗及人體檢測表明，抗精於細胞免疫可能是不育的原因之一。檢測細胞介導抗精於免疫反應的試驗主要有淋巴細胞轉化試驗、白細胞粘附抑制試驗、白細胞或巨噬細胞移動抑制試驗、皮膚試驗及外周血白細胞促凝血活性法等。所採用的抗原不一，有新鮮洗滌精子、凍融精子、半純化精於等。目前，因使用的抗原不統一，檢測方法各異，研究例數較少，各種方法的特異性尚難評價，其結果亦難於比較。　二、抗透明帶免疫性不孕症的檢測　人卵透明帶來源有限，很難獲取，但人透明帶與豬透明帶問有交叉抗原性，因此實際丁作中均用豬透明帶代替人卵透明帶用下檢測人血清中透明帶抗體。由於部分正常人血清中存在異種凝集素(主要為IgM)干擾實驗結果，因此檢測前需用新鮮豬紅細胞吸收待測血清。　（1） 透明帶沉澱反應 透明帶表面結合抗體後，在光鏡或暗視野鏡下呈現折光改變。本法多用於鑑定血清，敏感性低，難用於臨床。　（2） 放射免疫法 用放射性標記的豬透明帶抗原與待測血清培養後，分離出抗原抗體複合物，測定其放射活性。本法能定量，特異性及敏感性較好，但由於放射性損害，且報導不多，故本法尚難肯定。　（3） 間接免疫螢光試驗 人抗透明帶抗體結合至豬卵表面後，標有螢光素的抗人免疫球蛋白抗體隨之結合至透明帶表面，在螢光顯微鏡下呈現明顯的卵周螢光。本法的可靠性有賴於其它客觀方法證實。　（4） ELISA及BALISA法 以豬透明帶抗原包被固相載體，另加待測血清、酶標第二抗體及底物，分步培養洗滌，最後根據底物顏色變化情況判斷結果。本法所需樣本量少，無需特殊設備，操作簡便，能定量測定抗體並確定抗體類型，特異性及敏感性較好。BA—ELISA具有常規ELISA的優點，而其敏感性大為提高。　（5） 被動血凝法 用純化的豬透明帶抗原包被其他物種的紅細胞為抗原靶標，在存在透明帶抗體的情況下，致敏紅細胞發生凝集。此法研究報導較少，難以評價其敏感性和特異性。　（6） 精子—透明帶結合或穿透試驗 若存在透明帶抗體或抗精子抗體，此法均可陽性。由於試驗受培養環境因素影響較大，故對不同實驗室的研究結果難以比較。此法可與其它方法配合套用，相互補充，以保證結果的可靠性。

相關疾病

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相關症狀

繼發性不孕，女性不孕，男性不育