《下調miR-138表達對阿爾茨海默病的保護作用及機制研究》是依託華中科技大學，由王雄擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：下調miR-138表達對阿爾茨海默病的保護作用及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王雄
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
細胞外的澱粉樣蛋白β（Aβ）沉積是阿爾茨海默病(AD)的早期病理改變。MiR-138是一種腦內富集，能負向調節突觸形態發生的microRNA，並在AD病人腦內表達顯著升高。我們發現miR-138在12月齡AD轉基因小鼠以及細胞模型中表達升高，並通過抑制維甲酸受體α表達促進tau蛋白磷酸化。此外，miR-138也能顯著增加Aβ水平，但其具體機制尚不明確。本項目基於前期研究，擬通過在4月齡Tg2576轉基因小鼠以及過表達澱粉樣蛋白前體蛋白（APP）的N2a/APP細胞中研究miR-138對Aβ生成的影響及其分子機制。最後在12月齡Tg2576小鼠海馬中注射miR-138抑制劑或其靶基因的過表達腺病毒，運用ELISA，免疫組化，高爾基染色，水迷宮等技術研究下調miR-138或上調其靶基因表達對12月齡Tg2576小鼠AD樣Aβ沉積和學習記憶障礙的保護作用，該項目研究結果有望為AD防治提供新靶點。
結題摘要
突觸功能障礙和APP異常剪下是阿爾茨海默病(AD)的早期病理改變。近年來，包括microRNA（miRNA）和環狀RNA（circRNAs）在內的非編碼RNA被廣泛發現參與了AD的發病過程。miR-138是一種腦內富集，能負向調節突觸形態發生的miRNA，並在AD病人腦內表達顯著升高。我們發現與對照小鼠相比，APP/PS1小鼠海馬中miR-138的表達呈現年齡依賴性升高。在2月齡APP/PS1小鼠海馬中，通過注射miR-138激動劑上調miR-138表達，發現上調miR-138能夠抑制ADAM10表達，促進Aβ產生，誘導突觸和學習/記憶缺陷。在4月齡APP/PS1小鼠海馬中，通過注射miR-138抑制劑下調miR-138表達，發現抑制miR-138表達能夠改善4月齡APP/PS1小鼠上述AD樣病變。體外實驗發現，過表達Sirt1（miR-138的靶標）改善了miR-138誘導的ADAM10抑制和Aβ升高。通過軟體預測，我們發現circRNA HDAC9（circHDAC9）含有miR-138結合位點。在Aβ寡聚體處理的N2a細胞和4月齡APP/PS1小鼠海馬中，circHDAC9的表達與miR-138呈負相關。FISH發現circHDAC9與miR-138在N2a細胞質中共定位。體外實驗發現，circHDAC9作為miR-138海綿，降低miR-138表達，逆轉miR-138誘導的Sirt1抑制和Aβ的過量產生。此外，circHDAC9在輕度認知障礙（MCI）和AD患者中表達均顯著低於對照人群。因此，這些結果表明circHDAC9/miR-138/Sirt1信號通路可能AD中突觸功能障礙和APP異常剪下的重要調節因素，為AD患者提供了新的治療靶點。
