《CD2AP在阿爾茨海默病神經元突觸異常中的作用及機制研究》是依託浙江大學，由陶青青擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：CD2AP在阿爾茨海默病神經元突觸異常中的作用及機制研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：陶青青
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
阿爾茨海默病（AD）是最常見的神經變性病，其病因和發病機制仍不明確。我們研究團隊在前期研究中發現CD2AP是AD的易感基因。CD2AP是一種銜接蛋白，既往主要研究其在腎臟足細胞中的作用，敲除後會導致小鼠足細胞突起形成障礙引起嚴重蛋白尿。足細胞突起和神經元突起在主要組成成分、信號轉導分子等方面是相同的，但CD2AP在神經元中的研究甚少。我們近期研究發現AD患者外周血CD2AP表達水平明顯下降，並且CD2AP在AD模型鼠海馬區表達水平降低，下調神經元中的CD2AP導致突起生長異常和樹突棘密度降低，這和以往報導的AD患者和AD模型鼠神經元突觸異常的表現相似。綜上所述，我們推測CD2AP在AD神經元突觸異常中起著重要作用，我們將構建細胞模型和CD2AP條件性敲除小鼠模型研究其在調控突觸中的作用及機制，並檢測上調CD2AP對AD模型鼠的保護作用，上述研究有助於揭示AD發病機制，為治療AD提供新策略。
結題摘要
阿爾茨海默病（Alzheimer's disease，AD）是最常見的神經退行性疾病，臨床主要表現為進行性的學習和記憶功能障礙以及社會適應能力的下降，患者在晚期完全喪失生活自理能力。AD的發病機制最主要的假說是澱粉樣蛋白（Aβ）假說和磷酸化tau蛋白假說。但基於Aβ和磷酸化tau蛋白開發的藥物，臨床試驗均以失敗告終。近年來的研究提示AD發病是由多種因素共同參與導致的，越來越多的研究者開始拓寬視野去尋找其他可能在AD發病中起作用的關鍵分子。本項目套用MassARRAY技術對422名散發性AD患者和1435名正常老年對照進行了75個基因上的95個多肽位點進行高通量篩查，結果發現CD2AP是中國漢族人群散發性AD的易感基因，進一步套用real-time PCR檢測了209名散發性AD患者和213名正常老年對照，外周血白細胞中CD2AP的mRNA表達水平，發現其在散發性AD患者外周血中的mRNA表達水平較正常老年對照顯著降低，提示CD2AP表達水平下降參與AD的發病。之後，在細胞系、原代培養神經元和胎鼠中觀察發現CD2AP參與神經元的遷移和神經突起的生長。為了進一步明確CD2AP在AD發病中的機制，套用Crispr-cas9技術構建了CD2AP神經元條件性敲除和全敲除小鼠，表型評估發現CD2AP神經元條件性敲除小鼠識別記憶出現異常，且全敲除小鼠海馬神經元DCX染色較野生型顯著降低，電鏡檢查發現全敲除小鼠的海馬神經元突觸囊泡的密度和大小與野生型小鼠存在顯著差異。蛋白質組學分析結果顯示全敲小鼠和野生型小鼠在細胞骨架-內體-溶酶體途徑中存在顯著差異，提示CD2AP通過影響細胞骨架-內體-溶酶體途徑參與AD的發病。本項目為AD的發病機制提供了新的理論依據。
