《一種駝背鱸與鞍帶石斑魚的人工雜交育種方法》是海南晨海水產有限公司於2015年7月14日申請的專利，該專利公布號為CN105075940A，公布日為2015年11月25日，發明人是陳國華、蔡春有、蔡有森、蔡四川、蔡建順等。
《一種駝背鱸與鞍帶石斑魚的人工雜交育種方法》包括以下步驟：（1）親本選擇、（2）駝背鱸的親魚培育、（3）鞍帶石斑魚親魚培育、（4）親魚發情、產卵的判斷、（5）人工受精、（5）受精卵的孵化。該發明選擇駝背鱸作為雌性親本、鞍帶石斑魚作為雄性親本，通過選擇不同的方式對兩種親本進行培育，達到兩種親本的同步成熟，並對親本進行營養強化、環境調控，以促進兩種魚親魚性腺發育同步並提高卵子和精子質量，獲得成熟精、卵，然後進行人工授精，孵化出仔魚，獲得了兼具二種親本特點的雜交子一代魚的仔魚，培育出的雜交魚養殖性能好，肉質鮮美，性價比高。
2019年9月，《一種駝背鱸與鞍帶石斑魚的人工雜交育種方法》獲得第二屆海南省專利獎優秀獎。
基本介紹
- 中文名：一種駝背鱸與鞍帶石斑魚的人工雜交育種方法
- 公布號：CN105075940A
- 公布日：2015年11月25日
- 申請號：2015104111826
- 申請日：2015年7月14日
- 申請人：海南晨海水產有限公司
- 地址：海南省三亞市吉陽區響土村
- 發明人：陳國華、蔡春有、蔡有森、蔡四川、蔡建順、蔡惠明、蔡金泉
- 專利代理機構：海口興南智慧財產權事務有限公司
- 代理人：戴巨龍
- 分類號：A01K61/00(2006.01)I
- 類別：發明專利
專利背景,發明內容,專利目的,技術方案,改善效果,權利要求,實施方式,榮譽表彰,
專利背景
駝背鱸（學名：Chromileptes altivelis），隸屬鱸形目、鮨科、駝背鱸屬，又稱老鼠斑，為熱帶海水礁棲性魚類，主要分布區為印度洋、非洲沿海以及西太平洋，中國的南海、台灣海峽及香港海域都有分布。駝背鱸一般棲息於風平浪靜的瀉湖區域或水質較好珊瑚礁水域，棲息在15米左右水深處。幼魚色彩靚麗，可作為觀賞魚，成年後味道鮮美，為非常高級的食用魚。
鞍帶石斑魚（學名：Epinephelus lanceolatus），俗名龍躉、龍膽石斑是石斑魚類中體型最大的種類，以體型大、生長快著稱。鞍帶石斑是一種具有高經濟價值的食用魚，在中國南方省份、台灣、澳洲、香港及東南亞國家和地區進行人工養殖
駝背鱸肉質鮮美，市面上售價較高，但生長慢；鞍帶石斑魚有個體大、生長快的優勢，是一種具有高經濟價值的食用魚，且肉質較好。
為獲得兼具二種親本特點的雜交子一代，提供一種駝背鱸與鞍帶石斑魚人工雜交育種的方法。
發明內容
專利目的
《一種駝背鱸與鞍帶石斑魚的人工雜交育種方法》所要解決的問題是，針對自然物種在經濟性狀上的不足，設計出一種石斑魚的屬間雜交方法，能得到兼具二親本優勢的批量仔魚，用於規模化養殖生產。
技術方案
《一種駝背鱸與鞍帶石斑魚的人工雜交育種方法》包括以下步驟：
（1）親本選擇
a.雌性親本：選擇5齡以上、體型正常、無病害、活力強的健康駝背鱸作為雌性親本；
b.雄性親本：選擇6齡以上、體型正常、無病害、活力強的健康鞍帶石斑魚作為雄性親本；
（2）駝背鱸親魚的網箱培育
a.海區選擇及網箱培育：選擇年最低水溫不低於18℃，海水鹽度28-33，水流0.2-0.4米/秒，水深不小於8米的海區用於親魚的網箱培育；
b.飼養種類與投餵量：小魷魚、藍圓鰺、鮐魚，每天下午投餵1次，投餵量控制在魚體重的2％-3％，實際投餵量受天氣、水溫等條件影響而增減速，強化培育期間，每天投餵2次，上下午各1次，日投餵量為親魚體重的3-4％；
（3）鞍帶石斑魚親魚的池塘培育
a.培育池培育：鞍帶石斑魚選擇池塘培育，培育池規格1畝，水深3-3.5米，設定進排水口各1個；
b.飼料種類與投餵量：鮐魚，三天投餵1次，投餵量控制在魚體重的2％-4％，實際投餵量受天氣、水溫等條件影響而增減速。
（4）親魚發情、產卵的判斷：
a.海區水溫上升到24℃，駝背鱸親魚性腺開始成熟，每周一次從親魚群體中挑選部分個體進行成熟度檢查；從群體中選擇雌性駝背鱸，置於平台上實施檢查，外觀上腹部隆起，生殖孔微紅，即可初步判定為達到性成熟；
b.池塘水溫25-26℃，鞍帶石斑魚性腺開始成熟，每周一次從親魚群體中挑選部分個體進行成熟度檢查；從群體中選擇雄性個體，捕起，置於合適的平台上，用手巾蓋住魚的眼睛，實施檢查，生殖孔微紅，輕壓腹部，能擠出乳白色的精液，即達到成熟；
（5）人工受精
a.采精：性腺檢查中發現精液良好的鞍帶石斑魚個體，即可取精，用乾毛巾將魚腹部擦乾，酒精棉球對生殖孔消毒，用手在魚體腹部，從前向生殖孔方向推擠，任乳白色的精液從生殖孔流出，用50毫升注射器，將精液吸取；
b.擠卵：將駝背鱸雌性親魚置於平台上，用濕毛巾將魚體包裹，暴露生殖孔，操作者戴上乳膠手套，用手指插入魚的生殖孔，使生殖孔打開，用手在魚腹部從前向生殖孔方向推擠，成熟卵子即可流出，在生殖孔下方用盆接住流出的卵子；
c.人工受精：向盛有卵子的盆內加入乾淨海水，一邊加水一邊輕輕攪動，同進加入備用的鞍帶石斑魚精液，精液加入量為每公斤卵子1毫升精液，混勻之後靜置3-4分鐘後，用乾淨的海水沖洗受精卵3-4遍；
（6）受精卵的孵化
準備一個容積500升、底部設有排水閥的孵化桶，在孵化桶內放置氣石充氣，將經過步驟（5）處理過的受精卵放入孵化桶中孵化，受精卵孵化條件為水溫25-30℃，鹽度28-33，pH7.8～8.5，孵化密度為250-300萬粒受精卵/立方米，發現其中有死卵或未受精卵時要及時排除，死卵或未受精卵排掉後，每2小時換水一次，每次換水量為孵化桶容積的一半，以保持孵化桶內海水的清新。
在該發明中，所述步驟（2）的b中，根據親魚口裂的大小確定飼料塊大小，駝背鱸親魚適合的飼料魚塊，長5-8厘米、寬2-3厘米，小魷魚可整條投餵；個體較大的魷魚切成兩段投喂，同樣大小的藍圓鰺，去頭去尾投餵。
在該發明中，所述步驟（3）的b中，根據親魚口裂的大小確定飼料塊大小，鞍帶石斑魚親魚適合的飼料魚塊，長10-15厘米、寬5-8厘米，一般情況下，鮐魚需切除頭尾，整條投餵；強化培育期間，在每塊飼料中塞入維生素E軟膠囊1粒（50毫克）投餵。
在該發明中，所述步驟（5）的a中，將取出的精液注入指管，密封，4℃暫存，備用，暫存的精液在一周內仍有授精能力。
在該發明中，所述步驟（5）的b中，培養在網箱中的駝背魚親魚，達到性成熟後，可自然產卵，此時須認真觀察群體活動情況，發現親魚不攝食，則可能當天產卵，須隨時準備進行人工取卵，一旦發現有親魚有交配行為，即立即將雌魚捕起，實施擠卵。
在該發明中，所述步驟（6）中，排除死卵或未受卵的方法：讓氣石停止充氣10～15分鐘，正常的受精卵在停氣後會上浮，而死卵或未受精卵及少量雜物將沉於孵化桶的底部，開啟孵化桶底部的排水閥，緩慢排水，將死卵或未受精卵及雜物排出，一邊排水一邊檢查，當排出的水中出現正常受精卵時，則關閉排水閥，停止排水，恢復充氣，並向孵化桶補充海水至正常水位，死卵或未受精卵排掉後，每2小時換水一次，每次換水量為孵化桶容積的一半，以保持孵化桶內海水的清新。
改善效果
《一種駝背鱸與鞍帶石斑魚的人工雜交育種方法》選擇駝背鱸作為雌性親本、鞍帶石斑魚作為雄性親本，通過選擇不同的方式對兩種親本進行培育，達到兩種親本同步成熟，並對親本進行營養強化、環境調控，以促進兩種魚親魚性腺發育同步並提高卵子和精子質量，獲得成熟精、卵，然後進行人工授精，孵化出仔魚。該發明實現了駝背鱸與鞍帶石斑魚的屬間雜交，獲得了兼具二種親本特點的雜交子一代魚的仔魚，用於後續的人工養殖，培育出的雜交魚養殖性能好，肉質鮮美，性價比高。
權利要求
1.《一種駝背鱸與鞍帶石斑魚的人工雜交育種方法》其特徵在於，包括以下步驟：
（1）親本選擇
a.雌性親本：選擇5齡以上、體型正常、無病害、活力強的健康駝背鱸作為雌性親本；
b.雄性親本：選擇6齡以上、體型正常、無病害、活力強的健康鞍帶石斑魚作為雄性親本；
（2） 駝背鱸親魚的網箱培育
a.海區選擇及網箱培育：選擇年最低水溫不低於18℃，海水鹽度28-33，水流0.2-0.4米/秒，水深不小於8米的海區用於親魚的網箱培育；
b.飼養種類與投餵量：小魷魚、藍圓鰺、鮐魚，每天下午投餵1次，投餵量控制在魚體重的2％-3％，實際投餵量受天氣、水溫條件影響而增減速，強化培育期間，每天投餵2次，上下午各1次，日投餵量為親魚體重的3-4％；
（3） 鞍帶石斑魚親魚的池塘培育
a.培育池培育：鞍帶石斑魚選擇池塘培育，培育池規格1畝，水深3-3.5米，設定進排水口各1個；
b.飼料種類與投餵量：鮐魚，三天投餵1次，投餵量控制在魚體重的2％-4％，實際投餵量受天氣、水溫條件影響而增減速；
（4） 親魚發情、產卵的判斷：
a.海區水溫上升到24℃，駝背鱸親魚性腺開始成熟，每周一次從親魚群體中挑選部分個體進行成熟度檢查；從群體中選擇雌性駝背鱸，置於平台上實施檢查，外觀上腹部隆起，生殖孔微紅，即可初步判定為達到性成熟；
b.池塘水溫25-26℃，鞍帶石斑魚性腺開始成熟，每周一次從親魚群體中挑選部分個體進行成熟度檢查；從群體中選擇雄性個體，捕起，置於合適的平台上，用手巾蓋住魚的眼睛，實施檢查，生殖孔微紅，輕壓腹部，能擠出乳白色的精液，即達到成熟；
（5） 人工受精
a.采精：性腺檢查中發現精液良好的鞍帶石斑魚個體，即可取精，用乾毛巾將魚腹部擦乾，酒精棉球對生殖孔消毒，用手在魚體腹部，從前向生殖孔方向推擠，任乳白色的精液從生殖孔流出，用50毫升注射器，將精液吸取；
b.擠卵：將駝背鱸雌性親魚置於平台上，用濕毛巾將魚體包裹，暴露生殖孔，操作者戴上乳膠手套，用手指插入魚的生殖孔，使生殖孔打開，用手在魚腹部從前向生殖孔方向推擠，成熟卵子即可流出，在生殖孔下方用盆接住流出的卵子；
c.人工受精：向盛有卵子的盆內加入乾淨海水，一邊加水一邊輕輕攪動，同進加入備用的鞍帶石斑魚精液，精液加入量為每公斤卵子1毫升精液，混勻之後靜置3-4分鐘後，用乾淨的海水沖洗受精卵3-4遍；
（6） 受精卵的孵化
準備一個容積500升、底部設有排水閥的孵化桶，在孵化桶內放置氣石充氣，將經過步驟處理過的受精卵放入孵化桶中孵化，受精卵孵化條件為水溫25-30℃，鹽度28-33，pH7.8～8.5，孵化密度為250-300萬粒受精卵/立方米，發現其中有死卵或未受精卵時要及時排除，死卵或未受精卵排掉後，每2小時換水一次，每次換水量為孵化桶容積的一半，以保持孵化桶內海水的清新。
2.根據權利要求1中一種駝背鱸與鞍帶石斑魚的人工雜交育種方法，其特徵在於：所述步驟（2）的b中，根據親魚口裂的大小確定飼料塊大小，駝背鱸親魚適合的飼料魚塊，長5-8厘米、寬2-3厘米，小魷魚可整條投餵；個體較大的魷魚切成兩段投喂，同樣大小的藍圓鰺，去頭去尾投餵。
3.根據權利要求2中一種駝背鱸與鞍帶石斑魚的人工雜交育種方法，其特徵在於：所述步驟（3）的b中，根據親魚口裂的大小確定飼料塊大小，鞍帶石斑魚親魚適合的飼料魚塊，長10-15厘米、寬5-8厘米，鮐魚需切除頭尾，整條投餵；強化培育期間，在每塊飼料中塞入規格為50毫克的維生素E軟膠囊1粒投餵。
4.根據權利要求3所述的一種駝背鱸與鞍帶石斑魚的人工雜交育種方法，其特徵在於：所述步驟（5）的a中，將取出的精液注入指管，密封，4℃暫存，備用，暫存的精液在一周內仍有授精能力。
5.根據權利要求4所述的一種駝背鱸與鞍帶石斑魚的人工雜交育種方法，其特徵在於：所述步驟（5）的b中，培養在網箱中的駝背鱸親魚，達到性成熟後，可自然產卵，此時須認真觀察群體活動情況，發現親魚不攝食，則可能當天產卵，須隨時準備進行人工取卵，一旦發現有親魚有交配行為，即立即將雌魚捕起，實施擠卵。
6.根據權利要求5所述的一種駝背鱸與鞍帶石斑魚的人工雜交育種方法，其特徵在於：所述步驟（6）中，排除死卵或未受精卵的方法：讓氣石停止充氣10～15分鐘，正常的受精卵在停氣後會上浮，而死卵或未受精卵及少量雜物將沉於孵化桶的底部，開啟孵化桶底部的排水閥，緩慢排水，將死卵或未受精卵及雜物排出，一邊排水一邊檢查，當排出的水中出現正常受精卵時，則關閉排水閥，停止排水，恢復充氣，並向孵化桶補充海水至正常水位；死卵或未受精卵排掉後，每2小時換水一次，每次換水量為孵化桶容積的一半，以保持孵化桶內海水的清新。
實施方式
《一種駝背鱸與鞍帶石斑魚的人工雜交育種方法》包括以下步驟：
（1）親本選擇
a.雌性親本：選擇5齡以上、體型正常、無病害、活力強的健康駝背鱸作為雌性親本；
b.雄性親本：選擇6齡以上、體體型正常、無病害、活力強的健康鞍帶石斑魚作為雄性親本；
為保證二種親魚同步達到性成熟。鞍帶石斑魚選擇室內水泥池加溫培育，駝背鱸選擇海區網箱培育。
（2）駝背鱸親魚的網箱培育
a.海區選擇：選擇年最低水溫不低於18℃，海水鹽度28-33，水流0.2-0.4米/秒，水深不小於8米的海區用於親魚的網箱培育，培育網箱規格為6米×6米×5米，網目2a＝5厘米，培育密度300-500尾/箱。培育過程中，需經常更換網衣，防止網目被堵塞，影響網箱的水體交換；
b.飼養種類與投餵量：小魷魚、藍圓鰺、鮐魚，每天下午投餵1次，投餵量控制在魚體重的2％-3％，實際投餵量受天氣、水溫等條件影響而增減，強化培育期間，每天投餵2次，上下午各1次，日投餵量為親魚體重的3％-4％；
（3）鞍帶石斑魚親魚的池塘培育
a.培育池：鞍帶石斑魚選擇池塘培育，培育密度50-60尾/畝；池塘水源清潔，培育池面積1畝，水深3-3.5米，設定進排水口各1個；為保持水源清潔，每天需換水10-15％；冬季在池塘上方加蓋聚乙烯農用薄膜，起到保溫的作用；
b.飼料種類與投餵量：鮐魚，三天投餵1次，投餵量控制在魚體重的2％-4％，實際投餵量受天氣、水溫等條件影響而增減速；
（4）親魚發情、產卵的判斷：親魚的性腺發育受水溫調控。水溫達到25℃，駝背鱸進入繁殖期。水溫達到27℃，鞍帶石斑魚進入繁殖期。以三亞海區為例，3月份中旬，海區水溫上升到23℃；此時蓋有溫棚的鞍帶石斑魚培育池塘，水溫大約25℃。可同時對二種親魚進行強化培育。
a.海區水溫上升到24℃，駝背鱸親魚性腺開始成熟，每周一次從親魚群體中挑選部分個體進行成熟度檢查，從群體中選擇雌性駝背鱸，置於平台上，實施檢查，外觀上腹部隆起，生殖孔微紅，即可初步判定為達到性成熟；
b.池塘水溫25-26℃，鞍帶石斑魚性腺開始成熟，每周一次從親魚群體中挑選部分個體進行成熟度檢查；從群體中選擇雄性個體，捕起，置於合適的平台上，用手巾著蓋集魚的眼睛，實施檢查，生殖孔微紅，輕壓腹部，能擠出乳白色的精液，即達到成熟；
（5）人工受精
a.采精：對能擠出精液的鞍帶石斑魚個體，性腺檢查中發現精液良好，即可取精，用乾毛巾將魚腹部擦乾，酒精棉球對生殖孔消毒，用手在魚體腹部，從前向生殖孔方向推擠，任乳白色的精液從生殖孔流出，用50毫升注射器，將精液吸取；
b.擠卵：將駝背鱸雌性親魚置於平台上，用濕毛巾將魚體包裹，暴露生殖孔，操作者戴上乳膠手套，用手指插入魚的生殖孔，使生殖孔打開，用手在魚腹部從前向生殖孔推擠，成熟卵子即可流出。在生殖孔下方用盤接住流出的卵子；
c.人工受精：向盛有卵子的盆內加入乾淨海水，一邊加水一邊輕輕攪動，同進加入備用的鞍帶石斑魚精液，精液加入量為每公斤卵子1毫升，混勻後靜置3-4分鐘，用乾淨的海水沖洗受精卵；
（6）受精卵的孵化
準備一個容積500升、底部設有排水閥的孵化桶，在孵化桶內放置氣石充氣，將經過步驟（5）處理過的受精卵放入孵化桶中孵化，受精卵孵化條件為水溫25-30℃，鹽度28-33，pH7.8～8.5，孵化密度為250-300萬粒受精卵/立方米，發現其中有死卵或未受精卵時要及時排除，死卵或未受精卵排掉後，每2小時換水一次，每次換水量為孵化桶容積的一半，以保持孵化桶內海水的清新。
進一步地，所述步驟（2）的b中，根據親魚口裂的大小確定飼料塊大小，駝背鱸親魚適合的飼料魚塊長5-8厘米，寬2-3厘米，小魷魚可整條投餵；個體較大的魷魚切成兩段投喂，同樣大小的藍圓鰺，去頭去尾投餵。
進一步地，所述步驟（3）的b中，根據親魚口裂的大小確定飼料塊大小，鞍帶石斑魚親魚適合的飼料魚塊，長10-15厘米、寬5-8厘米，一般情況下，鮐魚需切除頭尾，整條投餵；強化培育期間，在每塊飼料中塞入維生素E軟膠囊1粒（50毫克）投餵。
進一步地，所述步驟（5）的a中，將取出的精液注入試管，密封，4℃暫存，備用，暫存的精液在一周內仍有受精能力。
進一步地，所述步驟（5）的b中，培養在網箱中的駝背魚親魚，達到性成熟後，可自然產卵，此時須認真觀察群體活動情況，發現親魚不攝食，則可能當天產卵，須隨時準備進行人工取卵，一旦發現有親魚有交配行為，即立即將雌魚捕起，實施擠卵。
進一步地，所述步驟（6）中，排除死卵或未受卵的方法：讓氣石停止充氣10～15分鐘，正常的受精卵在停氣後會上浮，而死卵或未受精卵及少量雜物將沉於孵化桶的底部，開啟孵化桶底部的排水閥，緩慢排水，將死卵或未受精卵及雜物排出，一邊排水一邊檢查，當排出的水中出現正常受精卵時，則關閉排水閥，停止排水，恢復充氣，並向孵化桶補充海水至正常水位。死卵或未受精卵排掉後，每2小時換水一次，每次換水量為孵化桶容積的一半，以保持孵化桶內海水的清新。
最後，孵化8小時左右，胚胎髮育至原腸期後，即可將受精卵包裝、運輸至育苗場。受精卵在孵化24-26小時後，即可孵出仔魚，用於人工育苗。
榮譽表彰
2019年9月，《一種駝背鱸與鞍帶石斑魚的人工雜交育種方法》獲得第二屆海南省專利獎優秀獎。
