《一種治療失眠症的中藥複方製劑及其製備方法》是江蘇揚子江藥業集團有限公司於2003年9月18日申請的專利，該專利的申請號為031582486，公布號為CN1493353，授權公布日為2004年5月5日，發明人是高鵬翔、李旭東、吳沉、陸宏國、張玉斌。
《一種治療失眠症的中藥複方製劑及其製備方法》是由下列原料或者下列原料的醇和水或水提取物或通過大孔吸附樹脂的洗脫物作活性成分，組成為：百合500－1200克，刺五加600－1500克，首烏藤500－1200克，合歡花200－688克，珍珠母500－1200克，石膏400－988克，酸棗仁200－688克，茯苓50－488克，遠志200－688克，玄參200－688克，地黃（生）200－688克，麥冬200－688克，五味子200－688克，燈心草50－488克，丹參200－688克，將上述十五種原料的醇或水或者通過大孔吸附樹脂的洗脫物混合均勻，並製成所需劑型。該藥具有滋陰清熱，養心安神的功能，用於肝鬱陰虛型失眠，或入睡困難，或多夢多醒，或醒後不眠，或頭暈乏力，或煩躁易怒，或心悸不安等治療。
2007年，《一種治療失眠症的中藥複方製劑及其製備方法》獲得第五屆江蘇省專利項目獎優秀獎。
基本介紹
- 中文名：一種治療失眠症的中藥複方製劑及其製備方法
- 公布號：CN1493353
- 公布日：2004年5月5日
- 申請號：031582486
- 申請日：2003年9月18日
- 申請人：江蘇揚子江藥業集團有限公司
- 地址：江蘇省泰州市揚子江南路1號
- 發明人：高鵬翔、李旭東、吳沉、陸宏國、張玉斌
- 分類號：A61K35/78、A61P25/20
- 代理機構：泰州地益專利事務所
- 類別：發明專利
- 代理人：朱元萍
專利背景,發明內容,技術方案,改善效果,權利要求,實施方式,榮譽表彰,
專利背景
睡眠占據了人類1/3左右的時間，它影響著每個人的工作效率，生活質量和壽命，最常見的睡眠障礙是失眠，失眠是指因大腦興奮性提高，造成睡眠時間不足或睡眠不熟，臨床上大都兩者詢鴉嚷並存。2003年9月前，中國國內外治療失眠的藥物，以西藥為主，但是西藥均有不同程度的成癮性，依賴性和停藥後失眠回跳等副作用及不良疊愉反應元寒恥乎；有的服後頭暈、乏力、嗜睡及對心、肝、腎臟損害等。因此，治療失眠的天然植物中成藥，是社會上的急迫需要。採用現代中藥提取新工藝，提煉精製而成的中藥製劑，通過臨床與實驗研究證明：它能調節人體的生理機能，明顯縮短入睡時間，延長睡眠時間，提高睡眠深度，減少夜醒次數，是一甩陵贈種較理想的中成藥製劑。
發明內容
技術方案
《一種治療失眠症的中藥複方製劑及其製備方法》主要由下列原料或者是下列原料的醇或水的提取物或通過大孔吸附樹脂的洗脫物作為活性成分組成：百合500-1200克，刺五加600-1500克，首烏藤500-1200克，合歡花200-688克，珍珠母500-1200克，石膏400-988克，酸棗仁200-688克，茯苓50-488克，遠志200-688克，玄參200-688克，地黃（生）200-688克，麥冬200-688克，五味子200-688克，燈心草50-488克，丹參200-688克
在上述中藥中較佳的原料重量配比為：百合500-1200克，刺五加600-1500克，首烏藤500-1200克，合歡花200-688克，珍珠母500-1200克，石膏400-988克，酸棗仁200-688克，茯苓50-488克，遠志200-688克，玄參200-688克，地黃（生）200-688克，麥冬200-688克，五味子200-688克，燈心草50-488克，丹參200-688克
該發明的最佳組成為：百合800克，刺五加1200克，首烏藤800克，合歡花400克，珍珠母800克，石膏600克，酸棗仁400克，茯苓200克，遠志400克，玄參400克，地黃（生）400克，麥冬400克，五味子400克，燈心草200克，丹參400。
上述的中藥製劑，可以是顆粒劑、膠囊劑、片劑、口服液、糖漿劑、丸劑或散劑等任何一種藥典中收載的劑型，中藥製劑的製備也可以參照常規中藥製劑的方法進行，但為了提高藥效，減少服藥量，《一種治療失眠症的中藥複方製劑及其製備方法》的中藥複方製劑最好採用下述製備方法。
將上述中藥製成該發明的複方中藥製劑的製備工藝為：
（1）稱取下列中藥作原料：百合500-1200克，刺五加600-1500克，首烏藤500-1200克，合歡花200-688克，珍珠母500-1200克，石膏400-988克，酸棗仁200-688克，茯苓50-488克，遠志200-688克，玄參200-688克，地黃（生）200-688克，麥冬200-688克，五味子200-688克，燈心草50-488克，丹參200-688克。
（2）將上述合歡花、酸棗仁、玄參、地黃、麥冬、燈心草、丹參、刺五加、遠志和五味子用醇/或水加熱回流，回流液通過大孔吸附樹脂，收集水/或醇的洗脫液，得到的洗脫液作為活性成分I；
（3）將百合、首烏藤用水或醇熱回流提取，得到的提取液作為活性成分II；
（4）將珍珠母、石膏、茯苓，用水或醇盛院檔熱回流提取，得到的提取液作為活性成分III；
（5）將上述活性成分I、II、III混合均勻，並製成所需劑型。
改善效果
五味子仁醇提取物五味子甲素、乙素等，其可明顯延長小鼠對戊巴比妥鈉或環己巴比妥鈉的睡眠時間；刺五加醇溶性成分中的異秦皮啶和遠志醇提取物有明顯的鎮靜作用；在步驟（2）中，刺五加、遠志和五味子優選的熱回流次數為二次，熱回流液體是40-80％的乙醇溶液，熱回流時間為第一次3小時，第二次2小時，溶劑量為第一次10倍量，第二次8倍量，最優選的熱回流液體是50％的乙醇溶液。另酸棗仁、地黃、燈心草、丹參、合歡花、麥冬、玄參優選熱回流次數為三次，熱回流液體為水，第一次2小時，第二、三次各1小時，溶劑量為第一次10倍量，第二、三次各8倍量。將上述醇提取回收乙醇後與水提物合併，通過大孔吸附樹脂吸附，然後再用適當溶劑洗脫。優選的大孔吸附樹脂型號為D101型，洗脫溶劑為50-80％的乙醇溶液，吸附和洗脫速度均控制在0.01-0.1毫升/分鐘·毫升（樹脂體積和店連提）之間，其中最佳的洗脫劑為70％的乙醇溶液，最佳吸附和洗脫速度均控制在0.05毫升/分鐘·毫升（樹諒牛照脂體積）。
首烏藤中主要成分大黃素、大黃酚、大黃素甲醚和百合中的主要成分（多種生物鹼）均為醇溶性物質，在步驟（3）中，優選的熱回流次數為兩次，熱回流液體為30-65％的乙醇溶液，熱回流時間為第一次3小時，第二次2小時，溶劑量為第一次6倍量，第二次4倍量，最優選的熱回流液體是50％的乙醇溶液。
珍珠母、生石膏中活性成分均為水溶性成分。茯苓煎劑對小鼠有鎮靜作用。在步驟（4）中，優選的熱回流次數為三次，熱回流液體為水，熱回流時間為第一次2小時，第二、三次各1小時，溶劑量為第一次10倍量，第二、三次8倍量，更有利於有效成份的提取。
權利要求
1、一種治療失眠症的中藥複方製劑，其特徵在於它是由下列原料或者是下列原料的醇或水或者水提取物或者通過大孔吸附樹脂的洗脫物作為活性成分，組成為：百合500-1200克，刺五加600-1500克，首烏藤500-1200克，合歡花200-688克，珍珠母500-1200克，石膏400-988克，酸棗仁200-688克，茯苓50-488克，遠志200-688克，玄參200-688克，地黃（生）200-688克，麥冬200-688克，五味子200-688克，燈心草50-488克，丹參200-688克。
2、根據權利要求1所述的中藥複方製劑，其特徵在於其組成為：百合688-1100克，刺五加898-1400克，首烏藤788-1055克，合歡花298-500克，珍珠母688-1100克，石膏498-800克，酸棗仁298-500克，茯苓118-400克，遠志298-500克，玄參298-500克，地黃（生）298-500克，麥冬298-500克，五味子298-500克，燈心草118-400克，丹參298-500克。
3、根據權利要求1或2所述的中藥複方製劑，其特徵在於組成為：百合800克，刺五加1200克，首烏藤800克，合歡花400克，珍珠母800克，石膏600克，酸棗仁400克，茯苓200克，遠志400克，玄參400克，地黃（生）400克，麥冬400克，五味子400克，燈心草200克，丹參400克。
4、一種治療失眠症的中藥複方製劑的製備方法
（1）稱取下列中藥作原料：百合500-1200克，刺五加600-1500克，首烏藤500-1200克，合歡花200-688克，珍珠母500-1200克，石膏400-988克，酸棗仁200-688克，茯苓50-488克，遠志200-688克，玄參200-688克，地黃（生）200-688克，麥冬200-688克，五味子200-688克，燈心草50-488克，丹參200-688克；
（2）將上述合歡花、酸棗仁、玄參、地黃、麥冬、燈心草、丹參、刺五加、遠志和五味子用醇或水加熱回流，回流液通過大孔吸附樹脂收集水/或醇的洗脫液，得到的洗脫液作為活性成分I；
（3）將百合、首烏藤用水或醇熱回流提取，得到的提取液作為活性成分II；
（4）將珍珠母、石膏、茯苓用醇或水熱回流提取物，得到的提取物作為活性成分III；
（5）將上述活性成分I、II、III混合均勻，並製得所需劑型。
5、根據權利要求4所述的製備方法，其步驟（2）中回流為三次，熱回液體為40-80％的乙醇溶液，洗脫液為40-80％的乙醇溶液。
6、根據權利要求5所述的製備方法，其步驟（2）的熱回流液體最佳為50％的乙醇溶液，洗脫液亦是50％的乙醇溶液。
7、根據權利要求4所述的製備方法，其步驟（3）中熱回流次數為二次，熱回流液體為30-80％的乙醇溶液，熱回流時間為第一次3小時，第二次2小時。
8、根據權利要求7所述的製備方法，其步驟（3）的熱回流液體最佳為50％的乙醇溶液。
9、根據權利要求4所述的製備方法，其步驟（4）中的熱回流次數為三次，熱回流液體最佳為水、熱回流時間第一次2小時，第二、三次各1小時。
實施方式
實施例一 《一種治療失眠症的中藥複方製劑及其製備方法》中藥膠囊a的製備：
（1）按下列重量配比稱取各組分：百合800克，刺五加1200克，首烏藤800克，合歡花400克，珍珠母800克，石膏600克，酸棗仁400克，茯苓200克，遠志400克，玄參400克，地黃（生）400克，麥冬400克，五味子400克，燈心草200克，丹參400克。
（2）按上述配比稱取合歡花、酸棗仁、玄參、地黃、麥冬、燈心草、丹參、用水加熱回流，回流提取三次，第一次加10倍量水，2小時，第二、三次各加8倍量水，各1小時，煎煮液濾過，得濾液，作為備用I；
（3）按上述配比稱取刺五加、遠志和五味子，用50％乙醇溶液加熱回流提取兩次，第一次加10倍量50％乙醇回流3小時，第二次加8倍量50％乙醇回流2小時，濾過，合併濾液，回收乙醇至無醇味，作為備用II；
（4）合併I和II，經過大孔吸附樹脂吸附，吸附速度為0.05毫升/分鐘·毫升（樹脂體積），吸附完全後，先以水洗脫樹脂柱至洗出液無色，然後以70％的乙醇液進行洗脫，洗脫速度為0.05毫升/分鐘·毫升（樹脂體積），收集洗脫液待用（洗至洗出液無色）。
（5）按上述重量配比，稱取珍珠母、生石膏、茯苓，加水熱回流三次，第一次加10倍量2小時，第二、三次各加8倍量各1小時，合併煎液，靜置24小時後取上清液。
（6）按上述重量配比稱取百合、首烏藤，用50％的乙醇水溶液熱回流提取二次，第一次加6倍量50％乙醇水溶液，回流3小時，第二次加4倍量50％乙醇水溶液，回流2小時，濾過，合併濾液。
（7）合併（4）和（6）藥液，回收乙醇至盡。
（8）合併（5）和（7）藥液，濃縮收膏，80℃以下減壓乾燥，得乾膏（至乾膏水分≤5％）。
（9）取上述乾膏，粉碎過24目，得乾膏粉，加入乾膏粉量8％的澱粉，混合均勻，80℃以下減壓乾燥，水分≤1.0％，裝入1號膠囊，每粒0.27克，即得該發明所制膠囊a，每克藥粉相當於生藥材28.9克。
實施例二 該發明中藥膠囊b的製備
（1）按下列重量配比稱取各組分：百合750克，刺五加950克，首烏藤800克，合歡花350克，珍珠母700克，石膏600克，酸棗仁400克，茯苓200克，遠志350克，玄參350克，地黃（生）500克，麥冬500克，五味子350克，燈心草200克，丹參500克。
（2）按上述配比稱取合歡花、酸棗仁、玄參、地黃、麥冬、燈心草、丹參、用水洗淨泥土，灰塵，加入生藥10倍量水，浸泡2小時後煮提，以水開計算時間，第一次煮提2小時，第二次加入6倍量水煮提1.5小時，第三次加入5倍量水煮提1小時；合併三次提取液，放置過液，抽取上清，加入乙醇，按常規進行醇沉，即真空減壓濃縮至相對密度1∶1後，加入95％乙醇，使含醇量達到70％，邊加乙醇邊強力攪拌小時，放置過夜（約24小時），抽取上清液，回收乙醇濃縮至比重達1∶1.5，噴霧乾燥；
（3）按上述配比稱取刺五加、遠志、五味子、百合和首烏藤，用50％乙醇水溶液加熱回流提取三次，第一次加10倍量50％乙醇回流3小時，第二、三次各加8倍量50％乙醇各回流2小時，將三次回流液合併，回收乙醇至無醇味，作為上柱藥液，此藥液經過大孔吸附樹脂，吸附速度為0.08毫升/分鐘·毫升（樹脂體積），吸附完全後，先用水洗脫樹脂柱至洗出液無色，然後用70％的乙醇水液進行洗脫，洗脫速度為0.08毫升/分鐘·毫升（樹脂體積），收集洗脫液，回收乙醇後，濃縮、乾燥；
（4）按上述重量配比稱取珍珠母、生石膏、茯苓，加水熱回流三次，第一次8倍量3小時，第二、三次各加6倍量各1.5小時，合併煎液，靜置24小時，取上清液，濃縮、乾燥。
（5）取（2）、（3）和（4）中乾燥物混合、粉碎，過60目篩，加入乾膏粉量2％的微粉矽膠，灌裝於0號膠囊，每粒裝0.32克，即得到該發明所制膠囊b，每1克藥粉相當於生藥材約24.1克。
實施例三 該發明中藥膠囊C的製備
（1）按下列重量配比稱取各組分：百合700克，刺五加1200克，首烏藤700克，合歡花500克，珍珠母700克，石膏700克，酸棗仁500克，茯苓200克，遠志500克，玄參500克，地黃（生）500克，麥冬200克，五味子500克，燈心草200克，丹參500克。
（2）按上述配比稱取合歡花、酸棗仁、玄參、地黃、麥冬、燈心草、丹參，用水加熱回流提取三次，第一次加10倍量水3小時，第二、三次各加8倍量，各回流1.5小時，合併煎煮液，濾過，得濾液。濾液經過大孔吸附樹脂吸附，吸附速度為0.15毫升/分鐘·毫升（樹脂體積），吸附完全後，先用水洗脫樹脂，至洗出液無色，然後用50％的乙醇進行洗脫，洗脫速度為0.10毫升/分鐘·毫升（樹脂體積），收集洗脫液，回收乙醇至無醇味，備用。
（3）按上述重量配比稱取刺五加、遠志、五味子、百合、首烏藤，用70％的乙醇水溶液熱回流提取二次，第一次加8倍量70％乙醇水溶液回流3小時，第二次加6倍量70％乙醇水溶液回流2小時，合併二次提取液，放置過夜。抽取上清液，加入水，按常規方法進行水沉，取水沉後的上清液。
（4）按上述重量配比，稱取珍珠母、生石膏、茯苓，加水熱回流二次，第一次加10倍量2小時，第二次加8倍量1小時，合併煎液，靜置24小時後，取上清液。
（5）合併（2）、（3）、（4）提取液，濃縮、乾燥得乾膏。
（6）將乾膏粉碎過24目篩，加入乾膏量6％的澱粉，混合均勻，填充於1號膠囊中，每粒0.3克，即得到《一種治療失眠症的中藥複方製劑及其製備方法》所制膠囊C，每1克藥粉相當於生藥材約27克。
實施例四
該發明中藥複方顆粒劑的製備：按實施例一所述的方法，但所得藥粉按常規中藥顆粒劑的製備方法製成顆粒劑，每袋裝5克，約含藥粉1.2克，每1克藥粉相當於生藥材約20克。
實施例五
該發明中藥複方片劑的製備：按實施一所述的方法，但所得藥粉按常規中藥片劑的製備方法製成片劑，每片約含藥粉0.4克，每1克藥粉相當於生藥材20克。
實施例六
該發明中藥複方丸劑的製備按實施一所述的方法，但所得藥粉按常規中藥中藥丸劑的製備方法製成丸劑，每丸約含藥粉0.3克，每1克藥粉相當於生藥材20克。
動物實施例一 該發明膠囊劑a的動物急性毒性試驗
一、實驗方法
按急性毒性試驗方法預試一次灌胃劑量後，動物全部死亡的最小劑量和全部存活的最大劑量，擬在最小劑量和最大劑量間分為6個劑量組試驗，每組動物10隻，雌雄各半。給藥後觀察並記錄給藥七天內動物所出現的毒副反應、死亡動物數及屍檢，屍檢如有病變組織則做組織學鏡檢，結果按Bliss法微機程式計算LD50、95％置信限及斜率B。實驗過程中室溫控制在20～25℃。
二、結果
膠囊劑a混懸溶液以0.8毫升/20克體積灌胃給藥，動物全部死亡的最小劑量及全部存活的最大劑量分別為19.13克/千克，10.68克/千克，按等比級分為6個劑量組，劑量之間比為0.89，實驗結果見表1。試驗中觀察，死亡動物多數在第二天死亡，死亡前可見抽蓄豎毛、活動減少、呼吸減慢，直至死亡，死亡動物屍檢肉眼未見明顯病變。
表1：小鼠灌胃給藥半數致死量-LD50（Bliss）（加權線性回歸） | |||||
劑量（克/千克） | 對數劑量（X） | 動物數（只） | 死亡數（只） | 死亡率（%） | 機率單位（Y） |
10.68 | 1.0286 | 10 | 0 | 0 | 3.0000 |
12.00 | 1.0792 | 10 | 2 | 20 | 4.1584 |
13.48 | 1.1297 | 10 | 4 | 40 | 4.7466 |
15.15 | 1.1804 | 10 | 7 | 70 | 5.5244 |
17.02 | 1.2310 | 10 | 9 | 90 | 6.2815 |
19.136 | 1.2817 | 10 | 10 | 100 | 7.4000 |
E（Y）＝16.4234X-13.8045B＝16.4234；LD50＝13.96克/千克；95％的置信限：13.16-14.82克/千克。
動物實施例二 該發明膠囊劑a的動物長期毒性實驗
一、試驗方法
（一）分組和劑量
80隻大鼠按性別體重均勻隨機分為四組，每組20隻，雌雄各半，每5隻同性大鼠同籠飼養。
低劑量組：每組劑量0.4克乾粉/千克，相當於人用劑量（0.0338克/千克）約12倍。
中劑量組：每組劑量1.5克乾粉/千克，相當於人用劑量約44倍。
高劑量組：每組劑量3.0克乾粉/千克，相當於人用劑量約89倍。
對照組：與給藥組等容量的生理鹽水。
（二）給藥方法
灌胃給藥，每日一次，每周6天，連續給藥二個月。灌胃容量：1毫升/100克體重。
（三）檢測項目
1、體重及一般觀察：實驗前及實驗開始後半個月稱體重一次，並按體重調整給藥劑量，每天觀察並記錄動物的外以體徵，行為活動，糞便狀況。實驗末（給藥二個月後）最後一次給藥後24小時斷頭剖殺7/10隻大鼠作以下檢查。
2、血液學指標：紅細胞及網織紅細胞計數，血紅蛋白（Hb），白細胞總數及其分類，血小板、凝血時間。用Cou-Tter2F6型血型計數儀測定。
3、尿常規檢查：取每隻動物尿作尿常規檢查。
4、血液生化指標：天門冬氨酸基轉換酶（穀草酸AST）、丙氨酸氨基轉換酶（谷丙酶ALT）、鹼性磷酸酶（ALT）、尿素氮（BUN）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、血糖（GLU）、總膽紅素（T-BIL）、肌肝（Crea）、總膽固醇（T-CHO），用IL-508自動生化分析儀測定。
5、系統屍解和病理組織學檢查
（1）肉眼觀察各臟器病變
（2）臟器係數：心、腦、肺、肝、脾、腎、腎上腺、性腺、前列腺、甲狀腺稱重，求算各臟器的臟器係數（臟器係數＝臟器重量/體重）×100％）。
（3）組織學檢查：動物標本用10％福馬林液固定，每個動物分別取心、腦、肺、肺、脾、腎、胃、腸、胰、膀胱、前列腺、腎上腺、甲狀腺、胞腺、性腺（雄性睪丸、雌性子宮、卵巢）、視神經、骨髓、淋巴結等，分別隨機取一塊作石蠟切片，HE染色。顯微鏡觀察前，每組隨機抽取二例，用多頭鏡集體觀察病變，統一標準後再分組觀察記錄。第2、3、4、5項均為實驗末，斷頭取血，剖殺動物取主要臟器後進行。
6、恢復期觀察：實驗末最後一次給藥後，留下的3/10隻大鼠停藥觀察2周后，再活殺檢查。
實驗末，觀察停藥兩周后大鼠的血尿常規、肝、腎功能均在正常範圍內，臟器的組織學檢查，各組間無明顯病變和差異。
動物實施例三 該發明膠囊劑a的主要藥效學試驗
劑量設備及給藥方法
1、受試物：高劑量組：2克乾粉/千克相當於人用劑量（0.0338克乾粉/千克）59倍；中劑量組：1克乾粉/千克相當於人用劑量30倍；低劑量組：0.5克乾粉/千克相當於人用劑量15倍。
2、陽性對照物：安定組0.0005克/千克。
3、空白對照組：生理鹽水。
以上均為灌胃給藥，給藥量為0.5毫升/20克。
一、鎮靜作用
1、方法：選用雌性小鼠各組動物分別給藥60分鐘後，放入直徑17cm，高9cm的有機玻璃盒中，適應5分鐘後，記2分鐘內走動時間和舉雙前肢次數。
2、結果：實驗結果如下表1
表1：膠囊劑a對小鼠的鎮靜作用（X±SD，N＝10） | |||
組別 | 劑量（克/千克） | 走動時間（S） | 前肢上舉次數（次） |
生理鹽水 | 103.67±11.62 | 16.67±6.09 | |
膠素劑a | 0.5 | 83.50±14.87* | 17.80±5.05 |
1 | 82.83±15.18* | 14.43±5.54 | |
2 | 76.71±10.75** | 13.57±4.96 | |
安定 | 0.0005 | 21.56±9.69** | 2.03±1.61** |
註：和生理鹽水組相比*0.05＞P＞0.01；**P＜0.01
3、結論：灌服膠囊劑a後對小鼠正常活動稍有影響，表現小鼠在一定時間內走動時間同生理鹽水對照組小鼠相比稍有降低0.5克/千克和1克/千克劑量組統計上有顯著差異，2克/千克劑量組統計上有非常顯著差異。
二、催眠作用
1、延長戊巴比妥鈉的睡眠時間
（1）方法：各組健康小鼠分別給予受試後60分鐘，每鼠腹腔注射戊巴比妥鈉50毫克/千克，以翻正反射消失為睡眠指標，記錄睡眠時間。
（2）結果：實驗結果見表2
表2：膠囊劑a的催眠作用（X±SD，N＝10） | ||
組別 | 劑量（克/千克） | 睡眠時間（分鐘） |
生理鹽水 | 69.5±15.5 | |
膠奏劑a | 2 | 93.0±21.0* |
1 | 86.1±16.8* | |
0.5 | 78.8±16.4 | |
安定 | 0.0005 | 298.6±28.3** |
註：和對照組相比0.01＜P＜0.05；**P＜0.01
（3）結論：小鼠灌服膠囊劑a後能協同戊巴比妥鈉的中樞抑制作用，延長睡眠時間，其中2克/千克、1克/千克劑量組均能使小鼠睡眠時間延長，與對照組相比統計上有顯著差異，0.5克/千克劑量組與對照組相比統計上無顯著差異。上述各組的睡眠時間短於安定5毫克/千克劑量組。
2、戊巴比妥鈉閾下催眠劑量試驗
（1）方法：先灌服受試藥物，30分鐘後腹腔注射戊巴比妥鈉25毫克/千克，翻正反射消失達1分鐘以上者記為發生睡眠，計算各組睡眠發生百分率。
（2）結果：試驗結果見表3
組別 | 劑量（克/千克） | 動物數（只） | 入眠動物數（只） | 入睡百分率関 |
生理鹽 | 10 | 0 | 0 | |
水 | ||||
膠囊劑a | 2 | 10 | 10 | 100 |
1 | 10 | 10 | 100 | |
-0.5 | 10 | 9 | 90 | |
安定 | 0.0005 | 10 | 10 | 100 |
（3）結論：用戊巴比妥鈉閾劑量與膠囊劑a合用，觀察膠囊劑a與戊巴比妥的協同作用，如有協同作用，則可使用小鼠入睡個數增加。試驗表明小鼠灌服膠囊劑a後均能表現出與戊巴比妥鈉的協同作用，2克/千克和1克/千克劑量組小鼠的入睡百分率為100％，0.5克/千克劑量組入睡百分率為90％，相比之下對照組入睡的百分率為0％，因此反映出膠囊劑a具有協同催眠作用。
三、抗驚厥作用
1、方法：各組動物灌胃給藥60分鐘後，背部皮下注射硝酸士的寧1.5毫克/千克（濃度0.15m克/毫升，注射量0.2克毫升/20克），記錄注射結束至驚厥反應出現間的潛伏期。
2、結果：試驗結果如表4
組別 | 劑量（克/千克） | 驚厥潛伏期（分鐘） |
生理鹽水 | 4.96±0.84 | |
膠囊劑a | 2 | 8.98±1.59** |
1 | 6.33±1.09** | |
0.5 | 6.11±1.09 | |
安定 | 0.0005 | 不出現驚厥 |
註：和生理鹽水組相比，*0.05＞P＞0.01；**P＜0.01
3、結論：士的寧對脊髓有選擇性興奮作用，大劑量士的寧可引起動物強直性驚厥，小鼠的致驚劑量為1.5毫克/千克（皮下或腹腔注射）。小鼠灌服試驗劑量的膠囊劑a不能對抗士的寧引起的驚厥作用，2克/千克以下劑量組的驚厥發生率為100％，小鼠灌服安定5毫克/千克後能完全對抗1.5毫克/千克士的寧引起的驚厥作用。膠囊劑a能延長驚厥發生的潛伏期，2克/千克和1克/千克劑量組的驚厥潛伏期同對照組相比統計上有非常顯著差異，0.5克/千克劑量組統計上有顯著差異。人上可看出膠囊劑a有較弱的抗驚厥作用。
結語：上述試驗結果表明，膠囊劑a膠囊能明顯減少動物自發活動，延長士的寧引起的驚厥發生潛伏期。與戊巴比妥鈉協同作用，可顯著增加其閾下劑量的小鼠入睡個數，1克/千克以上劑量的膠囊劑a膠囊能協同戊巴比妥鈉作用延長小鼠睡眠時間。因此，該藥具有一定的鎮靜、催眠和弱抗驚厥作用。
套用例四 該發明膠囊劑a治療失眠的臨床方案
該研究對401例失眠病人進行了隨機雙盲雙模擬和擴大臨床試驗（開放組），其中甲組100例，乙組100例，開放組201，門診觀察405例，住院觀察196例，對病例來源及分布情況，性別年齡、病理分布情況、病例主要症狀分布情況，治療前PSQI計分程度分布情況，病例治療前舌、脈分布情況，經統計學處理，P值均大於0.05，組間無顯著性差異。
研究結果表明：
1、該次試驗結果表明，甲、乙兩組在治療陰虛火旺證之失眠的主症療效方面顯示了較好效果。其總顯效率、總有效率兩組分別為41％、88％和21％、70％，經統計學處理，甲、乙兩組在總顯效率、總有效率方面均有顯著性差異（P＜0.01），說明甲組藥療效優於乙組。而且，其差異主要反映在治療重度失眠患者，亦就是說治療重度失眠甲組優於乙組（P＜0.05）。
2、該次試驗結果還表明，甲、乙兩組藥物對中醫陰虛火旺證候的治療亦有較好的療效。各症狀治療前後自身比較，甲組均有極顯著性差異（P＜0.01），乙組除耳鳴、健忘改善不佳外，對余症均有極顯著性並異（P＜0.01），甲、乙兩組間比較，在改善睡眠時間、睡眠質量、失眠頻率、頭暈方面，兩組比較差異有顯著性意義（P＜0.05）。說明在中醫證候療效方面甲組優於乙組。
3、該次臨床試驗引用了匹茲堡睡眠質量指數（PSQI）以評價甲、乙兩組藥的對睡眠質量的影響情況，其結果表明，甲、乙兩組藥物均降低PSQI各成份分值，比較甲、乙兩組在入睡時間、睡眠時間、睡眠效率、日間功能方面，其差異顯著有顯著性意義（P＜0.05-P＜0.01）。說明，甲級藥物在這些方面的治療效果明顯優於乙組。
4、同時，小樣本睡眠腦電圖檢查結果表明，甲組藥物治療後患者睡眠狀態及睡眠質量較好。但由於樣本太小（甲組15例、乙組10例），經統計學處理，甲、乙兩組比較無顯著性差異（P＞0.05）。
5、在整個試驗中，各組安全性指標均無顯著性變化，表明所試驗藥物均比較安全。
膠囊劑a功能滋陰清熱、養心安神。功能主治陰虛火旺所致失眠症。其症見失眠或多夢易醒，頭暈耳鳴，口乾咽燥，手足心熱，心悸健忘，舌紅少苔，脈細數。
榮譽表彰
2007年，《一種治療失眠症的中藥複方製劑及其製備方法》獲得第五屆江蘇省專利項目獎優秀獎。
該發明的最佳組成為：百合800克，刺五加1200克，首烏藤800克，合歡花400克，珍珠母800克，石膏600克，酸棗仁400克，茯苓200克，遠志400克，玄參400克，地黃（生）400克，麥冬400克，五味子400克，燈心草200克，丹參400。
上述的中藥製劑，可以是顆粒劑、膠囊劑、片劑、口服液、糖漿劑、丸劑或散劑等任何一種藥典中收載的劑型，中藥製劑的製備也可以參照常規中藥製劑的方法進行，但為了提高藥效，減少服藥量，《一種治療失眠症的中藥複方製劑及其製備方法》的中藥複方製劑最好採用下述製備方法。
將上述中藥製成該發明的複方中藥製劑的製備工藝為：
（1）稱取下列中藥作原料：百合500-1200克，刺五加600-1500克，首烏藤500-1200克，合歡花200-688克，珍珠母500-1200克，石膏400-988克，酸棗仁200-688克，茯苓50-488克，遠志200-688克，玄參200-688克，地黃（生）200-688克，麥冬200-688克，五味子200-688克，燈心草50-488克，丹參200-688克。
（2）將上述合歡花、酸棗仁、玄參、地黃、麥冬、燈心草、丹參、刺五加、遠志和五味子用醇/或水加熱回流，回流液通過大孔吸附樹脂，收集水/或醇的洗脫液，得到的洗脫液作為活性成分I；
（3）將百合、首烏藤用水或醇熱回流提取，得到的提取液作為活性成分II；
（4）將珍珠母、石膏、茯苓，用水或醇熱回流提取，得到的提取液作為活性成分III；
（5）將上述活性成分I、II、III混合均勻，並製成所需劑型。
改善效果
五味子仁醇提取物五味子甲素、乙素等，其可明顯延長小鼠對戊巴比妥鈉或環己巴比妥鈉的睡眠時間；刺五加醇溶性成分中的異秦皮啶和遠志醇提取物有明顯的鎮靜作用；在步驟（2）中，刺五加、遠志和五味子優選的熱回流次數為二次，熱回流液體是40-80％的乙醇溶液，熱回流時間為第一次3小時，第二次2小時，溶劑量為第一次10倍量，第二次8倍量，最優選的熱回流液體是50％的乙醇溶液。另酸棗仁、地黃、燈心草、丹參、合歡花、麥冬、玄參優選熱回流次數為三次，熱回流液體為水，第一次2小時，第二、三次各1小時，溶劑量為第一次10倍量，第二、三次各8倍量。將上述醇提取回收乙醇後與水提物合併，通過大孔吸附樹脂吸附，然後再用適當溶劑洗脫。優選的大孔吸附樹脂型號為D101型，洗脫溶劑為50-80％的乙醇溶液，吸附和洗脫速度均控制在0.01-0.1毫升/分鐘·毫升（樹脂體積）之間，其中最佳的洗脫劑為70％的乙醇溶液，最佳吸附和洗脫速度均控制在0.05毫升/分鐘·毫升（樹脂體積）。
首烏藤中主要成分大黃素、大黃酚、大黃素甲醚和百合中的主要成分（多種生物鹼）均為醇溶性物質，在步驟（3）中，優選的熱回流次數為兩次，熱回流液體為30-65％的乙醇溶液，熱回流時間為第一次3小時，第二次2小時，溶劑量為第一次6倍量，第二次4倍量，最優選的熱回流液體是50％的乙醇溶液。
權利要求
1、一種治療失眠症的中藥複方製劑，其特徵在於它是由下列原料或者是下列原料的醇或水或者水提取物或者通過大孔吸附樹脂的洗脫物作為活性成分，組成為：百合500-1200克，刺五加600-1500克，首烏藤500-1200克，合歡花200-688克，珍珠母500-1200克，石膏400-988克，酸棗仁200-688克，茯苓50-488克，遠志200-688克，玄參200-688克，地黃（生）200-688克，麥冬200-688克，五味子200-688克，燈心草50-488克，丹參200-688克。
2、根據權利要求1所述的中藥複方製劑，其特徵在於其組成為：百合688-1100克，刺五加898-1400克，首烏藤788-1055克，合歡花298-500克，珍珠母688-1100克，石膏498-800克，酸棗仁298-500克，茯苓118-400克，遠志298-500克，玄參298-500克，地黃（生）298-500克，麥冬298-500克，五味子298-500克，燈心草118-400克，丹參298-500克。
3、根據權利要求1或2所述的中藥複方製劑，其特徵在於組成為：百合800克，刺五加1200克，首烏藤800克，合歡花400克，珍珠母800克，石膏600克，酸棗仁400克，茯苓200克，遠志400克，玄參400克，地黃（生）400克，麥冬400克，五味子400克，燈心草200克，丹參400克。
4、一種治療失眠症的中藥複方製劑的製備方法
（1）稱取下列中藥作原料：百合500-1200克，刺五加600-1500克，首烏藤500-1200克，合歡花200-688克，珍珠母500-1200克，石膏400-988克，酸棗仁200-688克，茯苓50-488克，遠志200-688克，玄參200-688克，地黃（生）200-688克，麥冬200-688克，五味子200-688克，燈心草50-488克，丹參200-688克；
（2）將上述合歡花、酸棗仁、玄參、地黃、麥冬、燈心草、丹參、刺五加、遠志和五味子用醇或水加熱回流，回流液通過大孔吸附樹脂收集水/或醇的洗脫液，得到的洗脫液作為活性成分I；
（3）將百合、首烏藤用水或醇熱回流提取，得到的提取液作為活性成分II；
（4）將珍珠母、石膏、茯苓用醇或水熱回流提取物，得到的提取物作為活性成分III；
（5）將上述活性成分I、II、III混合均勻，並製得所需劑型。
5、根據權利要求4所述的製備方法，其步驟（2）中回流為三次，熱回液體為40-80％的乙醇溶液，洗脫液為40-80％的乙醇溶液。
6、根據權利要求5所述的製備方法，其步驟（2）的熱回流液體最佳為50％的乙醇溶液，洗脫液亦是50％的乙醇溶液。
7、根據權利要求4所述的製備方法，其步驟（3）中熱回流次數為二次，熱回流液體為30-80％的乙醇溶液，熱回流時間為第一次3小時，第二次2小時。
8、根據權利要求7所述的製備方法，其步驟（3）的熱回流液體最佳為50％的乙醇溶液。
9、根據權利要求4所述的製備方法，其步驟（4）中的熱回流次數為三次，熱回流液體最佳為水、熱回流時間第一次2小時，第二、三次各1小時。
實施方式
實施例一 《一種治療失眠症的中藥複方製劑及其製備方法》中藥膠囊a的製備：
（1）按下列重量配比稱取各組分：百合800克，刺五加1200克，首烏藤800克，合歡花400克，珍珠母800克，石膏600克，酸棗仁400克，茯苓200克，遠志400克，玄參400克，地黃（生）400克，麥冬400克，五味子400克，燈心草200克，丹參400克。
（2）按上述配比稱取合歡花、酸棗仁、玄參、地黃、麥冬、燈心草、丹參、用水加熱回流，回流提取三次，第一次加10倍量水，2小時，第二、三次各加8倍量水，各1小時，煎煮液濾過，得濾液，作為備用I；
（3）按上述配比稱取刺五加、遠志和五味子，用50％乙醇溶液加熱回流提取兩次，第一次加10倍量50％乙醇回流3小時，第二次加8倍量50％乙醇回流2小時，濾過，合併濾液，回收乙醇至無醇味，作為備用II；
（4）合併I和II，經過大孔吸附樹脂吸附，吸附速度為0.05毫升/分鐘·毫升（樹脂體積），吸附完全後，先以水洗脫樹脂柱至洗出液無色，然後以70％的乙醇液進行洗脫，洗脫速度為0.05毫升/分鐘·毫升（樹脂體積），收集洗脫液待用（洗至洗出液無色）。
（5）按上述重量配比，稱取珍珠母、生石膏、茯苓，加水熱回流三次，第一次加10倍量2小時，第二、三次各加8倍量各1小時，合併煎液，靜置24小時後取上清液。
（6）按上述重量配比稱取百合、首烏藤，用50％的乙醇水溶液熱回流提取二次，第一次加6倍量50％乙醇水溶液，回流3小時，第二次加4倍量50％乙醇水溶液，回流2小時，濾過，合併濾液。
（7）合併（4）和（6）藥液，回收乙醇至盡。
（8）合併（5）和（7）藥液，濃縮收膏，80℃以下減壓乾燥，得乾膏（至乾膏水分≤5％）。
（9）取上述乾膏，粉碎過24目，得乾膏粉，加入乾膏粉量8％的澱粉，混合均勻，80℃以下減壓乾燥，水分≤1.0％，裝入1號膠囊，每粒0.27克，即得該發明所制膠囊a，每克藥粉相當於生藥材28.9克。
實施例二 該發明中藥膠囊b的製備
（1）按下列重量配比稱取各組分：百合750克，刺五加950克，首烏藤800克，合歡花350克，珍珠母700克，石膏600克，酸棗仁400克，茯苓200克，遠志350克，玄參350克，地黃（生）500克，麥冬500克，五味子350克，燈心草200克，丹參500克。
（2）按上述配比稱取合歡花、酸棗仁、玄參、地黃、麥冬、燈心草、丹參、用水洗淨泥土，灰塵，加入生藥10倍量水，浸泡2小時後煮提，以水開計算時間，第一次煮提2小時，第二次加入6倍量水煮提1.5小時，第三次加入5倍量水煮提1小時；合併三次提取液，放置過液，抽取上清，加入乙醇，按常規進行醇沉，即真空減壓濃縮至相對密度1∶1後，加入95％乙醇，使含醇量達到70％，邊加乙醇邊強力攪拌小時，放置過夜（約24小時），抽取上清液，回收乙醇濃縮至比重達1∶1.5，噴霧乾燥；
（3）按上述配比稱取刺五加、遠志、五味子、百合和首烏藤，用50％乙醇水溶液加熱回流提取三次，第一次加10倍量50％乙醇回流3小時，第二、三次各加8倍量50％乙醇各回流2小時，將三次回流液合併，回收乙醇至無醇味，作為上柱藥液，此藥液經過大孔吸附樹脂，吸附速度為0.08毫升/分鐘·毫升（樹脂體積），吸附完全後，先用水洗脫樹脂柱至洗出液無色，然後用70％的乙醇水液進行洗脫，洗脫速度為0.08毫升/分鐘·毫升（樹脂體積），收集洗脫液，回收乙醇後，濃縮、乾燥；
（4）按上述重量配比稱取珍珠母、生石膏、茯苓，加水熱回流三次，第一次8倍量3小時，第二、三次各加6倍量各1.5小時，合併煎液，靜置24小時，取上清液，濃縮、乾燥。
（5）取（2）、（3）和（4）中乾燥物混合、粉碎，過60目篩，加入乾膏粉量2％的微粉矽膠，灌裝於0號膠囊，每粒裝0.32克，即得到該發明所制膠囊b，每1克藥粉相當於生藥材約24.1克。
實施例三 該發明中藥膠囊C的製備
（1）按下列重量配比稱取各組分：百合700克，刺五加1200克，首烏藤700克，合歡花500克，珍珠母700克，石膏700克，酸棗仁500克，茯苓200克，遠志500克，玄參500克，地黃（生）500克，麥冬200克，五味子500克，燈心草200克，丹參500克。
（2）按上述配比稱取合歡花、酸棗仁、玄參、地黃、麥冬、燈心草、丹參，用水加熱回流提取三次，第一次加10倍量水3小時，第二、三次各加8倍量，各回流1.5小時，合併煎煮液，濾過，得濾液。濾液經過大孔吸附樹脂吸附，吸附速度為0.15毫升/分鐘·毫升（樹脂體積），吸附完全後，先用水洗脫樹脂，至洗出液無色，然後用50％的乙醇進行洗脫，洗脫速度為0.10毫升/分鐘·毫升（樹脂體積），收集洗脫液，回收乙醇至無醇味，備用。
（3）按上述重量配比稱取刺五加、遠志、五味子、百合、首烏藤，用70％的乙醇水溶液熱回流提取二次，第一次加8倍量70％乙醇水溶液回流3小時，第二次加6倍量70％乙醇水溶液回流2小時，合併二次提取液，放置過夜。抽取上清液，加入水，按常規方法進行水沉，取水沉後的上清液。
（4）按上述重量配比，稱取珍珠母、生石膏、茯苓，加水熱回流二次，第一次加10倍量2小時，第二次加8倍量1小時，合併煎液，靜置24小時後，取上清液。
（5）合併（2）、（3）、（4）提取液，濃縮、乾燥得乾膏。
（6）將乾膏粉碎過24目篩，加入乾膏量6％的澱粉，混合均勻，填充於1號膠囊中，每粒0.3克，即得到《一種治療失眠症的中藥複方製劑及其製備方法》所制膠囊C，每1克藥粉相當於生藥材約27克。
實施例四
該發明中藥複方顆粒劑的製備：按實施例一所述的方法，但所得藥粉按常規中藥顆粒劑的製備方法製成顆粒劑，每袋裝5克，約含藥粉1.2克，每1克藥粉相當於生藥材約20克。
實施例五
該發明中藥複方片劑的製備：按實施一所述的方法，但所得藥粉按常規中藥片劑的製備方法製成片劑，每片約含藥粉0.4克，每1克藥粉相當於生藥材20克。
實施例六
該發明中藥複方丸劑的製備按實施一所述的方法，但所得藥粉按常規中藥中藥丸劑的製備方法製成丸劑，每丸約含藥粉0.3克，每1克藥粉相當於生藥材20克。
動物實施例一 該發明膠囊劑a的動物急性毒性試驗
一、實驗方法
按急性毒性試驗方法預試一次灌胃劑量後，動物全部死亡的最小劑量和全部存活的最大劑量，擬在最小劑量和最大劑量間分為6個劑量組試驗，每組動物10隻，雌雄各半。給藥後觀察並記錄給藥七天內動物所出現的毒副反應、死亡動物數及屍檢，屍檢如有病變組織則做組織學鏡檢，結果按Bliss法微機程式計算LD50、95％置信限及斜率B。實驗過程中室溫控制在20～25℃。
二、結果
膠囊劑a混懸溶液以0.8毫升/20克體積灌胃給藥，動物全部死亡的最小劑量及全部存活的最大劑量分別為19.13克/千克，10.68克/千克，按等比級分為6個劑量組，劑量之間比為0.89，實驗結果見表1。試驗中觀察，死亡動物多數在第二天死亡，死亡前可見抽蓄豎毛、活動減少、呼吸減慢，直至死亡，死亡動物屍檢肉眼未見明顯病變。
表1：小鼠灌胃給藥半數致死量-LD50（Bliss）（加權線性回歸） | |||||
劑量（克/千克） | 對數劑量（X） | 動物數（只） | 死亡數（只） | 死亡率（%） | 機率單位（Y） |
10.68 | 1.0286 | 10 | 0 | 0 | 3.0000 |
12.00 | 1.0792 | 10 | 2 | 20 | 4.1584 |
13.48 | 1.1297 | 10 | 4 | 40 | 4.7466 |
15.15 | 1.1804 | 10 | 7 | 70 | 5.5244 |
17.02 | 1.2310 | 10 | 9 | 90 | 6.2815 |
19.136 | 1.2817 | 10 | 10 | 100 | 7.4000 |
E（Y）＝16.4234X-13.8045B＝16.4234；LD50＝13.96克/千克；95％的置信限：13.16-14.82克/千克。
動物實施例二 該發明膠囊劑a的動物長期毒性實驗
一、試驗方法
（一）分組和劑量
80隻大鼠按性別體重均勻隨機分為四組，每組20隻，雌雄各半，每5隻同性大鼠同籠飼養。
低劑量組：每組劑量0.4克乾粉/千克，相當於人用劑量（0.0338克/千克）約12倍。
中劑量組：每組劑量1.5克乾粉/千克，相當於人用劑量約44倍。
高劑量組：每組劑量3.0克乾粉/千克，相當於人用劑量約89倍。
對照組：與給藥組等容量的生理鹽水。
（二）給藥方法
灌胃給藥，每日一次，每周6天，連續給藥二個月。灌胃容量：1毫升/100克體重。
（三）檢測項目
1、體重及一般觀察：實驗前及實驗開始後半個月稱體重一次，並按體重調整給藥劑量，每天觀察並記錄動物的外以體徵，行為活動，糞便狀況。實驗末（給藥二個月後）最後一次給藥後24小時斷頭剖殺7/10隻大鼠作以下檢查。
2、血液學指標：紅細胞及網織紅細胞計數，血紅蛋白（Hb），白細胞總數及其分類，血小板、凝血時間。用Cou-Tter2F6型血型計數儀測定。
3、尿常規檢查：取每隻動物尿作尿常規檢查。
4、血液生化指標：天門冬氨酸基轉換酶（穀草酸AST）、丙氨酸氨基轉換酶（谷丙酶ALT）、鹼性磷酸酶（ALT）、尿素氮（BUN）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、血糖（GLU）、總膽紅素（T-BIL）、肌肝（Crea）、總膽固醇（T-CHO），用IL-508自動生化分析儀測定。
5、系統屍解和病理組織學檢查
（1）肉眼觀察各臟器病變
（2）臟器係數：心、腦、肺、肝、脾、腎、腎上腺、性腺、前列腺、甲狀腺稱重，求算各臟器的臟器係數（臟器係數＝臟器重量/體重）×100％）。
（3）組織學檢查：動物標本用10％福馬林液固定，每個動物分別取心、腦、肺、肺、脾、腎、胃、腸、胰、膀胱、前列腺、腎上腺、甲狀腺、胞腺、性腺（雄性睪丸、雌性子宮、卵巢）、視神經、骨髓、淋巴結等，分別隨機取一塊作石蠟切片，HE染色。顯微鏡觀察前，每組隨機抽取二例，用多頭鏡集體觀察病變，統一標準後再分組觀察記錄。第2、3、4、5項均為實驗末，斷頭取血，剖殺動物取主要臟器後進行。
6、恢復期觀察：實驗末最後一次給藥後，留下的3/10隻大鼠停藥觀察2周后，再活殺檢查。
實驗末，觀察停藥兩周后大鼠的血尿常規、肝、腎功能均在正常範圍內，臟器的組織學檢查，各組間無明顯病變和差異。
動物實施例三 該發明膠囊劑a的主要藥效學試驗
劑量設備及給藥方法
1、受試物：高劑量組：2克乾粉/千克相當於人用劑量（0.0338克乾粉/千克）59倍；中劑量組：1克乾粉/千克相當於人用劑量30倍；低劑量組：0.5克乾粉/千克相當於人用劑量15倍。
2、陽性對照物：安定組0.0005克/千克。
3、空白對照組：生理鹽水。
以上均為灌胃給藥，給藥量為0.5毫升/20克。
一、鎮靜作用
1、方法：選用雌性小鼠各組動物分別給藥60分鐘後，放入直徑17cm，高9cm的有機玻璃盒中，適應5分鐘後，記2分鐘內走動時間和舉雙前肢次數。
2、結果：實驗結果如下表1
表1：膠囊劑a對小鼠的鎮靜作用（X±SD，N＝10） | |||
組別 | 劑量（克/千克） | 走動時間（S） | 前肢上舉次數（次） |
生理鹽水 | 103.67±11.62 | 16.67±6.09 | |
膠素劑a | 0.5 | 83.50±14.87* | 17.80±5.05 |
1 | 82.83±15.18* | 14.43±5.54 | |
2 | 76.71±10.75** | 13.57±4.96 | |
安定 | 0.0005 | 21.56±9.69** | 2.03±1.61** |
註：和生理鹽水組相比*0.05＞P＞0.01；**P＜0.01
3、結論：灌服膠囊劑a後對小鼠正常活動稍有影響，表現小鼠在一定時間內走動時間同生理鹽水對照組小鼠相比稍有降低0.5克/千克和1克/千克劑量組統計上有顯著差異，2克/千克劑量組統計上有非常顯著差異。
二、催眠作用
1、延長戊巴比妥鈉的睡眠時間
（1）方法：各組健康小鼠分別給予受試後60分鐘，每鼠腹腔注射戊巴比妥鈉50毫克/千克，以翻正反射消失為睡眠指標，記錄睡眠時間。
（2）結果：實驗結果見表2
表2：膠囊劑a的催眠作用（X±SD，N＝10） | ||
組別 | 劑量（克/千克） | 睡眠時間（分鐘） |
生理鹽水 | 69.5±15.5 | |
膠奏劑a | 2 | 93.0±21.0* |
1 | 86.1±16.8* | |
0.5 | 78.8±16.4 | |
安定 | 0.0005 | 298.6±28.3** |
註：和對照組相比0.01＜P＜0.05；**P＜0.01
（3）結論：小鼠灌服膠囊劑a後能協同戊巴比妥鈉的中樞抑制作用，延長睡眠時間，其中2克/千克、1克/千克劑量組均能使小鼠睡眠時間延長，與對照組相比統計上有顯著差異，0.5克/千克劑量組與對照組相比統計上無顯著差異。上述各組的睡眠時間短於安定5毫克/千克劑量組。
2、戊巴比妥鈉閾下催眠劑量試驗
（1）方法：先灌服受試藥物，30分鐘後腹腔注射戊巴比妥鈉25毫克/千克，翻正反射消失達1分鐘以上者記為發生睡眠，計算各組睡眠發生百分率。
（2）結果：試驗結果見表3
組別 | 劑量（克/千克） | 動物數（只） | 入眠動物數（只） | 入睡百分率関 |
生理鹽 | 10 | 0 | 0 | |
水 | ||||
膠囊劑a | 2 | 10 | 10 | 100 |
1 | 10 | 10 | 100 | |
-0.5 | 10 | 9 | 90 | |
安定 | 0.0005 | 10 | 10 | 100 |
（3）結論：用戊巴比妥鈉閾劑量與膠囊劑a合用，觀察膠囊劑a與戊巴比妥的協同作用，如有協同作用，則可使用小鼠入睡個數增加。試驗表明小鼠灌服膠囊劑a後均能表現出與戊巴比妥鈉的協同作用，2克/千克和1克/千克劑量組小鼠的入睡百分率為100％，0.5克/千克劑量組入睡百分率為90％，相比之下對照組入睡的百分率為0％，因此反映出膠囊劑a具有協同催眠作用。
三、抗驚厥作用
1、方法：各組動物灌胃給藥60分鐘後，背部皮下注射硝酸士的寧1.5毫克/千克（濃度0.15m克/毫升，注射量0.2克毫升/20克），記錄注射結束至驚厥反應出現間的潛伏期。
2、結果：試驗結果如表4
組別 | 劑量（克/千克） | 驚厥潛伏期（分鐘） |
生理鹽水 | 4.96±0.84 | |
膠囊劑a | 2 | 8.98±1.59** |
1 | 6.33±1.09** | |
0.5 | 6.11±1.09 | |
安定 | 0.0005 | 不出現驚厥 |
註：和生理鹽水組相比，*0.05＞P＞0.01；**P＜0.01
3、結論：士的寧對脊髓有選擇性興奮作用，大劑量士的寧可引起動物強直性驚厥，小鼠的致驚劑量為1.5毫克/千克（皮下或腹腔注射）。小鼠灌服試驗劑量的膠囊劑a不能對抗士的寧引起的驚厥作用，2克/千克以下劑量組的驚厥發生率為100％，小鼠灌服安定5毫克/千克後能完全對抗1.5毫克/千克士的寧引起的驚厥作用。膠囊劑a能延長驚厥發生的潛伏期，2克/千克和1克/千克劑量組的驚厥潛伏期同對照組相比統計上有非常顯著差異，0.5克/千克劑量組統計上有顯著差異。人上可看出膠囊劑a有較弱的抗驚厥作用。
結語：上述試驗結果表明，膠囊劑a膠囊能明顯減少動物自發活動，延長士的寧引起的驚厥發生潛伏期。與戊巴比妥鈉協同作用，可顯著增加其閾下劑量的小鼠入睡個數，1克/千克以上劑量的膠囊劑a膠囊能協同戊巴比妥鈉作用延長小鼠睡眠時間。因此，該藥具有一定的鎮靜、催眠和弱抗驚厥作用。
套用例四 該發明膠囊劑a治療失眠的臨床方案
該研究對401例失眠病人進行了隨機雙盲雙模擬和擴大臨床試驗（開放組），其中甲組100例，乙組100例，開放組201，門診觀察405例，住院觀察196例，對病例來源及分布情況，性別年齡、病理分布情況、病例主要症狀分布情況，治療前PSQI計分程度分布情況，病例治療前舌、脈分布情況，經統計學處理，P值均大於0.05，組間無顯著性差異。
研究結果表明：
1、該次試驗結果表明，甲、乙兩組在治療陰虛火旺證之失眠的主症療效方面顯示了較好效果。其總顯效率、總有效率兩組分別為41％、88％和21％、70％，經統計學處理，甲、乙兩組在總顯效率、總有效率方面均有顯著性差異（P＜0.01），說明甲組藥療效優於乙組。而且，其差異主要反映在治療重度失眠患者，亦就是說治療重度失眠甲組優於乙組（P＜0.05）。
2、該次試驗結果還表明，甲、乙兩組藥物對中醫陰虛火旺證候的治療亦有較好的療效。各症狀治療前後自身比較，甲組均有極顯著性差異（P＜0.01），乙組除耳鳴、健忘改善不佳外，對余症均有極顯著性並異（P＜0.01），甲、乙兩組間比較，在改善睡眠時間、睡眠質量、失眠頻率、頭暈方面，兩組比較差異有顯著性意義（P＜0.05）。說明在中醫證候療效方面甲組優於乙組。
3、該次臨床試驗引用了匹茲堡睡眠質量指數（PSQI）以評價甲、乙兩組藥的對睡眠質量的影響情況，其結果表明，甲、乙兩組藥物均降低PSQI各成份分值，比較甲、乙兩組在入睡時間、睡眠時間、睡眠效率、日間功能方面，其差異顯著有顯著性意義（P＜0.05-P＜0.01）。說明，甲級藥物在這些方面的治療效果明顯優於乙組。
4、同時，小樣本睡眠腦電圖檢查結果表明，甲組藥物治療後患者睡眠狀態及睡眠質量較好。但由於樣本太小（甲組15例、乙組10例），經統計學處理，甲、乙兩組比較無顯著性差異（P＞0.05）。
5、在整個試驗中，各組安全性指標均無顯著性變化，表明所試驗藥物均比較安全。
膠囊劑a功能滋陰清熱、養心安神。功能主治陰虛火旺所致失眠症。其症見失眠或多夢易醒，頭暈耳鳴，口乾咽燥，手足心熱，心悸健忘，舌紅少苔，脈細數。
榮譽表彰
2007年，《一種治療失眠症的中藥複方製劑及其製備方法》獲得第五屆江蘇省專利項目獎優秀獎。
