pUC18

pUC18是適合於雙脫氧法DNA測序的載體，通常運用於重組dna的分子克隆中，首先我們製備大腸桿菌的感受態細胞（能接受外來重組的dna），這種感受態菌株必須不同外來DNA分子發生遺傳重組，通常是rec基因缺陷型的突變體，同時它們必須是限制系統缺陷或限制與修飾系統均缺陷的菌株，即具有這三種缺陷（rk mk rec ），同時對氨苄青黴素敏感（ap）。

puc18載體自身帶有抗氨苄青黴素基因，而外源片段不具有，這樣只有帶有puc18的轉化子的菌株才能在氨苄青黴素平板上存活，而外源片段自身環化的不能存活，這稱為抗性篩選。

pUC18質粒圖譜

pUC18 上帶有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的調控序列和β-半乳糖苷酶N 端146 個胺基酸的編碼序列，在這個編碼區中插有一個多克隆位點，且不影響正常功能，DH5α感受態菌株帶有β-半乳糖苷酶C 端部分序列的編碼信息，當puc18載體在正常情況下同感受態菌株融合後，互補表達有活性的β-半乳糖苷酶，稱為α-互補現象，當有外源片段插入多克隆位點後，不能產生互補，即細菌不能產生β-半乳糖苷酶活性。在呈色底物X-gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷酶）和誘導物IPTG（異丙基-β-D-硫代半乳糖苷）的存在下，互補產物菌落呈現藍色，不互補產物菌落呈白色，很容易鑑別，這種篩選方法稱為α-互補現象篩選(藍白斑篩選)。由上可見，puc18載體除了能重組導入外源片段外，在篩選表達過程中還具有重要的作用

用途:

克隆外源基因。

利用lac promoter進行基因表達。

使用M13 primers進行DNA測序。