《nm23-H1調控microRNAs逆轉肺癌轉移表型的分子機制研究》是依託天津醫科大學，由尤嘉琮擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：nm23-H1調控microRNAs逆轉肺癌轉移表型的分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：尤嘉琮
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
我們在前期研究中分析了不同轉移潛能肺癌細胞株的miRNA表達譜，發現了一組與肺癌轉移相關的miRNA。在此基礎上，本項目擬套用miRNA晶片和real-time PCR方法篩選和驗證受nm23-H1調控並與肺癌轉移相關的miRNA；構建miRNA啟動子報告基因載體，通過啟動子活性分析、CHIP和綜合突變分析方法研究nm23-H1調控miRNA表達的分子機制；套用Western blot方法研究miRNA對nm23-H1途徑相關基因表達的影響；構建miRNA表達載體和合成特異性抑制劑，套用Transwell、流式細胞術,螢光活體成像和動物模型等方法在體外和體內觀察miRNA對肺癌細胞侵襲轉移的影響。本研究將在轉錄後調控層面揭示並豐富nm23-H1逆轉肺癌轉移表型的分子機制，為闡明肺癌轉移的分子機理和開發干預肺癌轉移的抗腫瘤藥物提供理論依據和實驗依據，具有重要的理論意義和套用前景。
結題摘要
本課題對項目任務書中的研究內容進行了深入細緻的研究，達到了預期研究目標。套用miRNA表達譜晶片篩選到一組nm23-H1調控並參與肺癌侵襲轉移過程的miRNA，並進行了real-time PCR驗證。深入研究發現：nm23-H1過表達可上調mir-610、mir-132、mir-449a和mir-223的表達水平，mir-610、mir-132、mir-449a和mir-223在高轉移肺癌細胞中的表達水平顯著低於其在低轉移肺癌細胞中的表達水平，它們在轉移淋巴結組織的表達水平顯著低於原發腫瘤組織中的表達水平；mir-610可抑制肺癌細胞的增殖和侵襲能力，GJA3為miR-610的靶基因；mir-132可抑制肺癌細胞的侵襲能力，ZEB2為mir-132的靶基因，ZEB2在高轉移肺癌細胞中高表達，在轉移淋巴結組織中的表達水平顯著高於其在原發腫瘤組織中的表達水平，將ZEB2過表達可促進肺癌細胞的侵襲能力，同時干擾mir-132和ZEB2表達可削弱單獨干擾mir-132引起的細胞侵襲能力的增強作用，mir-132通過靶向調控ZEB2表達抑制肺癌細胞的侵襲；nm23-H1可激活miR-449a啟動子活性，miR-449a可抑制肺癌細胞的增殖，促進細胞凋亡，抑制細胞的侵襲能力，建立了miR-449a抑制肺癌轉移的動物模型，miR-449a可抑制腫瘤的形成和轉移， miR-449a的靶基因為MAP2K1，還調控p-MEK、p-ERK、p-c-fos、p-c-jun和MMP2的表達水平，在miR-449a啟動子上找到了3個可能的AP1結合位點，組蛋白甲基化和乙醯化修飾影響miR-449a的表達水平；mir-223在肺癌和食管癌細胞中均高表達，在肺癌和食管癌組織中的表達水平顯著低於其在正常組織中的表達水平，ARTN 為mir-223的靶基因，干擾ARTN表達可降低細胞侵襲能力，mir-223過表達可降低MMP2和MMP9的蛋白表達水平。通過課題研究，發表了2篇SCI論文，3篇核心期刊論文，培養了3名博士研究生和3名碩士研究生。
