miRNA在毛乳頭誘導毛囊再生中的作用及其機制

《miRNA在毛乳頭誘導毛囊再生中的作用及其機制》是依託汕頭大學，由林常敏擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：miRNA在毛乳頭誘導毛囊再生中的作用及其機制
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：林常敏
• 依託單位：汕頭大學

項目摘要

大量實驗證實體外培養的毛乳頭（DP）細胞能高效誘導毛囊再生，並且，最新研究提示：毛囊特異的miRNA通過調控Wnt信號通路影響毛囊再生。但是，目前仍然未能分離出DP細胞分泌的活性物質及其特異性的miRNA，阻礙了上述研究成果的臨床套用。本課題組的研究證實：①DP細胞分泌的40kDa以下的物質具有高效誘導作用。②濃縮、純化的DP細胞培養液可以誘導裸鼠毛囊再生。在此基礎上我們擬1.在低代數和高代數DP細胞培養液中檢測差異miRNA；2.利用免疫金標記法等追蹤已發現的毛囊特異性miRNA；3.體內、外毛囊誘導模型上觀察毛囊特異性miRNA對Wnt信號通路的作用。以證實DP細胞誘導毛囊再生的機制是：通過所分泌的特異性miRNA激活上皮細胞中的Wnt信號通路，從而改變上皮細胞的分化方向，誘導毛囊形成的假說。研究結果將豐富DP誘導毛囊再生的分子機制，並對開發促進毛囊再生的藥物提供重要的實驗依據。

結題摘要

毛乳頭細胞在毛囊發生和周期性再生中具有關鍵的作用，但是在培養過程中，毛乳頭細胞逐漸失去毛囊誘導力。因此，揭示低/高代數毛乳頭細胞毛囊誘導功能差異的分子機制，是研究毛乳頭細胞毛囊誘導功能關鍵點。本研究通過比較低代和高代毛乳頭細胞的毛囊誘導能力，篩查低代數和高代數毛乳頭細胞miRNA，LncRNA的差異表達，分析差異表達的miRNA，LncRNA在毛乳頭細胞中可能發揮的作用，分析miRNA，LncRNA與WNT通路的關係，篩選對WNT經典通路有影響的miRNA，LncRNA，研究hsa-miR-195-5p（miR-195-5p）與WNT信號通路的關係，尋找其靶基因，揭示其影響毛乳頭細胞毛囊誘導功能的作用機制，證實1.低代數毛乳頭細胞能夠誘導裸鼠背部長出毛髮，而高代數細胞不能誘導毛髮再生；2. microarray結果檢測到1924個miRNA, 1,4211個 LncRNAs和 2,0436個 mRNAs，建立的miRNA和WNT通路的網路圖中發現：①在低代毛乳頭細胞中高表達抑制WNT非經典通路的miRNAs，而在高代毛乳頭細胞中高表達抑制WNT經典通路的miRNAs；②miR-30a-5p，miR335-5p，miR-516a-5p， miR-195-5p有可能參與WNT/β-catenin的激活或抑制；4. 通過分析人毛乳頭細胞中差異的LncRNAs和WNT通路的聯繫，發現：其中有HOTAIR, H19，RP11-766N7.3有可能參與WNT經典通路的調控；5. β-catenin在細胞中的表達量與has-miR-195-5p mimics轉染濃度有關， LRP6在蛋白和mRNA水平表達同時下調；同時位於WNT通路下游且對毛囊誘導能力相關的標記基因（LEF-1，WNT5a, Noggin）的表達也下調；6.lncRNA H19 通過調控Wnt信號通路參與了毛乳頭誘導功能的變化過程。 我們證實了miR-195-5p抑制毛乳頭細胞WNT通路的活化從而調控毛乳頭細胞的毛囊誘導功能。其結果將為開發恢復失去誘導活性的毛乳頭細胞的藥物、促進毛囊再生、為臨床解決毛髮再生提供新的治療方法，具有臨床套用價值。