《miR-625*在肝癌中的意義及功能研究》是依託中山大學，由王輝雲擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：miR-625*在肝癌中的意義及功能研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：王輝雲
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
在預實驗中，我們採用含700個microRNA的自製晶片檢測了17例肝癌，發現miR-625*在肝癌中的表達明顯降低，並用定量PCR證實了晶片的結果；經檢索，未發現任何有關此microRNA功能和作用的報導，提示miR-625*可能是一個全新的候選抑癌基因。因此，本申請項目在此基礎上，採用microRNA晶片繼續檢測約120例肝癌，以確定miR-625*在肝癌的表達狀態，並鑑定出肝癌表達譜，結合臨床資料分析以闡明兩者在臨床中的作用和意義；通過轉染miR-625*前體進入肝癌細胞系，觀察其克隆形成、成瘤性和侵襲性及轉移能力等變化，同時採用基因表達晶片檢測miR-625*轉入後肝癌細胞mRNA表達譜的變化，經生物信息學分析找出其可能的靶基因和調節的信號通路，並對重要的靶基因予以驗證，以闡明miR-625*的作用機理。本項目是在我們研究中新發現的基礎上提出來的，具有可行性、新穎性和科學性。
結題摘要
MicroRNA表達的變化涉及到了人類的各種腫瘤而且在腫瘤臨床中顯示出了的潛在套用前景。在本課題中，將110例肝癌病人隨機分成訓練組（60例）和檢驗組（50例），另一組56例病人作為獨立組。採用自製晶片檢測了肝癌的miRNA表達，在訓練組首先建立了一個由30個miRNA組成的標籤，其區分肝癌和癌旁肝組織的準確性高達99.7％；在這30個miRNA中，10個表達下調、20個表達上調。這一標籤在檢驗組和獨立組的診斷準確率分別達到97％和90％。該標籤中，4個miRNA的表達用定量RT-PCR在訓練組中進行了驗證，結果與晶片數據一致。接著，在訓練組中又鑑定出一組由20個miRNA組成的標籤，用於評估病人的預後。在這20個miRNA中，6個為風險因子、14個為保護因子。同時，基於這20個miRNA的表達，建立了一個風險指數公式。生存分析表明，具有高風險的病人生存率明顯低於低風險的病人。這一標籤的作用在檢驗組和獨立組均得到了驗證。多因素Cox模型分析表明，20-miRNA標籤是肝癌的一個獨立預後因子。上述結果已投稿《Clin Cancer Res》並修回。在20-miRNA標籤中，miR-497的表達水平明顯降低。儘管已有報導顯示miR-497在某些腫瘤中表達降低，但其在肝癌中的狀態尚未見報導。因此，我們對miR-497在肝癌中的表達和作用進行了深入的探討。用定量RT-PCR方法，我們發現miR-497在131例肝癌中普遍表達下調，而且與肝癌病人的預後差有關。多因素Cox模型分析表明，miR-497是肝癌病人的一個獨立預後因子。在體外，上調miR-497表達能強烈地抑制肝癌細胞增殖、克隆形成，並阻滯細胞周期於G1期和提高凋亡；在體內，上調miR-497也能明顯地抑制肝癌移植瘤的生長。在機制方面，我們的結果證明miR-497是通過靶向抑制CCNE1基因而阻滯肝癌細胞周期和引起凋亡。在肝癌組織中，miR-497與CCNE1的表達呈現負相關，也間接證實CCNE1是miR-497的靶基因。總之，本課題證明了miR-497通過靶向抑制CCNE1和BCL2發揮腫瘤抑制作用，同時我們的結果也將為肝癌臨床提供新的潛在的預後標誌物和治療靶點。此一成果已投稿《Gastroenterology》，正在評閱中。
