《miR-301a對炎症性腸病Th1和Th17細胞增殖分化的免疫調節作用》是依託同濟大學，由劉占舉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：miR-301a對炎症性腸病Th1和Th17細胞增殖分化的免疫調節作用
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：劉占舉
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
炎症性腸病（IBD）的病因和發病機制可能與腸黏膜免疫調節異常、持續腸道感染、腸黏膜屏障缺損、遺傳和環境等因素有關。microRNA（miR）是一類非編碼的內源性小分子RNA，通過結合靶基因的3'-UTR端，調控相關靶基因的表達和功能。研究報導miR-301a表達在T細胞上，對NF-kB、IL-6-STAT3信號，以及Th17細胞效應有密切調節作用。我們前期研究發現IBD患者外周血與腸黏膜組織內miR-301a表達升高，並促使腸黏膜組織Th1和Th17細胞效應應答。據此提出miR-301a可能參與腸黏膜炎症發生過程。本課題著重研究miR-301a在IBD中的表達和對腸黏膜組織CD4+ T細胞免疫調節效應，尋找miR-301a的靶基因，闡明其在IBD發生過程的免疫調節作用。建立小鼠慢性結腸炎模型，靶向阻斷miR-301a效應應答，觀察腸黏膜炎症發展變化，為臨床上治療IBD尋求新的治療靶點。
結題摘要
炎症性腸病（IBD）包括克羅恩病（Crohn's disease, CD）和潰瘍性結腸炎（ulcerative colitis, UC），是發生在胃腸道的慢性非特異性炎症性疾病。IBD的發生原因不明，可能是腸黏膜免疫系統對腸道微生物抗原異常免疫應答引起。microRNA（miR）是一種非編碼RNA，靶向調節靶基因的功能。本課題重點研究在IBD腸黏膜炎症發生時，miR-301a對IBD患者腸黏膜組織內Th1和Th17細胞增殖分化的免疫調節作用。我們研究發現miR-301a在活動期CD和UC患者炎症腸黏膜組織內表達比緩解期患者腸黏膜組織和健康者腸黏膜組織表達明顯升高，其主要表達在CD4+ T細胞和腸上皮細胞上。體外培養外周血CD4+ T細胞，使用anti-CD3和anti-CD28 mAb刺激，使用不同細胞因子（TNF-a、IL-17A、IL-6、IL-23、IFN-g、IL-10、IL-12）輔助刺激，發現TNF-a可顯著上調miR-301a表達，IL-23和IL-6也有一定上調效應，而其他細胞因子對miR-301a的表達無作用。體外培養CD和UC患者外周血CD4+ T細胞，使用表達miR-301a的慢病毒轉染，發現可刺激IBD CD4+ T細胞表達高水平IL-17A、RORC和TNF-a mRNA，而使用表達anti-miR-301a的慢病毒轉染可顯著降低CD4+ T細胞表達這些分子。我們使用雙螢光素酶報告基因方法證實了SNIP1和BTG1為miR-310a的靶基因。使用TNBS灌腸誘導BALB/c小鼠發生實驗性結腸炎，使用antisence miR-310a灌腸治療，發現antisence miR-310a治療的小鼠結腸炎症明顯緩解。進一步構建了miR-301a基因敲除（miR-301a-/-）小鼠，使用2% DSS飲用水餵養小鼠誘導急性結腸炎發生，發現miR-301a-/-小鼠結腸黏膜炎症顯著降低，同時發現結腸炎發生癌變的程度也明顯降低。本研究闡明了miR-301a在腸黏膜炎症發生過程中起著重要的促炎症效應，通過靶向阻斷miR-301a有可能用於臨床上治療IBD的發生髮展。
