《miR-29c在乳腺癌Lapatinib耐藥中的作用及機制研究》是依託中山大學，由陳凱擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-29c在乳腺癌Lapatinib耐藥中的作用及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：陳凱
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
HER-2陽性乳腺癌的Lapatinib耐藥是一個重要的臨床問題。關於miRNA是否在其中發揮作用目前仍不清楚。本研究擬通過qRT-PCR技術分析Lapatinib耐藥細胞株與親本細胞株之間差異表達的miR-29c。通過調節miR-29c的表達水平觀察其在HER-2陽性乳腺癌細胞Lapatinib耐藥中的作用。通過建立荷瘤小鼠模型採用原位注射以及尾靜脈注射方法，以HER-2單鏈片段融合魚精蛋白為載體，在體內進一步驗證miR-29c的作用及其作為治療藥物的臨床價值。此外，我們還將分析miR-29c引起Lapatinib耐藥的靶基因蛋白和分子通路，以及引起miR-29c差異表達的分子機制。本項目將為克服HER2陽性乳腺癌Lapatinib耐藥提供新思路，並初步探索miR-29c的臨床套用價值。
結題摘要
miRNA是否參與HER-2陽性乳腺癌的Lapatinib耐藥是一個重要的科學問題。本研究建立了HER-2陽性乳腺癌細胞Lapatinib耐藥株rBT474/rSKBR3，並通過qRT-PCR技術等分析Lapatinib耐藥細胞株與親本細胞株之間差異表達的miRNA，篩選並獲得了關鍵的miRNA: mi-29c。本研究通過在細胞學層面，採用過表達和基因沉默等技術對mi-29c表達水平進行調節，發現其可以影響HER2陽性乳腺癌細胞的Lapatinib耐藥性。通過生物信息學預測我們猜miR-29c可調控ABCE1，採用雙螢光素酶實驗我們證實miR-29c可直接調控ABCE1的表達水平。通過CCK8檢測，平板克隆實驗以及流式細胞儀檢測我們發現ABCE1可以影響細胞的增殖和凋亡，進而調節Lapatinib的耐藥性。我們通過採用Rescue實驗設計進一步證實ABCE1的表達水平的改變可以逆轉miR-29c的作用，進一步證實了其在miR-29c下游並參與耐藥性調控這一過程。初步動物實驗證實Lapatinib作用下miR-29c和ABCE1的表達均可能參與了其耐藥性的發生。研究提出了一種HER2陽性乳腺癌Lapatinib耐藥的新機制，為克服HER2陽性乳腺癌Lapatinib耐藥提供新思路。
