《miR-148a-3p-DNMT1調控迴路在子癇前期發生中的作用及機制研究》是依託同濟大學，由周鑫垚擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-148a-3p-DNMT1調控迴路在子癇前期發生中的作用及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：周鑫垚
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
子癇前期（PE）對孕產婦、胎兒及新生兒造成巨大危害。已有報導，microRNA或DNA甲基化調控紊亂在PE發生中扮演重要角色，而二者是否及如何協同參與這一過程卻知之甚少。我們前期研究顯示PE胎盤表達上調的miR-148a-3p與其表達下調的DNA甲基轉移酶1（DNMT1）之間形成表達調控迴路，且其表達水平影響胎盤滋養層細胞功能。本課題擬回答：miR-148a-3p-DNMT1調控迴路如何參與胎盤形成過程導致PE發生。研究將以臨床胎盤組織和細胞系/原代培養細胞為基礎，首先闡明上述調控迴路的作用方式與功能；其次利用轉錄組、DNA甲基化測序等技術，篩選miR-148a-3p直接作用靶基因，或經調控DNMT1而間接作用的甲基化敏感靶基因，並分析相關靶基因的作用及在臨床樣本中的表達；最後通過滋養層幹細胞裸鼠侵襲模型，探討上述迴路異常對早期妊娠的影響。此研究結果有望為PE診療提供潛在新靶點和理論依據。
結題摘要
子癇前期（PE）對孕產婦及胎兒、新生兒造成巨大危害。miRNA、甲基化等表觀遺傳因子對胎盤形成至關重要，他們的異常與子癇前期的發生有關。在本研究中，我們運用Illumina HiSeq 2000對9例子癇前期胎盤樣本和9例對照組胎盤樣本進行了miRNA高通量測序，獲得子癇前期和對照組miRNA表達譜。我們共篩選到25個miRNAs在子癇前期與對照組胎盤中表達量有顯著差異（P值小於0.01，差異倍數大於1.5），其中17個表達上調，8個表達下調。隨後，運用qRT-PCR平台在22例子癇前期以及20例對照組胎盤獨立樣本中進行驗證，其中10個差異化表達的miRNAs被成功驗證。運用IPA進行生物信息學分析，我們發現，按照富集程度，排名靠前的生物功能亞類均與子癇前期相關。排名前5位的“分子與細胞功能”亞類為：細胞運動，細胞的發育，細胞生長於增殖，細胞死亡與存活以及細胞形態相關。我們發現miR-148a-3p，miR-193b-3p的表達量與相應孕婦的血壓成正相關。經靶基因預測與mRNA表達譜分析表明，miR-148a-3p可能調控DNMT1。我們研究發現在子癇前期胎盤中表達上調的miR-148a-3p與胎盤細胞的遷移、增殖密切相關，並且它與在子癇前期胎盤中表達下調的DNMT1之間形成了調控迴路。同時生物信息學分析表明，miR-193b-3p的靶基因在GO類別：細胞運動性與遷移，細胞增殖，氮化合物代謝過程正調控和血管生成，富集。過表達miR-193b-3p顯著抑制HTR-8/SVneo滋養層細胞的遷移和侵襲。而抑制miR-193b-3p可有效促進滋養層細胞的遷移和侵襲。並且，我們證明了TGF-β2是miR-193b-3p的靶基因。miR-193b-3p可通過作用靶基因TGF-β2調控滋養層細胞功能。此外，PE胎盤表達上調的miR-193b-3p-miR-31-5p，可協同作用表達下調的靶基因RIMS3，形成表達調控網路，且其表達水平影響胎盤滋養層細胞功能。綜上，我們發現表達紊亂的PE胎盤miRNAs表達譜可通過調控不同靶基因作用不同的通路，協同作用導致子癇前期的發生。
