《miR-148a調控HLA-G基因甲基化狀態在子癇前期發病機制中的作用》是依託復旦大學，由顧蔚蓉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：miR-148a調控HLA-G基因甲基化狀態在子癇前期發病機制中的作用
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
本項目在前期研究和預實驗基礎上，提出子癇前期可能的發病機制：胎盤滋養細胞miR-148a低表達，其靶向分子DNA甲基轉移酶（DNMT1）參與調控HLA-G DNA甲基化、靶向分子組蛋白甲基轉移酶（JARID2）/組蛋白去甲基轉移酶（JHDM1D）參與調控HLA-G組蛋白甲基化，其協同作用於HLA-G表達下降，影響滋養細胞生物學功能。研究內容：（1）採用病例對照研究，分析正常妊娠和子癇前期胎盤中miR-148a及其靶向分子表達、HLA-G的DNA甲基化、組蛋白甲基化特點。（2）採用體外細胞培養、轉染和RNAi技術，調控miR-148a及其靶向分子，探究miR-148a對HLA-G DNA甲基化、組蛋白甲基化的作用。（3）建立敲除miR-148a孕鼠模型，驗證miR-148a對HLA-G鼠科 類似物Qa2的DNA甲基化、組蛋白甲基化的作用及子癇前期發病情況。本項目為子癇前期的發病機制研究提供新的思路。
結題摘要
子癇前期是多基因疾病，是環境和遺傳互動作用的結果：胎盤滋養細胞功能尤其是侵襲功能受損，滋養細胞淺浸潤，血管重鑄不良是子癇前期發病的病理基礎。我們前期研究發現，相較於正常妊娠胎盤，人類白細胞抗原 G（HLA-G） 在子癇前期胎盤中表達明顯下降且直接影響滋養細胞的侵襲能力。miR-148a通過調控細胞生物學行為在多種疾病的發生及發展中起到重要作用，miR-148a不僅調控DNA甲基化，同時亦是一個重要的組蛋白甲基化修飾調控因子。我們推測miR-148a可能通過其靶基因調控DNA甲基化及組蛋白甲基化修飾調控HLA-G的表達，參與子癇前期的發生髮展。研究內容：（1）採用病例對照研究，分析正常妊娠和子癇前期胎盤中miR-148a及其靶向分子表達、HLA-G的DNA甲基化、組蛋白甲基化特點。（2）採用體外細胞培養、轉染和RNAi技術，調控miR-148a及其靶向分子，探究miR-148a對滋養細胞中DNA甲基化酶、組蛋白甲基化酶的表達，及其對滋養細胞生物學行為的影響。（3）構建miR-148a基因敲除小鼠，並通過與野生小鼠交配，比較基因敲除孕鼠與野生孕鼠子癇前期發病情況。結果：（1）相較於正常妊娠胎盤，miR-148a及其靶基因JARID2、JHDM1D在子癇前期胎盤中低表達；miR-148a靶基因DNMT1、KDM5A在子癇前期胎盤中高表達。子癇前期胎盤中HLA-G基因啟動子區DNA甲基化水平較高，組蛋白H3K9me2、H3K27me2表達升高，H3K4me2 、H3K4me3表達降低。（2）體外細胞實驗表明DNMT1、KDM5A抑制HLA-G表達，JARID2、JHDM1D促進HLA-G表達。（3）miR-148a、DNMT1、KDM5A抑制滋養細胞侵襲、促進細胞凋亡， JARID2、JHDM1D促進滋養細胞侵襲、抑制凋亡。（4）DNMT1促進HLA-G基因啟動子區甲基化增加、JHDM1D增加HLA-G啟動子區H3K9me2、H3K27me2抑制HLA-G。（5）相較於野生孕鼠，miR-148a基因敲除鼠子癇前期發生率無明顯差異。結論：miR-148a通過靶向調控DNMT1、KDM5A等影響HLA-G基因啟動子區DNA甲基化及組蛋白甲基化抑制HLA-G表達。本項目為子癇前期的發病機制研究、子癇前期的預防及治療提供新的思路和方向。
