miR-10a通過RYBP調控MDS克隆細胞凋亡抵抗的分子機制

《miR-10a通過RYBP調控MDS克隆細胞凋亡抵抗的分子機制》是依託上海交通大學，由許峰擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：miR-10a通過RYBP調控MDS克隆細胞凋亡抵抗的分子機制
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：許峰
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

近年來，miR-10a因其參與實體腫瘤及白血病的惡性增殖及遷移而引發關注，然而miR-10a在MDS發病機制中的作用罕見研究。申請人前期工作顯示MDS患者存在miR-10a異常高表達，miR-10a的下調增強腫瘤細胞對細胞毒藥物的凋亡敏感性以及誘導P53凋亡通路的激活，進一步的基因表達譜及定量PCR分析顯示miR-10a的靶基因RYBP在MDS患者中明顯下調。既往研究結合我們的前期研究提示RYBP可能是一個潛在的抑癌基因。因此，我們推測miR-10a可能通過抑制RYBP來調控MDS克隆細胞的凋亡抵抗。本研究在已有工作基礎上，採用慢病毒介導的干擾/過表達技術、PCR、ChIP、WB、FCM以及細胞功能學實驗，探討miR-10a通過RYBP調控MDS細胞凋亡抵抗的作用機制，探索RYBP與P53凋亡通路的關係。該項目有助於我們理解MDS克隆細胞凋亡抵抗的生物學機制，為拓展相應的靶向干預提供依據。

結題摘要

近年來，miR-10a因其參與實體腫瘤及白血病的惡性增殖及遷移而引發關注，然而miR-10a在骨髓增生異常綜合徵(MDS)發病機制中的作用罕見研究。申請人前期工作顯示MDS患者存在miR-10a異常高表達，miR-10a的下調增強腫瘤細胞對細胞毒藥物的凋亡敏感性以及誘導P53凋亡通路的激活，進一步的基因表達譜及定量PCR分析顯示miR-10a的靶基因RYBP在MDS患者中明顯下調。既往研究結合我們的前期研究提示RYBP可能是一個潛在的抑癌基因。本項目在國自然資助下，圍繞“miR-10a通過RYBP調控MDS克隆細胞凋亡抵抗”這一假說，按照任務書計畫已完成以下三個方面的內容：第一，研究了原癌miR-10a與RYBP靶向關係，預測軟體分析顯示RYBP是miR-10a的一個靶基因，MDS患者miR-10a表達與RYBP表達呈反相關，進一步的體外螢光報告基因檢測顯示miR-10a作用於RYBP基因的3’-UTR區域，這些研究證實了RYBP是miR-10a的靶基因；第二，研究了RYBP在MDS患者中的表達水平及其基因功能特徵，結果顯示RYBP在MDS患者中表達水平降低，其低表達預示著較高的白血病轉化風險。體外實驗顯示RYBP過表達抑制細胞增殖，誘導TP53介導的細胞凋亡。然而，RYBP敲低促進細胞增殖，誘導對化療藥物如依託泊甙和地西他濱的凋亡抵抗；第三，我們也研究了RYBP調控MDS克隆細胞凋亡抵抗的機制。體外實驗顯示RYBP敲低導致減少的H2AK119ub1和H3K27me3水平，H2AK119ub1和H3K27me3與基因轉錄沉默相關，隨後的體內體外基因表達譜聯合ChIP-qPCR分析顯示BCL2是RYBP的一個靶基因。RYBP通過移除BCL2基因啟動子區域的H2AK119ub1和H3K27me3，導致BCL2轉錄抑制解除而誘發持續性激活，BCL2是經典的抗凋亡蛋白，通過抑制TP53介導的細胞凋亡通路從而授予MDS克隆細胞對化療藥物的凋亡抵抗。這些結果提供了MDS凋亡研究的新視點，國內外未曾有所報導，該項目有助於我們理解MDS克隆細胞凋亡抵抗的生物學機制，為拓展相應的靶向干預提供依據。