《lncRNA-uc001ylu在缺氧誘導EMT促進胃癌轉移中的機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由劉理禮擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：lncRNA-uc001ylu在缺氧誘導EMT促進胃癌轉移中的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：劉理禮
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
我們前期的研究發現缺氧誘導上皮間質轉化是促進胃癌轉移的關鍵途徑，但其機制尚不清楚。LncRNA是一類長度大於200nt的非編碼RNA，通過多層面表觀遺傳調控編碼基因成為腫瘤轉移研究的熱點。我們在已結題國科金資助下通過高通量篩選和功能研究首次發現：缺氧通過上調lncRNA-uc001ylu誘導EMT的發生。進一步的生物信息學分析和初步的研究發現其與EMT-轉錄因子ZEB-1密切相關。本項目擬藉助RNA-CHIP，EMSA、甲基化、乙醯化阻斷等技術進一步探討缺氧條件下ZEB-1調控lncRNA-uc001ylu的機制，以及lncRNA-uc001ylu對靶基因的多層面調控機制及其對胃癌轉移的作用，完善lncRNA-EMT-靶基因在缺氧誘導胃癌轉移中的作用機制，為提出lncRNA通過多層面表觀遺傳調控機制誘導EMT發生的新機制奠定理論依據，更為發掘阻斷胃癌轉移的關鍵樞紐分子奠定理論基礎。
結題摘要
腫瘤特殊微環境在腫瘤轉移中發揮重要作用，我們前期證實缺氧是促進胃癌轉移的關鍵因素。我們首次用高通量lncRNA晶片進行了缺氧誘導的胃癌細胞以及高轉移胃癌組織、細胞中的lncRNA的差異篩選，發現lncRNA-uc001ylu在缺氧條件下和高轉移胃癌組織中顯著上調，進一步通過胃癌轉移組織進行驗證發現其與癌旁相比，在胃癌組織中高表達，並與預後顯著相關，通過克隆形成，transwwll功能學研究證實lncRNA-uc001ylu在缺氧誘導胃癌細胞轉移中發揮重要作用。為了探討其在缺氧條件下上調的機制，利用生物信息學分析發現其位於EMT-轉錄因子ZEB-1附近，利用siRNA干擾ZEB-1的表達觀察lncRNA-uc001ylu的影響，發現抑制ZEB-1的表達能夠下調lncRNA-uc001ylu的表達，初步證實缺氧是通過上調ZEB-1的表達從而上調lncRNA-uc001ylu的表達，為了進一步探討ZEB-1對lncRNA-uc001ylu的調控機制，通過啟動子分析實驗發現在lncRNA-uc001ylu啟動子上游存在ZEB-1的結合位點，進一步利用雙標免疫螢光實驗證實ZEB-1是通過與lncRNA-uc001ylu啟動子上的結合位點相互作用轉錄活化上調其表達的。進一步的功能研究發現lncRNA-uc001ylu通過調控下游基因TNPAIP2參與缺氧誘導胃癌細胞侵襲轉移的發生。本項目深入探討缺氧條件下ZEB-1調控lncRNA-uc001ylu及其對下游靶基因的的調控機制，揭示了lncRNA-uc001ylu—EMT在缺氧誘導胃癌轉移中的作用機制， 該研究填補了lncRNA在胃癌侵襲和轉移作用中的空白，並首次發現了lncRNA-uc001ylu能夠參與腫瘤微環境下的EMT的發生。為臨床阻斷胃癌轉移提供新思路。
