基本介紹
- 中文名：DNA探針技術
- 外文名：DNA probe technique
- 別稱：分子雜交技術
- 地位：基因工程重要技術之一
- 原理：同位素等標記的特定DNA片斷
原理,與基因工程的關係,DNA探針,
原理
DNA探針利用同位素、生物素等標記的特定DNA片斷，該片斷可大至寄生蟲基因組DNA，小至20個鹼基。當DNA探針與待測的非標記單鏈DNA（或RNA）按鹼基順序互補結合時，以氫健將2條單鏈連線而形成標記DNA-DNA（或標記DNA-RNA）的雙鏈雜交分子。將未配對結合的核苷酸溶解後用檢測系統（放射自顯影或酶檢測等）檢測雜交反應結果。由於DNA分子鹼基互補的精確性，單鏈DNA探針僅與樣品中變性處理的DNA單鏈出現配對雜交，由此決定了探針的特異性；用放射性同位素（如32P）或生物素標記探針，使雜交試驗同時具有高度的敏感性。
與基因工程的關係
現已獲得DNA探針數量很多，有細菌、病毒、原蟲、真菌、動物和人類細胞DNA探針。這類探針多為某一基因的全部或部分序列，或某一非編碼序列。這些DNA探針的獲得有賴於分子克隆技術的發展和套用。所以DNA探針屬於基因工程重要技術之一。比如基因工程套用於環境監測，可以用DNA探針檢測飲用水病毒的含量。具體方法：用一個特定的DNA片段製成探針，與被測的病毒DNA雜交，從而把病毒檢測出來。與傳統方法相比具有快速、靈敏的特點。傳統的檢測一次，需幾天或幾個星期的時間，精確度不高，而用DNA探針只需一天。據報導，能從1t水中檢測出 10個病毒來，精確度大大提高。
DNA探針
DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板，人工合成的帶有放射性或生物素標記的單鏈DNA片段，可用來快速檢測病原體。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或螢光染料等標記後製成的探針。可與固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進行互補結合，經放射自顯影或其他檢測手段就可以判定膜上是否有同源的核酸分子存在。
