《apoA1抑制HIF-1a/VEGF通路抵抗視網膜新生血管形成的分子機制研究》是依託中山大學，由胡安娣娜擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：apoA1抑制HIF-1a/VEGF通路抵抗視網膜新生血管形成的分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：胡安娣娜
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
增殖性糖尿病視網膜病變（PDR）-視網膜新生血管階段，可導致大量患者失明。我們前期證實：PDR患者血清載脂蛋白A1（apoA1）水平降低；apoA1在人視網膜各層均表達，提示apoA1可能在視網膜中起作用。預實驗中我們發現：apoA1促進視網膜緊密連線蛋白表達，並降低細胞VEGF濃度。已知apoA1模擬肽通過抑制HIF-1а及VEGF而抑制腫瘤新生血管；PI3K/Akt和MEK/ERK是影響HIF-1а的最重要信號通路。本項目擬構建apoA1敲除鼠、APOA1轉基因鼠和野生鼠的視網膜新生血管動物模型及高糖細胞模型，結合生物樣本檢測，首次從整體-細胞-組織(增殖膜)三層次驗證“apoA1通過抑制P13K/Akt和（或）MEK/ERK通路下調HIF-1a/VEGF，抵抗視網膜新生血管形成”這一假說，為人體注射安全及有效的apoA1複合物進入抵抗視網膜新生血管形成這一嶄新治療領域提供理論依據。
結題摘要
增殖性糖尿病視網膜病變（PDR）-視網膜新生血管階段，可導致大量患者失明。我們前期證實：PDR患者血清載脂蛋白A1（apoA1）水平降低；apoA1在人視網膜各層均表達；apoA1促進視網膜緊密連線蛋白表達，並降低細胞VEGF濃度。已知PI3K/Akt和MEK/ERK是影響HIF-1а的最重要信號通路。本研究中，我們成功構建apoA1敲除鼠、APOA1轉基因鼠和野生鼠的視網膜新生血管動物模型及高糖細胞模型，通過PI3K抑制劑或MEK1/2抑制劑處理，並結合apoA1模擬肽D-4F體內體外實驗多層次進行驗證“apoA1通過抑制P13K/Akt和（或）MEK/ERK通路下調HIF-1a/VEGF，抵抗視網膜新生血管形成”這一假說。 重要實驗結果總結：1.體內實驗：利用視網膜成像系統及視網膜鋪片等發現三種小鼠OIR模型中，主要動脈、靜脈迂曲擴張程度無明顯差異；無灌注區面積大小、血管扭曲程度比較結果為：apoA1-/-小鼠OIR模型＞正常小鼠OIR模型＞APOA1轉基因小鼠OIR模型；在OIR模型中，腹腔下注射PI3K抑制劑組，小鼠視網膜毛細血管網較腹腔下注射MEK1/2抑制劑組密集，無灌注區面積減少，提示此新生血管形成的過程中，PI3K通路可能起主導作用；腹腔注射30mg D-4F組視網膜主要血管迂曲程度比D-4F 10mg組減少，片狀出血灶比10mg組減少。2.體外實驗：利用腺相關病毒載體及RNAi技術沉默技術，成功構建apoA1在體外高糖培養下HRMECs高低表達，發現與未干預組相比，PI3K抑制劑組HRMECs增殖能力明顯降低，並隨濃度升高增殖能力進一步降低；在細胞高糖環境中，發現隨著D-4F濃度增加，akt及p-akt蛋白表達水平均增高。 綜上實驗結果我們得出結論:1.apoA1基因表達量的多少對視網膜主要動脈、靜脈無明顯差異；2.apoA1基因高表達抑制新生血管形成，保護視網膜屏障；apoA1基因敲除後可促進新生血管形成；3.在新生血管形成過程中，PI3K/Akt通路可能起主導作用；4.apoA1模擬肽D-4F 可能具有保護視網膜屏障的作用。本研究為人體注射安全及有效的apoA1複合物進入抵抗視網膜新生血管形成這一嶄新治療領域提供理論依據。
