《aPKC-ι/14-3-3信號通路調控膽管癌細胞極化運動的分子機制》是依託華中科技大學，由王劍明擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：aPKC-ι/14-3-3信號通路調控膽管癌細胞極化運動的分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：王劍明
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
癌細胞的極化運動是腫瘤侵襲轉移起始階段的核心環節。申請者首次研究發現，aPKC-ι作為一種調節細胞極化狀態的關鍵性蛋白，在膽管癌及其轉移灶中過度表達，同時運用質譜相關技術，篩選出了aPKC-ι的結合蛋白14-3-3。在此基礎上，本項目擬進一步明確aPKC-ι的過度表達和激活與膽管癌的轉移和預後的關係；採用膽管癌細胞體外侵襲轉移的極化運動實驗模型，探討aPKC-ι的過度表達或失活在調節膽管癌細胞極化狀態及侵襲轉移中的作用；確定14-3-3和aPKC-ι結合的分子機制及二者結合對膽管癌細胞侵襲轉移功能的影響；利用分子干預技術阻遏14-3-3和aPKC-ι的結合，從而為闡明膽管癌細胞侵襲轉移的調控機制提供新的理論基礎，並為膽管癌治療提供新的治療途徑。
結題摘要
上皮細胞-間質細胞轉化和極化重建是腫瘤侵襲轉移初始階段的核心環節，而aPKC-ι是此階段網路調節的核心靶點。申請者前期研究中用質譜相關技術篩選出aPKC-ι的特異性結合蛋白14-3-3；並在前一個國自然基金資助下研究aPKC-ι在膽管癌中過表達。在此基礎上，本項目進一步明確了aPKC-ι/14-3-3-ζ在膽管癌中高表達，並與膽管癌病理分期、病理分化、侵襲轉移及預後呈正相關，並且與E-cadherin起協調作用；成功構建了TGF-β誘導Ha-ras 轉化的上皮樣膽管癌細胞轉化成具有高度侵襲轉移特性的成纖維樣細胞的膽管癌細胞侵襲轉移的體外實驗模型；HDAC抑制劑TSA通過體外、體內試驗證明能誘導人膽管癌細胞(QBC939)凋亡，隨著TSA濃度的增加，14-3-3-ζ表達減少，而E-cadherin表達增加；套用小分子干擾技術構建aPKC-ι和14-3-3-ζ表達載體，knock-down14-3-3-ζ後抑制aPKC-ι和促進E-cadherin的表達，來抑制癌細胞EMT過程，進而抑制腫瘤的侵襲轉移。從而為闡明膽管癌細胞侵襲轉移的調控機制提供新的理論基礎，並為其治療提供新的治療途徑。我們發表論文①The aPKC-ι blocking agent ATM negatively regulates EMT and invasion of hepatocellular carcinoma. cell death & disease(IF: 6.044). 已接收，手稿準備出版中。 ②3D成像系統在肝門部膽管癌診斷及可切除性評估中的套用.臨床外科雜誌；2013年第21卷第11期，15-17頁。 ③ aPKC-ι在TGF-β1和Ras協同導致的肝癌上皮細胞-間質細胞轉化中的作用.中華肝膽外科雜誌，已修回，中國期刊網收錄。培養博士研究生2人，培養碩士研究生3人。
