《ZFX基因調控膽囊癌EMT的功能研究》是依託上海交通大學，由劉穎斌擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：ZFX基因調控膽囊癌EMT的功能研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：劉穎斌
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
膽囊癌是膽道系統最常見的惡性腫瘤，轉移是其最重要的死亡因素，針對該問題，本課題組在國內首次構建了膽囊癌肝臟轉移動物模型，將膽囊癌細胞GBC-SD經過體內轉移激活，分離出高轉移表型的細胞亞群GBC-SD/M3，在此基礎上，從組織樣本到細胞詳盡分析了與轉移相關的基因轉錄、蛋白表達差異，建立了膽囊癌特徵性的轉移分子譜。相關工作已獲得了兩項國家自然科學基金資助。從前期篩查膽囊癌轉移過程異常表達的基因，我們關注到ZFX（zinc finger-X）基因可能參與膽囊癌轉移調控的關鍵步驟。本項目擬對ZFX在膽囊癌轉移及細胞EMT過程中的功能進行深入研究，並通過ZFX影響的基因、蛋白表達譜和DNA結合序列，系統解析ZFX調控的下游靶基因和轉錄調控機理。通過闡明ZFX功能和分子機制，可進一步深入對膽囊癌轉移相關特徵性的分子調控網路的理解，為下一步相應治療策略的開發提供理論基礎。
結題摘要
膽囊癌是膽道系統最常見的惡性腫瘤，其侵襲能力強，易發生浸潤轉移，惡性程度高，預後極差。膽囊癌的侵襲轉移是一個十分複雜的級聯過程，其中有很多因素在不同的水平調控轉移的發生髮展。因此，研究膽囊癌的轉移機制並篩選相關分子靶點，對於進一步改善膽囊癌的診斷和治療水平具有重要意義。ZFX是krueppel C2H2-型鋅指蛋白家族成員，最近，不少研究指出，ZFX在惡性腫瘤的發生、發展過程中也發揮重要功能。本項課題通過免疫組化及臨床病理資料分析，發現ZFX在膽囊癌組織中高表達，且其表達量與患者的組織學分化程度、周圍神經浸潤及切緣情況有關。ZFX高表達提示患者預後不良。敲減ZFX基因後，膽囊癌GBC-SD細胞增殖、侵襲及轉移能力均受到抑制，且誘導腫瘤細胞發生G0/G1期阻滯，在NOZ細胞中過表達ZFX後得到了相反的結果。機制研究發現，敲減ZFX後能有效抑制PI3K/Akt信號轉導通路的激活，從而引起相關蛋白的改變。近年來研究表明，miRNAs參與多種腫瘤的侵襲轉移過程並且是治療的一個重要靶點。通過生物信息學分析，我們預測miR-101可能是調控ZFX的上游因子，miR-101在膽囊癌組織中表達量明顯低於癌旁對照，且在伴有淋巴結轉移的患者中，其表達量更低。miR-101表達量與患者的腫瘤大小、腫瘤浸潤深度、淋巴結轉移情況、病理分期有關，低表達提示患者預後不良，且miR-101是影響膽囊癌預後的獨立危險因素。體內及體外實驗表明，膽囊癌細胞轉染miR-101後其增值及轉移能力明顯減弱。且miR-101能抑制TGF-β誘導的EMT相關反應。雙螢光素梅報告基因實驗證，miR-101可直接作用於ZFX，影響Smad及MAPK/Erk信號轉到通路的激活，抑制膽囊癌細胞的侵襲轉移能力及EMT的發生。膽囊癌患者由於缺乏典型的症狀，往往發現時已是晚期。而且，膽囊癌術後易復發轉移，且目前膽囊癌對於常規的化療藥物不敏感，因此亟需探索膽囊癌化療的新手段。Baicalein（黃芩素）是一種廣泛套用的中藥，有著多種生理及藥理作用。本項研究旨在探索Baicalein抑制膽囊癌增殖及轉移的機制。研究顯示，Baicalein能夠下調ZFX基因從而影響凋亡相關蛋白及基質金屬蛋白酶表達，進而抑制膽囊癌細胞的增殖和侵襲轉移能力，為膽囊癌的藥物治療提供了新方向。綜上所述，ZFX可能成為判斷膽囊癌預後以及指導基因治療的新靶點。
