VP試驗由Voges和Proskauer兩位學者創建，故有此學名。它是微生物檢驗中常用的生化反應之一。其原理為：某些細菌能分解葡萄糖產生丙酮酸，並進一步將丙酮酸脫羧成為乙醯甲基甲醇，後蕾在鹼性環境巾被空氣中的氧氧化成為二乙醯，進而與培養基中的精氨酸等所含的胍基結合，形成紅色的化合物，即VP試驗陽性。
基本介紹
- 中文名：VP試驗
- 得名：Voges和Proskauer兩位學者創建
- 類型：微生物檢驗中常用的生化反應之一
- 試驗方法：O’Meara氏法、Barritt氏法、快速法
- 結果：呈紅色者為陽性
- 用途：與甲基紅試驗一起使用
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試劑
1.葡萄糖蛋白腖水培養基成分：多價蛋白腖7g、葡萄糖5g、磷酸氫二鉀5g、蒸餾水1000ml，pH 7.2。
2.製備：將上述成分混合溶解後，分裝於小試管，115℃高壓滅菌15 min。
3.試劑：甲液為6%a萘酚乙醇溶液；乙液為40%氫氧化鉀溶液。
試驗方法
1.O’Meara氏法：將試驗菌接種於通用培養基，於36±1°C培養48h，培養液1ml加O’Meara試劑（加有0.3%肌酸Creatine或肌酸酐Creatinine的40%氫氧化鈉水溶液）1ml，搖動試管1~2min，靜置於室溫或36±1°C恆溫箱，若4h內不呈現伊紅、即判定為陰性。亦有主張在48~50°C水浴放置2h後判定結果者。
2.Barritt氏法：將試驗菌接種於通用培養基，於36±1°C培養4天、培養液2.5ml先加入5°Cα萘酚（2-na-phthol）純酒精溶液0.6ml，再加40%氫氧化鉀水溶液0.2ml，搖動2~5min，陽性菌常立即呈現紅色，若無紅色出現，靜置於室溫或36±1°C恆溫箱，如2h內仍不顯現紅色、可判定為陰性。
3.快速法：將0.5%肌酸溶液2滴放於小試管中、挑取產酸反應的三糖鐵瓊脂斜面培養物一接種環，乳化接種於其中，加入5%α-萘酚3滴，40%氫氧化鈉水溶液2滴，振動後放置5min，判定結果。不產酸的培養物不能使用。
質量控制
大腸埃希菌ATCC 25922為無紅色出現，肺炎克雷伯菌ATCC 13883為紅色。
結果判斷
呈紅色者為陽性。
注意事項
1.許多實驗室工作人員有一個錯誤的印象，即VP試驗陽性菌甲基紅試驗自然是陰性，或反之亦然。實際上，腸桿菌科的大多數細菌產生相反的反應（由於乙醯甲基甲醇形成鹼性，導致甲基紅試驗陰性和VP試驗陽性）。某些細菌如蜂房哈夫尼菌和奇異變形桿菌35℃培養可產生甲基紅試驗和VP試驗同時陽性反應，後者常延遲出現。
2.a萘酚乙醇溶液易失效，試劑放室溫Ⅱ音處可保存1個月。氫氧化鉀溶液可長期保存。國內多採用貝氏法。
用途
本試驗常與甲基紅試驗一起使用，因為前者為陽性的細菌，後者通常為陰性，反之亦大腸埃希菌、沙門菌等甲基紅試驗呈陽性反應，而VP試驗則為陰性；相反，如沙雷菌、陰VP試驗陽性，而甲基紅試驗為陰性。
