《Trio調控小腦顆粒神經元軸突發育的機制研究》是依託南京大學，由彭亞靜擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Trio調控小腦顆粒神經元軸突發育的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：彭亞靜
- 依託單位：南京大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
Trio含有兩個GEF結構域，是調節Rac1、Cdc42、RhoA的一個重要的分子。我們曾發現：Trio控制小腦顆粒細胞的軸突發育（包括生長，分支和導向），是小腦發育的必需分子，但其調控的分子機制還不清楚。本課題的前期研究發現：當Trio缺失時，小腦顆粒細胞的軸突生長對多種神經信號分子(如Semaphorin6A,Slit2,Netrin1,bFGF)的應答消失。結合其他初步結果，我們提出：Trio-GEF可能是控制軸突生長的神經信號通路通用的信號分子，其機制可能與膜受體蛋白的調控有關。為此，本課題將利用多種基因敲除和轉基因的動物模型，神經示蹤，活細胞觀察等手段，首先從分子水平上闡明Trio是否通過雙GEF功能域從時空上精確的調節不同的Rho GTPases，協調調控神經軸突發育，進而重點研究Trio在2-3個重要的神經信號通路中的作用方式，並提出新的關於神經細胞軸突發育的分子機制。
結題摘要
我們之前通過遺傳學手段研究表明Trio是控制小腦正常發育的必須分子，其作用於小腦顆粒細胞的生長、分支和導向過程，但是其調控的分子機制並不清楚。為了闡明Trio鳥苷酸交換因子結構域介導的信號通路在小腦顆粒神經元發育中的機制，通過本課題的研究，我們分別建立了Trio兩個鳥苷酸交換因子結構域的條件性敲除小鼠模型，但是這兩個條件性敲除小鼠均表現為全長蛋白的缺失，TrioGEFD1敲除小鼠表型和之前的敲除小鼠表型一致，但是TrioGEFD2敲除小鼠表型卻輕微許多，並且體外培養的TrioGEFD2結構域缺失的小腦顆粒神經元發育正常，這可能由於Trio8的互補功能。另一方面，為了研究Trio及其激活的下游蛋白對微管動力學的調節作用，我們建立了Tubb3-mCherry的BAC轉基因小鼠。在該轉基因品系中，紅色螢光蛋白mCherry可以標記神經元中的微管蛋白，因而該轉基因小鼠是研究神經元軸突生長的有用工具。
