TRIM15在端粒調控和小鼠發育中的功能研究

《TRIM15在端粒調控和小鼠發育中的功能研究》是依託中山大學，由馬文賓擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：TRIM15在端粒調控和小鼠發育中的功能研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：馬文賓
• 依託單位：中山大學

中文摘要

染色體端粒的長度和端粒酶活性與人類的衰老、疾病和腫瘤發生密切相關，端粒體結合蛋白起著調控端粒和端粒酶的作用。在近期用BiFC篩選端粒體結合蛋白的研究工作中，我們發現了TRIM蛋白超家族的成員，TRIM15, 能與TPP1、POT1以及TIN2相互作用。我們推測TRIM15可能作為端粒體蛋白的E3泛素連線酶，影響端粒體蛋白的泛素化和穩定性，從而在端粒調控中起重要作用。申請人擬在本項目支持下，首先利用生化和分子生物學手段在細胞水平揭示TRIM15在端粒調控中的功能和機制，然後運用分子螢光互補技術篩選與TRIM15相互作用的蛋白質，並且製備TRIM15條件基因敲除小鼠模型進行體內功能研究。本研究不僅將推進TRIM15蛋白複合物在端粒調控以及小鼠發育中的作用及分子機制的了解，並且為研究TRIM15在細胞增殖、分化、凋亡、基因轉錄調控、機體的免疫和發育以及腫瘤發生中的作用提供重要的模式動物。

結題摘要

端粒長度和端粒酶活性的調控與人類的衰老、疾病和腫瘤發生密切相關，端粒體結合蛋白起著調控端粒和端粒酶的作用。在此前用基於BiFC的蛋白互作篩選端粒體結合蛋白的研究工作中，我們發現了TRIM 蛋白超家族的成員，TRIM15, 能與TPP1、POT1 以及TIN2 相互作用。我們推測TRIM15 可能作為端粒體蛋白的E3 泛素連線酶，影響端粒體蛋白的泛素化和穩定性，從而在端粒調控中起重要作用。我們首先利用生化和分子生物學手段在細胞水平揭示TRIM15 在端粒調控中的功能和機制，發現儘管TPP1和TRIM15有較強的相互作用，但是TRIM15不能泛素化TPP1。 ChIP實驗也表明TRIM15 的突變和表達變化不影響TPP1在端粒上的定位； TRAP實驗則證明TRIM15 的突變和表達變化不影響TPP1對端粒酶的招募，EMSA實驗也證明TRIM15 的突變和表達變化不影響TPP1-POT1複合物在端粒上的結合。 我們還製備TRIM15基因敲除小鼠模型進行體內功能研究，但是TRIM15的缺失在小鼠生長發育方面沒有明顯的表型。本研究加深了對TRIM15 蛋白複合物在端粒調控以及小鼠發育中的作用及分子機制的了解，並且為研究TRIM15在細胞增殖、分化、凋亡、基因轉錄調控、機體的免疫和發育以及腫瘤發生中的作用提供重要的模式動物。同時在本項目的支持下，我們還發現CIRP低溫下在調節TERT和TERC中的雙重角色，以及DAXX在端粒酶調節和端粒維護上的新功能。