《TLR4在抗磷脂綜合徵病理機制中的雙重作用研究》是依託江蘇大學，由周紅擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：TLR4在抗磷脂綜合徵病理機制中的雙重作用研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：周紅
- 依託單位：江蘇大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
TLR4與抗磷脂綜合徵（APS）的關係正受到愈來愈多的關注。然而TLR4在APS病理機制中的確切作用並未闡明。本課題組前期研究證明TLR4及其信號通路能夠介導β2GPI/抗β2GPI複合物刺激單核細胞表達TF，有助於APS血栓形成。基於文獻及前期工作，本項目提出TLR4在APS的自身免疫激活及其抗體誘發的血栓形成中發揮雙重作用假說。本研究擬利用純系TLR4正常及TLR4缺陷型小鼠，結合細胞生物學、分子免疫學、分子生物學以及分子影像學、活體成像等研究技術，深入分析TLR4在β2GPI刺激小鼠免疫系統激活及其抗體產生、以及在抗磷脂抗體誘發小鼠動靜脈血栓形成中的作用，並利用TLR4及TLR2拮抗劑進一步求證TLR4的作用，分析是否涉及TLR2。研究內容是APS病理機制探討的新進程，將為APS的免疫干預及血栓形成的防治提供新靶點依據。
結題摘要
TLR4與抗磷脂綜合徵（APS）的關係正受到愈來愈多的關注, 然而TLR4在APS病理機制中的確切作用並未闡明。本研究利用純系TLR4正常（C3H/HeN）及TLR4缺陷型小鼠（C3H/HeJ），採用β2GPI蛋白免疫接種二型小鼠，分析小鼠免疫系統激活及其抗體產生情況。結果顯示TLR4正常小鼠的樹突狀細胞（DC）成熟、T細胞活化、B細胞活化乃至自身抗體的產生顯著強於TLR4缺陷型小鼠。另一方面，採用抗β2GPI抗體刺激TLR4正常及TLR4缺陷型小鼠，利用分子生物學以及分子影像學、活體成像等研究技術，深入分析了TLR4在抗磷脂抗體誘發小鼠動靜脈血栓形成中的作用。結果表明抗β2GPI抗體能夠誘導TLR4正常小鼠EAPS模型形成，促進小鼠動脈及靜脈血栓形成，小鼠血管內皮表達TF、vWF、及黏附分子VCAM-1、ICAM-1和E-selectin增強，腹腔巨噬細胞表達炎性分子TNF-α、IL-1β和IL-6顯著上升。而TLR4缺陷小鼠的血栓形成明顯減弱，血管內皮及腹腔巨噬細胞表達活性分子的能力也大大降低。本研究還發現TLR4/ NF-κB信號通路有助於oxLDL/β2GPI/anti-β2GPI複合物誘導TLR4正常小鼠腹腔巨噬細胞泡沫化及表達動脈粥樣硬化相關分子，從而促進動脈粥樣硬化的進程。茶多酚（EGCG）及他汀類藥物、TLR4拮抗劑TAK-242、NF-κB抑制劑PDTC及c-Jun/AP-1抑制劑Curcumin能夠明顯降低抗β2GPI抗體對小鼠以上的刺激效應。TLR2拮抗劑anti-mTLR2-IgG能夠部分抑制抗β2GPI抗體對小鼠巨噬細胞的刺激效應，但弱於TAK-242的抑制效應。本研究結論：TLR4作為關鍵受體介導機體免疫系統識別並結合β2GPI蛋白，激活免疫細胞直至抗β2GPI抗體產生；TLR4及其信號通路有助於抗β2GPI抗體誘發體內動靜脈血栓形成。本研究結果提示, TLR4及其信號通路的關鍵分子可作為APS的免疫干預及血栓防治的新靶點。
