《Anti-β2GPI/β2GPI誘導單核細胞表達TF是否經過TLR4/MyD88信號轉導通路？》是依託江蘇大學，由周紅擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Anti-β2GPI/β2GPI誘導單核細胞表達TF是否經過TLR4/MyD88信號轉導通路？
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：周紅
- 依託單位：江蘇大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
大量研究表明anti-β2GPI/β2GPI複合物在抗磷脂綜合徵（APS）血栓形成中發揮重要作用，然而，迄今為止其作用機制仍未闡明，因而缺乏有效干預措施。本研究組多年來堅持這一領域的探索，證明了anti-β2GPI/β2GPI 通過非Fc受體途徑誘導血液單核細胞表達TF活性，引發高凝；細胞表面Annexin A2作為β2GPI受體在其中發揮關鍵作用。近期結果提示TLR4/MyD88途徑參與該過程。本項目將以單核細胞株THP-1為細胞模型，利用細胞及分子生物學研究技術，深入闡明anti-β2GPI/β2GPI複合物與Annexin A2及TLR4之間的作用關係；並利用相關特異抑制物、基因轉染及RNAi技術，多方面驗證TLR4/MyD88信號通路在anti-β2GPI/β2GPI複合物誘導單核細胞TF表達過程中的作用及其機制。研究內容將是APS血栓機制探討的新進程，將為治療提供新靶點依據。
結題摘要
本課題前項研究表明，自身抗磷脂抗體（anti-β2GPI）與其抗原複合物（anti-β2GPI/β2GPI）通過非Fc受體途徑刺激血液單核細胞表達TF活性，是引發抗磷脂綜合徵（APS）高凝的重要機制之一；細胞表面Annexin A2（ANX2）作為β2GPI受體在其中發揮關鍵作用。然而，ANX2並非貫穿細胞膜內外蛋白，不具備細胞內信號轉導功能。本項目在原有研究基礎上，重點探討了細胞表面TLR4是否作為“adaptor” 連線ANX2與胞內的信號轉導，以及TLR4/MyD88引發的信號通路在其中的作用。本研究採用親和層析、免疫共沉澱、免疫印跡等方法證明了細胞表面存在β2GPI-ANX2-TLR4的複合物，表明TLR4與ANX2作為抗β2GPI/β2GPI的共受體共同介導了胞外刺激信號。抗β2GPI/β2GPI複合物作用於單核細胞後, TLR4及其接頭分子MyD88、TRIF被誘導表達增加；其信號轉導途徑中的中間信號分子IRAKs、TRAFs、MAPKs均可被激活；最後，二種核轉錄因子-NFκB及AP-1在此過程中也被激活。分別阻斷這些分子的激活，均能抑制anti-β2GPI/β2GPI複合物對細胞表達活性因子（TF、TNFα等）的刺激效應，本研究結論：TLR4與ANX2作為共受體，介導抗β2GPI/β2GPI複合物刺激細胞，並引發細胞內一系列信號分子的激活，最終促進細胞表達TF等活性分子，導致APS高凝狀態的形成。研究結果提示,阻斷TLR4 及其介導的信號轉導通路有利於預防及治療APS的血栓形成。
