《TGF-beta/Smads通路中RBM4參與的轉錄和轉錄後水平的調控機制》是依託浙江大學，由肖睦擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：TGF-beta/Smads通路中RBM4參與的轉錄和轉錄後水平的調控機制
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：肖睦
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
在動物細胞的生長、分化過程中, TGF-beta信號轉導通路發揮至關重要的作用。其基本原理已經比較清晰，但是其下游基因的轉錄後調控機理還不是非常清楚。申請者通過構建表達文庫，系統研究RNA結合蛋白在此信號通路中的調控作用，發現了RBM4，一個參與基因轉錄後調控的RNA結合蛋白，在SBE螢光報告系統中，可以有效促進TGF-beta/Smad信號通路。體內體外實驗證明RBM4可以直接結合Smad2/Smad3；在角質細胞中可以調控此信號通路的下游大部分基因的表達；在乳腺上皮細胞中，可以促進TGF-beta誘導的上皮細胞間質轉型。因此申請者計畫以此類蛋白作為切入點，結合RNA深度測序技術，系統研究TGF-beta信號通路中轉錄後水平的調控機制，試圖尋找一些重要可變剪接異構體和非編碼RNA，並且鑑定其在癌症細胞轉移中的作用。
結題摘要
在動物細胞的生長、分化過程中, 轉化生長因子(TGF-beta) 信號轉導通路發揮至關重要的作用。其信號的傳遞主要通過SMAD蛋白直接參與的轉錄調控。TGF-beta信號通路的精密調控受到細胞內外多種因子的協同影響，其結果表現出不同細胞對TGF-beta的回響結果不同。在此項目中，我們結合RNA高通量測序和蛋白質譜分析的方法，發現並且鑑定了與SMAD蛋白結合的多個lncRNA-蛋白複合物（RNP），其中包括了RBM4-lncRNA2。在深入的研究中，我們揭示了一個複合物RBM4-lncRNA2結合SMAD3，促進了SMAD的轉錄活性，進而上調了TGF-信號通路。在RBM4敲除的細胞和lncRNA2功能缺失的細胞中，SMAD轉錄複合物變得非常不穩定，SMAD蛋白結合DNA的能力也被削弱，TGF-beta引起的細胞功能，比如細胞生長抑制，細胞遷移等能力都受到了明顯的抑制。TGF-beta信號的調控異常在多種疾病中被觀察到，比如癌症。我們發現在高轉移的乳腺癌細胞中存在RBM4和lncRNA2的高表達，並通過小鼠模型初步證實了RBM4和lncRNA2促進乳腺癌細胞的轉移。本研究初次揭示LncRNA-蛋白複合物直接參與調控TGF-beta/Smad信號傳遞，並且深入闡明LncRNA-蛋白複合如何精準調控TGF-beta參與的腫瘤轉移的分子機理，後續工作將對於腫瘤的治療提供重要的理論依據。
