《TERT線粒體轉移介導骨肉瘤幹細胞耐藥及其機制研究》是依託武漢大學，由余鈴擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：TERT線粒體轉移介導骨肉瘤幹細胞耐藥及其機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：余鈴
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
骨肉瘤的耐藥是臨床上亟待解決的難題，腫瘤幹細胞與之密切相關。前期研究表明端粒酶陽性骨肉瘤細胞具有幹細胞樣特性，且其對化療耐藥，但其具體機制不明。研究發現TERT也存在於線粒體中，在氧化應激時存在TERT向線粒體重定位現象。本研究推測TERT通過定位至線粒體並抑制線粒體凋亡途徑介導耐藥，為證實上述假設，首先利用免疫印跡、免疫螢光及免疫膠體金法檢測化療耐藥細胞中TERT的表達量及定位，觀察TERT在耐藥情況下是否向線粒體轉移。在此基礎上，構建TERT誘導型過表達及干擾慢病毒，感染並獲得穩轉細胞，通過上調或下調TERT探討其對骨肉瘤化療敏感性的影響，進一步檢測TERT變化對線粒體凋亡途徑的影響，探討其介導耐藥的機制。本項目旨在探討TERT線粒體轉移與骨肉瘤化療耐藥的關係，為骨肉瘤幹細胞靶向治療提供理論基礎。
結題摘要
骨肉瘤的耐藥是臨床上亟待解決的難題，腫瘤幹細胞與之密切相關。本項目首先利用免疫螢光及免疫印跡法檢測順鉑/阿黴素耐藥細胞中TERT的表達量及定位，證實骨肉瘤耐藥細胞中TERT表達量明顯升高，且骨肉瘤耐藥細胞中出現TERT線粒體轉移。其次，成功構建TERT過表達及干擾慢病毒，實現TERT上調或下調，結果表明TERT能夠抑制順鉑/阿黴素誘導的凋亡，且這種效應與端粒酶活性無關。機制方面，利用免疫印跡技術，表明TERT通過增加Bcl-2/Bax比例，作用於線粒體凋亡通路，減少順鉑/阿黴素介導的骨肉瘤細胞凋亡。通過流式細胞術，發現TERT通過減少細胞內活性氧（ROS）從而抑制順鉑/阿黴素誘導的骨肉瘤凋亡。利用小鼠移植瘤實驗，體內證實TERT能夠增強骨肉瘤細胞對順鉑的耐藥性，且聯合端粒酶抑制劑及Bcl2 抑制劑能夠協同抑制骨肉瘤。這些研究表明TERT 線粒體轉移參與骨肉瘤幹細胞化療耐藥，靶向骨肉瘤TERT線粒體轉移能夠增強其化療敏感性，為骨肉瘤幹細胞靶向治療提供理論基礎。
