油脂受到光、熱、空氣中氧的作用，發生酸敗反應，分解出醛、酸之類的化合物。丙二醛就是分解產物的一種，它能與TBA（硫代巴比妥酸）作用生成粉紅色化合物，在532nm波長處有吸收高峰，利用此性質即能測出丙二醛含量，從而推導出油脂酸敗的程度。
基本介紹
- 中文名：TBA檢驗法
- 外文名：TBA test method
- 拼音：TBAjianyanfa
- 待測食品：動物油脂
- TBA：硫代巴比妥酸
- 待測成分：丙二醛
原理,試劑,實驗步驟,注意事項,
原理
油脂受到光、熱、空氣中氧的作用，發生酸敗反應，分解出醛、酸之類的化合物。丙二醛就是分解產物的一種，它能與TBA（硫代巴比妥酸）作用生成粉紅色化合物，在532nm波長處有吸收高峰，利用此性質即能測出丙二醛含量，從而推導出油脂酸敗的程度。
試劑
氯仿（分析純）、三氯乙酸混合液（準確稱取分析純三氯乙酸7.5g及0.1gEDTA，用水溶解，稀釋至100ml）、0.02mol/L硫代巴比妥酸（TBA）溶液（準確稱取TBA0.288g溶於水中，並稀釋至100ml，如TBA不易溶解，可加熱至全溶澄清，然後稀釋至100ml），丙二醛標準溶液（稱取0.315g 1,3,3-四乙氧基丙烷，溶解後稀釋至1000ml，此溶液每ml相當於丙二醛100ug，置於冰櫃內保存。準備吸取10ml，稀釋至100ml，此溶液每ml相當於丙二醛10ug，備用）。
實驗步驟
（1）標準曲線的繪製
準確吸取每相當於丙二醛10ug的標準溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6置於10ml納氏比色管中，加水至總體積5ml，加入5mlTBA溶液，然後按樣品測定步驟進行，測得光密度繪製標準曲線。
（2）樣品測定
準確稱取融化均勻的油脂樣品3-10g，置於150ml有蓋三角瓶內，準確加入50.00ml三氯乙酸混合液，在70℃水浴上振搖半小時，趁熱用雙層濾紙過濾兩次，除去油脂。準確稱取上述濾液5.00ml置於10ml比色管內，加入5.00mlTBA溶液，混勻，加塞，置於90℃水浴內保溫40min，取出，室溫冷卻1h，搖勻，靜置2min，於532nm波長對照標準曲線得到微克數（同時作空白試驗）。
（3）丙二醛含量（mg/kg）=(C*50)/(m*50)
式中：C-從標準查得丙二醛的微克數，ug；m-樣品質量，g。丙二醛一般適用於動物油脂。
注意事項
（1）水浴震盪時要在水浴振盪器上進行，不要先在水浴鍋中保溫30min再用手震盪30min。
（2）要用雙層濾紙過濾兩遍，否則濾液中可以殘留部分油脂，影響檢測結果。
