《Scinderin基因調控前列腺癌細胞增殖的相關分子機制研究》是依託廈門大學，由王棟擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Scinderin基因調控前列腺癌細胞增殖的相關分子機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：王棟
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
雄激素非依賴性前列腺癌是一種不可治癒的疾病，迫切需要研究其發病機制，開發具有臨床套用價值的分子靶向藥物。我們前期研究中發現Scinderin基因在前列腺癌組織中高表達，與前列腺癌的復發及轉移密切相關，參與調控腫瘤細胞惡性增殖，但具體作用機制不明。因此，我們以前列腺癌細胞系PC-3為研究對象，首先，套用RNAi聯合慢病毒技術下調PC-3細胞中Scinderin基因的表達，並利用基因晶片技術、蛋白質組學技術及生物信息學技術初步探討沉默Scinderin基因抑制PC-3細胞增殖的分子機制，隨後，篩選、驗證出相關信號通路和下游分子；最後，上調或下調上述與PC-3細胞增殖相關的下游分子的表達水平，觀察其對PC-3細胞增殖的影響，從分子水平闡明這些分子在介導雄激素非依賴性前列腺癌細胞惡性增殖中的可能機制。為闡明雄激素非依賴性前列腺癌細胞增殖的分子機制、調控網路和尋找新的治療靶點提供理論依據和實踐基礎。
結題摘要
本項目研究發現SCIN在前列腺癌組織中顯著高表達且與前列腺癌患者的分化程度有關（p小於0.05）。在細胞模型和動物模型都驗證了，沉默SCIN導致前列腺癌細胞增殖抑制。通過表達譜晶片分析鑑定了前列腺癌細胞株中SCIN沉默介導的下游mRNA表達譜。總計篩選到5067個基因在SCIN基因沉默組和對照組之間有顯著差異（p小於0.05）。在眾多SCIN下游基因中，我們關注到了表皮生長因子（EGFR）分子。在動物模型中也驗證了SCIN基因沉導致EGFR蛋白下調。向SCIN基因沉默的細胞株中加入FGF因子，使得EGFR的磷酸化和內化作用被誘導，發現本來SCIN基因沉默導致的前列腺癌細胞增殖被抑制的效應，在加入EGF之後被削弱了。與此同時，SCIN沉默本來導致磷酸化MEK蛋白，磷酸化AKT蛋白、磷酸化ERK蛋白的表達水平顯著降低，但加入EGF刺激之後，3種磷酸化蛋白的表達水平被回復。此外，SCIN基因沉默能夠導致細胞凋亡有關的蛋白顯著上調，包括裂解的PARP、 caspase-3和caspase-9. 通過表達譜晶片篩選，我們同時關注到PYCR1和MYO6作為SCIN的下游調節基因，與SCIN的表達具有正相關性。在前列腺癌組織中，均檢測到了PYCR1蛋白和MYO6蛋白的高表達，且它們的表達均與患者的Gleason 評分顯著相關 (P小於0.05)。沉默MYO6基因或者PYCR1基因表達均能夠顯著抑制前列腺癌細胞增殖，並誘導凋亡。沉默MYO6基因表達可導致磷酸化ERK和磷酸化AKT蛋白的表達下調。沉默PYCR1基因表達可導致裂解的PARP蛋白和caspase-3 蛋白顯著上調。綜上，研究發現SCIN和PYCR1的表達與SCIN具有正相關性，也在前列腺癌中扮演著促進腫瘤增殖的作用。 總體上，本項目揭示了SCIN在前列腺癌惡性進展中的重要作用。SCIN的下游調節網路紛繁複雜，我們從EGFR這一重要的受體信號轉導的蛋白入手，發現了EGFR-ERK和EGFR-AKT 通路均參與調節了SCIN對前列腺癌細胞增殖和凋亡的影響。我們的研將為前列腺癌的基因治療提供潛在的分子靶標。
