《前列腺癌細胞中鐵輸出蛋白Ferroportin異常調控的分子機制研究》是依託天津醫科大學，由陳岳擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：前列腺癌細胞中鐵輸出蛋白Ferroportin異常調控的分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：陳岳
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
前列腺癌已成為威脅我國男性健康的主要疾病。研究證實Ferroportin在前列腺癌中低表達，但其對前列腺癌的生物學效應及機制尚不完全清楚。項目組研究發現，MZF-1可轉錄調節Ferroportin的表達且在前列腺癌中低表達，但其異常表達的腫瘤生物學意義仍需探討。前期工作顯示，AP4和c-Myb均可結合於MZF-1的啟動子上，而miR-492能夠抑制MZF-1的蛋白表達水平且在MZF-1的3’UTR區域存在其可能的結合位點。據此，本項目擬探討MZF-1和Ferroportin在前列腺癌發生髮展中的生物學意義，以及導致MZF-1異常表達的上游調控機制。另有研究表明，Ferroportin可與Hepcidin結合而被內化、降解。因此，闡明Ferroportin降解所激活的非鐵依賴的下游信號通路，是本課題的另一重要研究內容。本研究旨在深入揭示前列腺癌發生髮展機制，為尋求有效的診療手段提供科學依據。
結題摘要
已有研究證實Ferroportin在前列腺癌中低表達，MZF-1可轉錄調節Ferroportin的表達，但MZF-1-Ferroportin信號異常在前列腺癌中的生物學意義及調控機制仍不完全清楚。經過本項目的研究，我們發現，Ferroportin低表達PC3細胞的數量和活力明顯增加，細胞的克隆形成能力增強。體內實驗結果顯示，Ferroportin低表達PC3細胞體內生長速度更快，最終的腫瘤重量明顯大於對照組腫瘤組織，說明Ferroportin低表達明顯促進了前列腺癌細胞的體內、外增殖。我們研究還證實，MZF-1低表達後，PC3細胞數量增加，細胞活力增強；相反，MZF-1過表達後，PC3細胞數量減少，細胞活力減弱。我們還探討了MZF-1異常表達後與鐵密切相關的細胞行為的變化。結果顯示，MZF-1低表達增強了前列腺癌細胞的DNA複製能力，而當MZF-1水平上調後，細胞的DNA複製效率明顯降低。另外， MZF-1下調增加了細胞ATP的產生水平。為了探討前列腺癌中MZF-1低表達的調節機制，我們通過ChIP-PCR實驗證實AP4和c-Myb分別能夠與MZF-1啟動子區域的特定位點結合。進一步研究發現，AP4或c-Myb水平的下調明顯抑制了MZF-1的表達水平。當我們利用siRNA將AP4和c-Myb水平同時下調後， MZF-1的mRNA表達水平進一步下降了，說明AP4和c-Myb均能直接結合MZF-1啟動子區域，並轉錄激活MZF-1的表達。我們還發現，miR-492高表達明顯抑制MZF-1的蛋白表達水平，但其mRNA表達水平未見明顯改變。我們通過構建MZF-1的3’UTR螢光素酶報告基因質粒及螢光報告基因實驗證實了miR-492可通過直接結合MZF-1的3’UTR抑制MZF-1的表達水平。而且，miR-492在前列腺癌組織中是明顯高表達，miR-492高表達使PC3細胞數量和活力增強。在Ferroportin降解所激活的非鐵依賴的下游信號通路研究中，我們通過Hepcidin多肽處理PC3細胞後進行基因晶片分析，對其中差異表達的基因選出6個不受鐵水平影響的，並發現這些高表達基因在前列腺癌組織中高表達，進一步證實所篩選基因的高表達影響前列腺癌細胞的增殖和活力。本項目的研究揭示了Ferroportin介導的信號通路在前列腺癌中的作用和機制，為尋求前列腺癌的診療靶點提供了科學依據。
