SP6RNA聚合酶即SP6核糖核酸聚合酶,是一種由大腸桿菌中的噬菌體SP6產生的酶。它具有在體外合成RNA分子的能力。
基本介紹
- 中文名:SP6RNA聚合酶
- 別名:SP6核糖核酸聚合酶
SP6 RNA 聚合酶一般指本詞條
SP6RNA聚合酶即SP6核糖核酸聚合酶,是一種由大腸桿菌中的噬菌體SP6產生的酶。它具有在體外合成RNA分子的能力。
該系統主要基於一類新型載體pSP和pGEM,這類載體在多克隆位點兩側分別帶有SP6啟動子和T7啟動子,在SP6RNA聚合酶或T7RNA聚合酶作用下可以進行RNA轉錄,如果在多克隆位點接頭中插入了外源DNA片段,則可以此DNA兩條鏈中的一條為模板轉錄生成RNA。這種體外轉錄反應效率很高,在1h內可合成近10μg的RNA產生,只要在底物中...
限制酶內切好的質體DNA經phenol/chloroform萃取的後,即可用來進行胞外轉錄反應。由於RNA聚合酶一般由數個次單元組合而成,早先要在試管內套用RNA聚合酶的轉錄活性合成RNA並非易事,但這個問題在SP6, T3 及T7 等噬菌體的RNA聚合酶陸續被發現以後,情況已完全改觀。這主要是因為這類RNA聚合酶由一條多胜肽 (...
該系統主要基於一類新型載體pSP和pGEM,這類載體在多克隆位點兩側分別帶有SP6啟動子和T7啟動子,在SP6RNA聚合酶或T7RNA聚合酶作用下可以進行RNA轉錄,如果在多克隆位點接頭中插入了外源DNA片段,則可以此DNA兩條鏈中的一條為模板轉錄生成RNA。這種體外轉錄反應效率很高,在1h內可合成近10μg的RNA產生,只要在底物中...
該系統主要基於一類新型載體pSP和pGEM,這類載體在多克隆位點兩側分別帶有SP6啟動子和T7啟動子,在SP6RNA聚合酶或T7RNA聚合酶作用下可以進行RNA轉錄,如果在多克隆位點接頭中插入了外源DNA片段,則可以此DNA兩條鏈中的一條為模板轉錄生成RNA。這種體外轉錄反應效率很高,在1h內可合成近10μg的RNA產生,只要在底物中...
用途:製備不含DNA的RNA樣品;RT-PCR反應前RNA樣品中去除基因組DNA等可能的DNA污染;體外T7, T3, SP6等RNA聚合酶(RNA Polymerases)催化的RNA轉錄後去除DNA模板;DNaseI足跡實驗(DNaseIfootprinting)研究DNA-蛋白質相互作用;缺口平移(nick translatioin);產生DNA隨機片斷文庫;細胞凋亡TUNEL檢測中部分剪下基因組DNA作為陽性...
新型的BAC載體可以通過α互補的原理篩選含有插入片段的重組子,並設計了用於回收克隆DNA的Not工酶切位點和用於克隆DNA測序的Sp6啟動子、T7啟動子。Not Ⅰ識別序列,位點十分稀少。重組子通過Not Ⅰ消化後,可以得到完整的插入片段。Sp6、T7是來源於噬菌體的啟動子,用於插入片段末端測序。P1人工染色體載體(PAC)結合了...
RNA探針 許多載體如pBluescript, pGEM等均帶有來自噬菌體SP6或E.coli噬菌體T7或T3的啟動子,它們能特異性地被各自噬菌體編碼的依賴於DNA的RNA聚合酶所識別,合成特異性的RNA。在反應體系中若加入經標記的NTP,則可合成RNA探針。RNA探針一般都是單鏈,它具有單鏈DNA探針的優點,又具有許多DNA單鏈探針所沒有的優點,...
這些酶包括:DNA聚合酶,比如DNA聚合酶I,Klenow片段,T4酶,T7酶,Tub酶,Taq酶,Tth酶,Pfx酶,Pfu酶,Tsp酶,Tfl酶,Tli酶,GB-DDNA聚合酶;RNA聚合酶,比如大腸桿菌,SP6,T3以及T7RNA聚合酶;反轉錄酶,如AMV,M-MuLV,MMLV,核糖核酸酶H減去MMLV,HIV-1和RAV2逆轉錄酶。這些酶都可以在市場上找到。多重活性聚合酶,...
;聚合酶、反轉錄酶及連線酶類[M-MLV(野生型)、M-MLV (RNase H— )、Pfu DNA Polymerase、Pfu DNA Polymerase(超純型)、SP6核糖核酸聚合酶、T7 RNA 聚合酶、Taq DNA Polymerase、Taq DNA Polymerase(超純型)、Taq plus DNA Polymerase、Taq plus DNA Polymerase(超純型)、T4 DNA連線酶];核酸分子量...