《SOX7抑制肝癌發生的機制研究》是依託廈門大學，由王翀擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：SOX7抑制肝癌發生的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王翀
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
申請人已報導SOX7能抑制肝癌發生，但其機制仍不清楚。預實驗發現SOX7可以抑制β-catenin的mRNA表達和啟動子活性，β-catenin啟動子上有多個潛在SOX7結合位點；此外SOX7還可以結合β-catenin並抑制其與TCF結合。本項目擬採用5’末端序列續減分析、EMSA、CHIP、CoIP等技術，獲得SOX7結合β-catenin啟動子並抑制其轉錄表達和SOX7競爭性抑制β-catenin與TCF結合的證據，闡明SOX7通過負調控β-catenin抑制肝癌細胞生長及肝癌發生，分析肝癌組織中SOX7、β-catenin與肝癌發生的相關性，最終揭示“SOX7通過直接結合β-catenin啟動子抑制其轉錄表達以及競爭性抑制β-catenin與TCF結合這兩種機制，負調控β-catenin表達及活性，從而抑制肝癌發生”這一新機制，為確立SOX7為肝癌防治新靶點提供更充分的科學依據。
結題摘要
SOX7對肝癌發生具有重要的抑制作用，但其具體機制尚不清楚。本研究我們通過螢光定量PCR和雙螢光素酶報導基因檢測，發現SOX7可以抑制β-catenin的mRNA表達及啟動子活性，進而利用5'末端序列續減分析我們確立了β-catenin啟動子的核心區在轉錄起始點-196~-38之間，並且我們用生物信息學預測到核心區內的TTCAAGC位點為SOX7潛在結合位點，突變該位點後可以去除β-catenin啟動子活性以及SOX7對β-catenin啟動子活性的抑制作用，同時我們通過凝膠遷移實驗和染色質免疫共沉澱實驗在細胞外和細胞內證實了SOX7可以與該位點結合，從而證實了SOX7與β-catenin啟動子的TTCAAGC序列結合併抑制β-catenin的轉錄；另一方面，我們還發現SOX7能結合β-catenin，並干擾β-catenin/TCF複合物形成及抑制β-catenin的活性，而突變與β-catenin的結合位點的SOX7Δ不能與β-catenin結合，也不會干擾β-catenin/TCF複合物形成及抑制β-catenin的活性，說明SOX7可以通過結合β-catenin干擾β-catenin/TCF複合物形成並抑制β-catenin的活性；我們還闡明了β-catenin可以拮抗SOX7對肝癌細胞生長及皮下腫瘤形成的抑制作用，而沉默β-catenin可以拮抗SOX7沉默對肝癌細胞生長及皮下腫瘤形成的促進作用，說明SOX7通過β-catenin發揮抗腫瘤生長作用；在腫瘤組織樣本中，SOX7與β-catenin的蛋白表達呈負相關，SOX7表達與腫瘤大小、轉移、血清AFP水平相關，β-catenin表達與腫瘤大小、分化、轉移、血清AFP水平相關。綜合上述實驗結果，我們闡明了“SOX7通過直接結合β-catenin啟動子抑制其轉錄表達以及競爭性抑制β-catenin與TCF結合這兩種機制，負調控β-catenin表達及活性，從而抑制肝癌發生”這一新機制，為確立SOX7為肝癌防治新靶點提供更充分的科學依據。
