《SIX3和SIX6蛋白複合體成員在眼腦發育中的作用》是依託中山大學，由申煌煊擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：SIX3和SIX6蛋白複合體成員在眼腦發育中的作用
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：申煌煊
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
申請者通過對MAML1的研究，改變了發育的某些傳統觀念；前期研究初步表明MAML1還能直接調節SIX3和SIX6的表達（SIX3和SIX6是控制眼和大腦發育的主要因子之一）；另外還成功分離了CSL等蛋白複合體，發現了去甲基化酶LSD1是CSL新組分之一（未發表的結果）。.基於這些基礎，本課題擬用蛋白複合體沉澱和ChIP測序（ChIP-Seq）等方法，以SIX3和SIX6信號通路為主要研究對象，從蛋白與蛋白相互作用、蛋白與DNA結合這兩種調控方式入手，分離SIX3和SIX6信號通路的成員，了解MAML1調節前後這些成員的變化，分析它們轉導的信號通路，及其在眼和大腦正常發育中的功能；利用SIX3和SIX6已有的研究基礎(突變致眼與大腦發育異常)，尋找異常發育信號通路並揭示其發病機制，為可能的治療方案提供分子依據。
結題摘要
本課題從SIX家族蛋白的研究開始，研究發現：（1）在SIX家族蛋白中，SIX1的功能與SIX3/SIX6不一樣。表達SIX1能抑制C2C12細胞中的myogenis和myosin的表達，從而延緩細胞的分化，而不會影響MEF2的和Mef3表達及細胞的增殖；（2）SIX家譜受到甲基轉移的調控，CDA-II是DNA甲基轉移酶抑制劑。通過採用經典分化模型，發現CDA-II.抑制細胞的生長、遷移、分化，其機理是CDA-II下調了細胞分化相關基因的表達，其結果表明CDA-II能夠通過抑制細胞的分化和增值來影響機體發育；（3）斜視是眼科常見疾病，發育異常會導致斜視的發生，但具體機制並不明了。通過分析正常人條眼肌和共同性斜視患者術後的眼外肌，發現相對於β-actin，MYOD1的表達總是相對較高的而MYOG則普遍較低，其他4個因子RB1，P21，P57，IGF1則沒有較明顯差異。在共同性斜視患者眼外肌中，MYOD1和MYOG顯著下降，但還是遵循著正常人眼肌中MYOD1比MYOG表達要高的規律。RB1，IGF1，MCK和P21在大部分患者中是下降的，而P57是升高的。MYOD1的表達普遍較高而MYOG普遍較低，這可能是肌肉正常發育所必需的；而共同性斜視患者眼外肌中7個肌肉發育相關基因的表達水平都異於正常人，這表明肌肉發育的異常調節可能與斜視發生相關，這將幫助我們更進一步了解斜視的發病機制。（4）Notch信號通路是細胞分化生長的關鍵因子之一。分析了NOTCH信號通路的各個組分，發現其在RPE細胞中的表達水平各不相同。抑制Notch通路能阻礙RPE細胞的增殖和遷移對、對RPE細胞的凋亡未有明顯的變化，但對RPE細胞的周期影響較大，即抑制Notch通路後，S期及G2/M期的細胞明顯減少，而G0/G1期細胞明顯增多。NOTCH1的表達被抑制後影響Notch通路下游目的基因的表達。其中HES1, SOX9,.HEY2,.和MYC四個基因在Notch通路被抑制後有明顯的下調趨勢。本結果不僅豐富了人們對Notch信號通路在RPE細胞的功能的認識，還為RPE相關眼科疾病的研究和治療提供了相關的理論基礎。
