《SET在PCOS卵母細胞發育障礙中的功能研究》是依託揚州大學，由高玲玲擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：SET在PCOS卵母細胞發育障礙中的功能研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：高玲玲
- 依託單位：揚州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
SET是通過基因晶片技術在多囊卵巢綜合徵和正常婦女卵巢中篩選出來的代表性差異基因，前期實驗證實SET在PCOS卵巢中高表達且主要表達於卵母細胞。相關文獻發現SET參與凋亡調節，且在卵母細胞中SET超表達可致減數分裂異常，推測SET可能參與PCOS卵母細胞發育障礙的病理生理過程。本研究利用卵母細胞體外培養模型，觀察SET抗體阻斷、表達抑制及超表達時小鼠卵母細胞成熟及凋亡情況，並檢測成熟及凋亡相關因子mRNA、蛋白水平及酶活性的改變，闡明SET參與卵母細胞發育成熟的調節。觀察SET抗體阻斷及表達抑制時PCOS未成熟卵母細胞成熟及凋亡情況，驗證SET參與PCOS卵母細胞發育障礙。通過PP2A干涉腺病毒，以及PP2A抑制劑及激動劑, 研究SET通過抑制PP2A調節卵母細胞發育成熟的信號機制。該課題首次研究SET在卵母細胞發育成熟中的調控機制，以及參與PCOS卵母細胞發育障礙的病理機制。
結題摘要
多囊卵巢綜合徵是育齡期婦女常見的內分泌及代謝紊亂性疾病，以高雄激素血症，卵巢多囊性改變和稀發排卵或無排卵為主要臨床特徵。卵泡發育異常是PCOS主要的病理特徵，而PCOS患者卵巢中常存在卵母細胞發育障礙，提示PCOS患者卵泡發育異常與卵母細胞發育障礙有關。SET是通過基因晶片技術在多囊卵巢綜合徵和正常婦女卵巢中篩選出來的代表性差異基因，前期實驗證實SET在PCOS卵巢中高表達且主要表達於卵母細胞。相關文獻發現SET參與凋亡調節，且在卵母細胞中SET超表達可致減數分裂異常，推測PCOS患者中SET高表達可能導致卵母細胞發育障礙進而引起卵泡發育異常和排卵障礙，本研究探索了SET在PCOS卵母細胞發育障礙中的病理生理機制。 本研究利用卵母細胞體外培養模型，觀察SET表達抑制及超表達時小鼠卵母細胞成熟及凋亡情況，並檢測成熟及凋亡相關因子的改變，闡明SET參與卵母細胞發育成熟 的調節。通過PP2A干涉腺病毒，以及PP2A抑制劑, 研究SET通過抑制PP2A調節卵母細胞發育成熟的信號機制。 結果顯示SET在GV期、MI期、MII期小鼠卵母細胞均有表達。干涉SET蛋白後卵母細胞的GVBD率及MII率均下降，卵母細胞成熟相關因子BMP 15、GDF 9亦下降；相反超表達SET後卵母細胞的GVBD率及MII率均上升，BMP 15、GDF 9亦上升。干涉SET後卵母細胞的凋亡率上升，卵母細胞凋亡相關因子Caspase 3、Caspase 9亦上升，Caspase 8及Cyt c無明顯變化；相反超表達SET病毒後卵母細胞的凋亡率下降，卵母細胞凋亡相關因子Caspase 3、Caspase 9下降。我們進一步發現卵母細胞PP2A酶活性在超標達SET後被抑制並在干涉SET後增強。 PP2A的抑制劑岡田酸可致卵母細胞的GVBD率及MII率上升，干涉PP2A後卵母細胞的GVBD率及MII率亦上升。岡田酸處理後的卵母細胞可拮抗AdH1-SiRNA/SET介導的卵母細胞成熟抑制，進一步說明SET通過PP2A參與卵母細胞成熟調節。 綜上所述本研究揭示了SET參與小鼠卵母細胞的成熟及凋亡，並通過PP2A介導的特異性信號通路致小鼠卵母細胞成熟相關因子上升。結合我們先前的發現，SET在多囊卵巢綜合徵患者卵巢中高表達，推測SET參與多囊卵巢綜合徵的卵母細胞發育障礙。
