《Rhbdd3通過調控糖代謝介導膿毒症時DC功能障礙的研究》是依託上海交通大學，由李金寶擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Rhbdd3通過調控糖代謝介導膿毒症時DC功能障礙的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李金寶
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
DC功能障礙是膿毒症免疫抑制的重要原因之一，但其機制尚未闡明。Rhbdd3是新發現的TLR信號途徑負向調控分子。我們的預實驗發現，膿毒症患者外周血DC中Rhbdd3表達上調，且與病情嚴重程度和DC功能相關。進一步用Rhbdd3-/-小鼠研究發現，Rhbdd3-/-BMDC活化後的功能增強，提示Rhbdd3可調控DC功能。同時，Rhbdd3-/-BMDC活化後氧化磷酸化水平降低，糖酵解升高；抑制糖酵解可減弱Rhbdd3-/-BMDC的功能。我們推測：Rhbdd3通過調控糖代謝介導膿毒症時DC功能障礙。本項目將從臨床患者、離體細胞及基因敲除小鼠等層面，系統的探索膿毒症時Rhbdd3的表達及其對DC功能的調控作用；尤其是該調控作用是否通過糖代謝途徑介導；進一步探討Rhbdd3調控DC糖代謝的關鍵信號通路。研究結果將有助於解讀能量代謝調控網路在膿毒症免疫抑制發展中的意義，為膿毒症的防治提供新靶點。
結題摘要
能量代謝平衡是維持細胞正常生理功能的關鍵因素。膿毒症時機體能量代謝紊亂是導致免疫細胞發生功能障礙的主要原因之一。我們的研究發現：膿毒症患者外周血PBMC中Rhbdd3的表達水平顯著增加，且與患者的感染狀態以及最終預後密切相關。體外研究發現：Rhbdd3-/-BMDCs分泌促炎細胞因子水平顯著增加，且誘導效應性T細胞增殖及分泌IFN-γ的水平顯著增強。此外，我們研究發現：LPS刺激Rhbdd3-/-BMDCs顯著上調糖酵解關鍵酶(PKM2,HK2,PFK1,PFKFB3,PDK1)的表達，且誘導Rhbdd3-/-BMDCs ECAR的水平上調，伴隨著乳酸及糖消耗水平提高。同時，我們也發現，Rhbdd3也顯著抑制BMDCs氧化磷酸化水平，包括抑制OCR及線粒體膜電位的水平，抑制細胞上清中ATP水平。此外，體外/體內研究證實：給予2-DG或α-cyanocimnamate調節糖代謝水平，顯著影響BMDCs分泌促炎細胞因子的能力。深入研究發現，Rhbdd3可能是通過PI3K/Akt激酶信號和HIF-1α轉錄因子的活性，從而影響細胞糖代謝狀態進而影響BMDCs的功能。在體研究發現，Rhbdd3-/-小鼠CLP術後血漿中促炎細胞因子水平，機體細菌負荷，肺損傷程度以及術後生存率顯著改善。給予Rhbdd3依賴的關鍵PI3K/Akt通路抑制劑perifosine顯著改善CLP小鼠的預後。本研究從糖代謝這一新的角度探討了Rhbdd3調控DCs功能障礙的主要作用機制，為膿毒症免疫抑制的防治提供新的思路。
