RNAi篩選鑑定乳腺癌幹細胞中與Pin1具有協同致死效應的基因

《RNAi篩選鑑定乳腺癌幹細胞中與Pin1具有協同致死效應的基因》是依託中山大學，由羅曼莉擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：RNAi篩選鑑定乳腺癌幹細胞中與Pin1具有協同致死效應的基因
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：羅曼莉
• 依託單位：中山大學

中文摘要

我國的乳腺癌發病率呈明顯上升趨勢, 腫瘤復發和轉移是導致惡性腫瘤患者死亡的重要原因，而腫瘤幹細胞被認為是腫瘤耐藥、復發和轉移的根源。我們前期工作發現肽基脯氨醯順反異構酶Pin1對乳腺癌幹細胞自我更新和致瘤能力有重要的促進作用。本課題將在前期已開展的全基因組RNAi Screen鑑定Pin1協同致死基因和Pin1抑制劑篩選的基礎上，利用乳腺癌細胞模型、動物模型和乳腺癌組織標本，鑑定在乳腺癌幹細胞以及普通乳腺癌細胞中與Pin1具有協同致死作用的基因，闡明其協同作用的機理；研究Pin1候選抑制劑對乳腺癌幹細胞的抑制作用，以及Pin1抑制劑與協同致死基因抑制劑或敲降聯合根除乳腺癌幹細胞和普通乳腺癌細胞的效果。本研究不僅有助於加深對乳腺癌幹細胞的認識，揭示調控乳腺癌幹細胞生存的關鍵分子通路，還可為乳腺癌治療提供新思路，為設計針對乳腺癌幹細胞的治療方法提供理論依據。

結題摘要

腫瘤復發和轉移是導致惡性腫瘤患者死亡的重要原因，而腫瘤幹細胞被認為是腫瘤耐藥、復發和轉移的根源。我們前期工作發現肽基脯氨醯順反異構酶Pin1對乳腺癌幹細胞自我更新和致瘤能力有重要的促進作用。本課題在前期已開展的全基因組RNAi Screen鑑定Pin1協同致死基因和Pin1抑制劑篩選的基礎上，利用乳腺癌細胞模型、動物模型和乳腺癌組織標本，鑑定在乳腺癌幹細胞中與Pin1具有協同致死作用的基因，研究Pin1候選抑制劑對乳腺癌幹細胞的抑制作用，以及Pin1抑制劑與協同致死基因抑制劑聯用根除乳腺癌幹細胞和普通乳腺癌細胞的效果。內分泌耐藥與乳腺癌幹細胞密切相關，是乳腺癌治療的難點之一。通過本項目的實施，我們闡明了內分泌耐藥乳腺癌細胞中Pin1調控ERa的機制以及Pin1抑制劑ATRA對內分泌耐藥關鍵分子的抑制作用，並在細胞和小鼠模型使用ATRA逆轉了ER陽性乳腺癌內分泌耐藥。在本項目中，我們還研究了Pin1在DNA損傷修復中調控BRCA1的具體分子機制，鑑定了Pin1增加BRCA1蛋白的穩定性的作用位點以及BRCA1受Pin1調控在DNA損傷後發生泛素化的具體位點。發現敲降Pin1或使用ATRA抑制Pin1可促進BRCA1降解，誘導細胞出現類似於BRCA1突變或缺失導致的DNA雙鏈損傷同源重組修復障礙。確認了靶向Pin1增加BRCA1野生型腫瘤對PARP抑制劑敏感性的作用，提供了將Pin1抑制劑用於治療BRCA1野生型腫瘤的新策略。項目開展期間發表了標註本項目基金號的SCI論文5篇，其中影響因子10分以上2篇，5分以上4篇。本項目的完成揭示了Pin1調控ERa和BRCA1的分子機制，為乳腺癌治療提供新思路，為進一步將Pin1抑制劑用於治療內分泌耐藥或復發的ER陽性乳腺癌以及BRCA1野生型腫瘤的臨床試驗打下了堅實的基礎。