《RNA結合蛋白IGF2BP1/IGF2BP3調控CXCR5+淋巴細胞表型及功能的機制研究》是依託武漢大學，由段昭君擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：RNA結合蛋白IGF2BP1/IGF2BP3調控CXCR5+淋巴細胞表型及功能的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：段昭君
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
CXCR5是濾泡輔助性T細胞（Tfh）和濾泡調節性T細胞的表型特徵分子，其表達水平是影響Tfh和B細胞分化、成熟及功能的重要因素。Tfh和B細胞表面CXCR5水平的異常與病毒感染以及腫瘤等多種疾病的發生髮展密切相關。RNA結合蛋白（RBP）是影響基因表達水平的關鍵因素，目前尚無RBP調控CXCR5的報導。本研究首次發現IGF2BP1和IGF2BP3可與CXCR5的RNA結合，並基於此結合，在B淋巴瘤細胞系中、EBV感染介導的永生化細胞模型中、以及基因敲入的小鼠模型中，研究它們對CXCR5+ Tfh細胞和B細胞表型及功能的調控作用。通過篩選與IGF2BP1或IGF2BP3結合的蛋白，比較分析這兩個蛋白調控CXCR5表達的具體分子機制。本研究旨在加深認識CXCR5的調控機制以及IGF2BP1和IGF2BP3的重要功能，為探索與CXCR5+淋巴細胞異常相關疾病的治療策略提供理論依據。
結題摘要
CXCR5是濾泡輔助性T細胞（Tfh）、B細胞等與抗體產生相關淋巴細胞都具備的一個典型的表型特徵分子，其表達水平是影響這些細胞分化、成熟及功能的重要因素。已有的研究表明，這些CXCR5+淋巴細胞的異常與病毒感染以及腫瘤等多種疾病的發生髮展密切相關。RNA結合蛋白（RNA binding proteins, RBP）是參與基因轉錄後調控的重要分子，目前關於CXCR5+淋巴細胞調控的研究主要圍繞在轉錄水平，而轉錄後水平的研究較少。為了探索潛在調控CXCR5+淋巴細胞的RBP，本研究通過質譜，RNA pull-down，RNA immunoprecipitation等方法首次發現並驗證IGF2BP3可與CXCR5的RNA片段結合，並在B淋巴瘤細胞系raji中發現該RBP可以負調控CXCR5的表達。免疫組化結果表明隨著生髮中心（Germinal center, GC）反應的發生，igf2bp3在生髮中心的表達先降低後升高。而免疫螢光結果發現igf2bp3與B220以及生髮中心特徵基因AID存在共定位。藉助逆轉錄病毒體系和條件性igf2bp3基因敲除小鼠，我們構建了分別敲低/敲除CD4 T細胞和GC B細胞中igf2bp3的小鼠模型。分別採用綿羊紅細胞或NP-KLH免疫上述小鼠，我們發現，igf2bp3對Tfh細胞幾乎沒有影響，但是敲除GC B中的igf2bp3可以增加GC B細胞比例，減少明區（light zone）B細胞，增加深區（dark zone）B細胞，減少抗體生成等。進一步的機制研究發現，IGF2BP3可以與生髮中心B細胞的關鍵轉錄調控因子Bcl6及MYC結合，並能正調控Bcl6的表達，而抑制MYC基因的表達水平。本研究新發現了一個可以調控GC B形成以及抗體生成的RNA結合蛋白，並初步闡明了其機制，拓展了對該RNA結合蛋白的功能認知，也為研究與抗體生成相關的臨床病症提供了新的思路和參考依據。
