《RCAN1.4通過抑制CaN/NFAT信號通路阻遏肝癌轉移的分子機制》是依託上海交通大學，由覃文新擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：RCAN1.4通過抑制CaN/NFAT信號通路阻遏肝癌轉移的分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：覃文新
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
肝癌是典型的富血管腫瘤，極易發生肝內和肝外轉移。肝癌患者的預後差很大程度上是由於異常活躍的腫瘤血管生成和轉移所致。然而當前對於肝癌的血管生成和轉移機制仍知之甚少。RCAN1是CaN/NFAT信號通路的內源性抑制因子，據文獻報導RCAN1可抑制血管內皮細胞對VEGF血管生成信號的回響。我們前期的研究結果表明，其選擇剪接體RCAN1.4表達水平在肝癌組織顯著低於配對的癌旁組織，且與腫瘤血管密度存在顯著的負相關。在體外實驗中，我們還發現RCAN1.4可以抑制肝癌細胞的遷移和侵襲。本課題計畫採用HCC細胞、HCC荷瘤裸鼠和RCAN1.4肝特異性敲除鼠模型，並結合臨床樣本分析，探索RCAN1.4對肝癌腫瘤血管生成和轉移的調控機制。通過確定介導RCAN1.4抑癌效應的關鍵靶分子，闡明RCAN1.4調控CaN/NFAT信號通路抑制肝癌轉移的分子機理，期望為抗腫瘤血管生成治療肝癌轉移提供潛在靶點。
結題摘要
肝癌是典型的富血管腫瘤，極易發生肝內和肝外轉移。肝癌患者的預後差很大程度上是由於異常活躍的腫瘤血管生成和轉移所致。然而當前對於肝癌的血管生成和轉移機制仍知之甚少。根據流行病學統計數據顯示，唐氏綜合徵患者（又稱21三體綜合徵）得實體瘤的機率顯著低於正常人。這提示人類21號染色體上可能存在重要的抑癌基因。根據該線索我們通過Affymetrix HG-U133 Plus 2.0表達譜晶片系統分析了14對配對的肝癌組織中位於21號染色體上的差異表達基因，通過定量PCR檢測了對108對肝癌組織及配對癌旁組織檢測了RCAN1三種選擇剪接體的表達變化，同時我們還對肝癌組織晶片（n=196）做免疫組化檢測，並分析了RCAN1的表達量與肝癌患者預後的相關性。結果發現RCAN1的選擇剪接體RCAN1.4的mRNA水平和蛋白水平在肝癌中均顯著表達下調，而RCAN1的低表達與肝癌患者的預後不良顯著相關。在體外功能實驗中，發現過表達RCAN1.4可抑制肝癌細胞的增殖、運動和侵襲能力，而干擾RCAN1.4則促進肝癌細胞的增殖、運動和侵襲。在進一步的體內實驗中，我們發現過表達RCAN1.4可抑制異種移植瘤的血管新生、生長和轉移。進一步的分子機制研究發現，RCAN1.4通過Calcineurin/NFAT1信號通路調控IGF1和VEGFA的表達。而使用Calcineurin酶抑制劑也可以抑制肝癌細胞中NFAT1的核轉錄和腫瘤轉移。甲基化測序結果顯示RCAN1基因啟動子區CpG的高甲基化導致了其在肝癌中的表達下調。我們的項目確定了介導RCAN1.4抑癌效應的關鍵靶分子，闡明RCAN1.4調控CaN/NFAT信號通路抑制肝癌轉移的分子機理，期望為抗腫瘤血管生成治療肝癌轉移提供潛在靶點。
