《RARγ/Axin/β-catenin正反饋環路介導膽管癌抗藥性的機制研究》是依託廈門大學，由沈東炎擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：RARγ/Axin/β-catenin正反饋環路介導膽管癌抗藥性的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：沈東炎
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
膽管癌對現有化療藥物不敏感，且極易產生抗藥性。我們前期項目研究發現RARγ通過調控Wnt/β-catenin信號通路介導膽管癌產生抗藥性，然而其具體機制尚不清楚。本項目預實驗表明，RARγ可在胞漿與Axin直接相互作用；Wnt/β-catenin信號通路可上調靶基因單羧酸轉運蛋白1（MCT1）及RARγ表達，且MCT1與膽管癌抗藥性有關。因此，本項目擬先研究RARγ調控Wnt/β-catenin信號通路的具體機制，以及是否與Wnt/β-catenin信號通路形成正反饋環路進而調控MCT1表達升高；然後確定MCT1介導膽管癌抗藥性的作用；最後在整體水平以動物模型和臨床樣本驗證RARγ/β-catenin/MCT1信號鏈介導膽管癌抗藥性的作用。本項目將最終闡明RARγ/Axin/β-catenin正反饋環路介導膽管癌抗藥性的機制，以期為RARγ作為臨床膽管癌潛在的基因治療靶點提供科學實驗基礎。
結題摘要
膽管癌對現有化療藥物不敏感，且極易產生抗藥性。前期我們研究發現核受體家族的視黃酸受體γ（RARγ）調控膽管癌細胞增殖、遷移侵襲、耐藥產生等惡性表型。然而，RARγ調控膽管癌抗藥性的分子機制尚不清楚，且其異常高表達的機制也尚未闡明。 本研究發現RARγ通過在胞漿與Axin直接相互作用調控Wnt/β-catenin信號通路，從而上調靶基因單羧酸轉運蛋白1（MCT1）介導膽管癌產生抗藥性。為進一步全面分析RARγ調控膽管癌發生髮展的作用機制，本研究首先運用蛋白組學聯合生物信息學分析技術系統分析發現，RARγ敲低後介導膽管癌細胞諸多糖代謝相關酶類表達改變。進一步研究發現，RARγ敲低後顯著抑制了膽管癌細胞葡萄糖攝取量、乳酸分泌量和胞內ATP產量等糖代謝相關指標。此外，海馬儀檢測發現，敲低RARγ可顯著降低細胞外酸化率，耗氧率明顯升高。為進一步研究RARγ調控膽管癌細胞糖代謝重編程的機制，我們從蛋白組學差異蛋白中篩選確定出RARγ調控靶蛋白醛酮還原酶家族1成員AKR1C1。抑制AKR1C1活性可抑制膽管癌細胞有氧糖酵解以及膽管癌細胞增殖。免疫組化檢測發現AKR1C1在膽管癌組織中明顯高表達，其高表達與膽管癌的腫瘤大小和病理分級的分化差密切相關，且與RARγ的高表達呈正相關。AKR1C1可作為膽管癌不良預後的預測指標。本課題還從腫瘤炎症、營養缺乏及缺氧三大微環境角度，研究膽管癌細胞微環境對RARγ表達的影響。結果表明，炎症因子、無糖培養、缺氧微環境可誘導膽管癌細胞RARγ表達升高，與三大微環境密切相關的NF-κB、STAT3、AMPK、HIF1α信號通路異常激活調控膽管癌細胞RARγ異常高表達。 綜上所述，RARγ通過調控Wnt/β-catenin／MCT1信號軸介導膽管癌耐藥性的產生。同時RARγ可通過下游靶點AKR1C1調控膽管癌細胞有氧糖酵解，AKR1C1可能作為癌基因參與膽管癌的發生髮展。膽管癌RARγ異常高表達與炎症微環境、營養缺乏微環境和缺氧微環境三大腫瘤微環境密切相關。本研究闡明了RARγ調控膽管癌耐藥性及膽管癌糖代謝重編程的作用機制及其異常高表達的調控機制，為RARγ作為臨床膽管癌治療靶點提供科學實驗依據。
