Pharicin B穩定維甲酸受體的機制研究

《Pharicin B穩定維甲酸受體的機制研究》是依託上海交通大學，由閻驊擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：Pharicin B穩定維甲酸受體的機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：閻驊
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

維甲酸受體a（RARa）是重要的造血調控轉錄因子。在急性早幼粒白血病（APL），由於染色體易位，幾乎都存在與RARa融合的異常基因如PML-RARa的表達。ATRA主要通過影響RARa而引起RARa和PML-RARa的降解，但具體機制還不清楚。我們最近在Blood雜誌上報導小分子化合物Pharicin B 能夠穩定RARa和PML-RARa，抑制ATRA引起的RARa和PML-RARa的降解，促進APL細胞分化。進一步研究顯示，Pharicin B 的效應與ROS密切相關，Pharicin B 可能通過直接作用於氧化還原蛋白，改變細胞內ROS水平進而引起RARa穩定。本課題擬以 Pharicin B 作為探針，明確其作用靶蛋白及其與靶蛋白的相互作用方式，揭示RARa降解的分子機制，並在此基礎上設計合成和篩選新的具有RARa穩定效應的化合物，為進一步提高ATRA效應、擴大其套用範圍提供工具。

結題摘要

冬凌草甲素是從冬凌草中分離的二萜類化合物，已被證明在多種惡性疾病中發揮生物學效應。我們課題組曾報導：在急性早幼粒細胞白血病（APL）中，冬凌草甲素可以升高RAR蛋白水平，增強全反式維甲酸（ATRA）的分化效應，並能夠誘導活性氧（ROS）引發的細胞凋亡。在此基礎上，我們研究了冬凌草甲素穩定RAR蛋白的具體機制，探究了ROS和NF-B信號通路在RAR穩定性和細胞分化中的作用。這項工作主要取得了以下成果： （1）首先，冬凌草甲素在APL細胞系和原代白血病細胞中，從轉錄後水平，明顯地上調RAR的蛋白水平。並且冬凌草甲素所穩定的RARa蛋白可以增強ATRA的轉錄激活能力。 （2）冬凌草甲素通過升高細胞內的ROS水平，穩定RAR。抑制細胞內的ROS水平，可以阻斷冬凌草甲素的作用。另外，外源性的H2O2同樣可以穩定RARa蛋白。 （3）ROS激活的NF-B信號通路介導了冬凌草甲素穩定RAR的作用。通過使用通路抑制劑以及基因敲除技術，我們證實p65蛋白在冬凌草甲素穩定RAR的過程中至關重要。 （4）p65的核轉位可以穩定RAR蛋白。冬凌草甲素通過促進p65核定位上調RAR蛋白。另外，使用其他NF-B通路激活劑或抑制p65的出核，可以模擬冬凌草甲素穩定RAR蛋白的效應。 （5）在APL細胞中，冬凌草甲素和ATRA的協同誘導分化作用，依賴活性氧p65信號通路的介導。清除活性氧或敲除p65，會抑制p65的核定位，從而阻遏冬凌草甲素/ATRA在NB4細胞中的協同誘導分化作用。