《PcG蛋白EZH2在MDS表觀遺傳學發病機制中的作用及靶向干預研究》是依託上海交通大學，由李曉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：PcG蛋白EZH2在MDS表觀遺傳學發病機制中的作用及靶向干預研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李曉
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
DNA甲基化是抑癌基因表觀遺傳失活的一個重要途徑，且已被證實參與了MDS病理過程。而組蛋白H3K27甲基化也被證實能夠誘導抑癌基因失活，但是其在MDS中的作用尚無研究。申請人前期工作顯示PcG蛋白EZH2(組蛋白H3K27甲基化轉移酶)在MDS患者中高表達且與患者預後不良相關，且也與多個抑癌基因表達下調存在關聯。我們推測EZH2作為一個潛在的癌基因，通過調控組蛋白H3K27甲基化來誘導抑癌基因沉默。本研究在已有工作基礎上，採用慢病毒載體介導的RNA干擾技術、過表達技術、免疫印跡、ChIP、Pyrosequencing 甲基化定量分析等技術，驗證EZH2在MDS中的癌基因特性，探討EZH2是否通過甲基化H3K27誘導的抑癌基因沉默來調控 MDS克隆細胞惡性生物學特徵，探討影響EZH2表達和功能的生物學和藥物學干預的靶向價值。該項目將為拓展新的表觀遺傳靶向治療或聯合治療提供科學依據。
結題摘要
PcG蛋白EZH2介導的H3K27甲基化是正常細胞發育分化所必需的的，其異常是血液腫瘤發生關鍵原因。然而，EZH2在骨髓增生異常綜合徵發病(MDS)機制中的作用尚未明確。在本項目中，我們研究了EZH2在MDS患者中的表達水平及其致病機制。結果顯示MDS患者呈現差異化的EZH2表達模式，低危患者尤其是伴有trisomy8的低危患者呈現相對高的EZH2表達，高危患者尤其是伴有單體異常的患者呈現明顯低的EZH2表達水平。EZH2低表達預示著較差的生存以及較高的白血病轉化。MDS患者7q36位點(EZH2)基因組拷貝數缺失 是導致EZH2低表達的關鍵原因。在體外試驗中，EZH2敲低抑制MDS來源細胞株SKM-1細胞凋亡，促進細胞增殖和集落形成，明顯增加SKM-1細胞的體外成瘤能力，同時導致縮減的H3K27me3水平。進一步H3K27me3的ChIP-on-ChIP試驗結合患者EZH2表達揭示EZH2低表達導致廣泛降低的H3K27me3水平，EZH2低表達導致HOX家族基因啟動子區域H3K27me3水平降低。基因表達譜結合定量PCR顯示EZH2低表達導致患者呈現增高的HOX(HOXA、HOXB、HOXC和HOXD)家族基因表達增加。最後的藥物干預試驗提示H3K27組蛋白甲基化抑制劑誘導MDS相關細胞系凋亡，但能誘導不同程度的HOX家族基因表達激活，可能與表觀遺傳修飾藥物治療後的藥物耐藥有關。這些研究探討了EZH2在MDS中的功能特性，探討EZH2介導的H3K27me3在癌基因激活的中的關鍵作用，豐富了MDS表觀遺傳發病機制，最後也探討影響EZH2表達和功能的干預靶向價值。
