《PKA 激活劑對天然溶瘤病毒M1 的增效機制與臨床意義》是依託中山大學，由胡駿擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：PKA 激活劑對天然溶瘤病毒M1 的增效機制與臨床意義
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：胡駿
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
天然溶瘤病毒M1能在瘤內大量複製，破壞癌細胞，而無害於正常細胞。但部分癌細胞對M1敏感性不足，當務之急是篩選增效劑以增強其敏感性。細胞及裸鼠實驗發現，PKA激活劑可安全高效地發揮增效劑作用，但機制不明。研究發現，PKA激活劑既能通過破壞干擾素合成而促進M1複製，又能通過加劇內質網應激性凋亡而促進M1溶瘤。已知GADD34促進干擾素合成，且可抑制內質網應激性凋亡。研究表明PKA可抑制GADD34。因此，提出假說“PKA激活劑通過抑制GADD34而破壞干擾素合成並加劇內質網應激性凋亡，最終促進M1複製與溶瘤”。我們擬採用過表達、RNAi等手段確認干擾素與內質網應激在此增效機制中的意義；並結合報告基因和突變體拯救等實驗確定GADD34如何對這兩方面進行調控；最終通過動物實驗結合臨床相關性分析，確證GADD34在PKA激活劑增效機制中的關鍵作用，為M1臨床套用奠定基礎，為溶瘤增效劑研究提供新思路。
結題摘要
溶瘤病毒療法是一種新興的使用可複製的溶瘤病毒用於抗癌的治療方法。雖然不同類型的癌細胞對溶瘤病毒敏感，但溶瘤病毒治療的主要挑戰之一是不同類型的癌細胞對溶瘤病毒的敏感程度不同。溶瘤病毒治療的潛在機制尚不完全清楚。在這裡，我們報導了在體外、體內和體外培養的病人標本中，激活環磷酸腺苷（cAMP）信號顯著地使低敏感的癌細胞對甲病毒M1敏感。我們發現，cAMP信號通路的激活抑制了M1誘導的低敏感的癌細胞表達抗病毒因子，進而導致內質網應激延長和加重，並最終導致細胞凋亡。我們還證明，這種可被cAMP信號所增強的M1病毒的溶瘤作用，涉及了“cAMP 1直接激活的交換蛋白（Epac1）”，而不是經典的cAMP依賴性蛋白激酶A。在此，我們報導了一種經典的蛋白激酶AD的抑制劑H89可通過激活Epac1（cAMP 1直接激活的交換蛋白）與溶瘤病毒M1在多種癌細胞中協同作用。H89顯著增加病毒在低敏感的癌細胞的複製，導致不可緩解的內質網應激和細胞凋亡。微陣列分析表明，H89通過抑制NF-kB的核移位而減弱低敏感的癌細胞發生抗病毒應激反應。重要的是，體內研究表明M1/H89聯合治療具有顯著的抗腫瘤作用。綜上所述，我們的研究發現cAMP/Epac1信號通路的激活抑制了抗病毒因子，促進了低敏感的癌細胞對M1介導的病毒治療的反應性。
