《PIEZO輔助的動物轉染色體研究》是依託中山大學，由何祖勇擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：PIEZO輔助的動物轉染色體研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：何祖勇
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
農業動物的重要經濟性狀通常是由一個或多個QTL控制的，這些QTL通常在染色體上覆蓋長達20cM以上可能包含數百個基因的區域。由於載體容量的限制，利用傳統的轉基因技術難以獲得能表現QTL控制性狀的轉基因動物模型，用於複雜性狀的遺傳分子機制解析。而動物轉染色體技術可有效克服轉基因載體容量限制以及位置效應等問題，因此本項目擬在申請人博士期間利用牛胎兒成纖維細胞進行微細胞介導的轉染色體研究，以及利用小鼠卵母細胞進行PIEZO輔助的顯微注射外源染色體的研究工作基礎上，通過雙參數流式分選豬的6號染色體（該染色體上含有多個控制肌內脂肪沉積的QTL），利用PIEZO輔助的顯微注射法將該染色體轉入小鼠成熟卵母細胞中，經體外受精可發育成攜有豬6號染色體的轉染色體小鼠，為解析豬的肌內脂肪沉積分子機制提供良好的動物模型，為最終培育兼具高瘦肉率和優良肉質的豬新品種打下基礎。
結題摘要
本研究原計畫製作轉有豬6號染色體的轉染色體小鼠模型，但因課題實施過程中因拉針儀到位較遲、流式細胞分選操作人員不熟悉染色體分選操作和染色體堵塞顯微注射針等諸多現實困難，只能將原計畫調整為製作協同表達纖維素酶和木聚糖酶的轉基因小鼠模型。計畫調整後，較為順利地完成了轉基因小鼠研究平台的建立，成功獲得了一批GFP轉基因鼠，同時對來源於微生物的纖維素酶和木聚糖酶進行密碼子最佳化表達，通過在蛋白的二級結構之間的loop區引入稀有密碼子，顯著增強了轉基因的表達水平，為一下步構建高效表達纖維素酶和木聚糖酶的轉基因小鼠模型打下堅實的研究基礎。此外，我們還套用計算機輔助方法設計人工鋅指酶，為今後製作基因敲除動物打下研究基礎。
