PCR-RDB法

PCR是聚合酶鏈式擴增,RDB是反向點雜交,是將探針固頂在玻璃晶片或尼龍膜上,用於檢測擴增產物中是否含有目標基因的技術。此技術較為成熟,在國內套用較多,如HPV分型診斷試劑、地中海貧血診斷試劑等。
PCR-RDB法是將特異的探針分別固定到硝酸纖維素膜或尼龍膜上,再將經PCR特異性擴增的產物(在PCR引物5’端預先進行生物素標記,使擴增產物相應標記有生物素)與之雜交,這樣待檢樣本就會與具有同源序列的探針結合,經洗滌去除未結合的DNA樣本,由於待測的DNA樣本具有生物素類的標記物,結合了待測DNA的探針點上就帶有生物素類的標記物,再經相應的顯色反應就能顯出雜交信號。這種以膜上固定探針取代固定靶DNA的方式,一次雜交反應可以檢測多種靶序列,具有快速簡便、敏感度高和特異性強的特點。

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