基本介紹
- 中文名：pc12
- 來源：腎上腺嗜鉻細胞瘤
- 形態：多角型細胞
- 生長特性：貼壁較松，容易成團
簡介,相關信息,
簡介
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相關信息
傳代：吸去培養液。 加入新的培養液，用吸管吹下細胞或用手拍打培養瓶或刮下細胞到培養液中，用移液器把細胞吹散。 加適量的細胞到新的培養器皿中。（以1：4為宜，傳代期間2-3天更換培養液）
凍存：95%培養液+5%DMSO凍存於液氮。
PC細胞培養和向神經元誘導分化
pc12細胞是從大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤克隆的細胞株，主要分泌產物為兒茶酚胺類遞質包括多巴胺、去甲腎上腺素等。膜上有NGF受體，受生理水平NGF誘導後，它們停止分裂，長出神經突起，分化為具有交感神經元特性的細胞，常被用於分析神經元分化和NGF作用分子機制的研究，也被用於研究生長因子調節神經細胞基因表達改變的機制。
（一）材料和方法
1，pc12細胞的復甦和培養
從液氮罐中取出盛有pc12細胞的塑膠螺口小瓶，立即投入37℃溫水中，並不時搖動令其儘快融化，然後從37℃水浴中取出塑膠螺口小瓶，用酒精消毒後用吸管吸出細胞懸浮液，注入離心管並加入10倍培養液，混合後離心（一千轉每分鐘，五分鐘）除去上清液，再重複用培養液洗一次。然後用培養液稀釋成1x十的四次方個每毫升密度的細胞懸液，接種於75平方厘米塑膠培養瓶中，每皿十毫升，置於37度含百分之十二氧化碳的培養箱內進行培養。培養液由百分之九十的DMEM、百分之五胎牛血清、百分之五馬血清、0.01%谷氨醯胺組成。
2，pc12細胞的擴增
3，體外誘導pc12細胞向交感神經元樣細胞分化
取傳五代以上pc12細胞，經消化分散後，製成5x十的五次方每毫升密度的細胞懸液，接種於塗有小牛皮膠的35mm塑膠培養皿中，每皿2ml，置於36度，10%co2的培養箱內進行培養。培養液由90%DMEM，5%馬血清、NGF20ng每毫升和谷氨醯胺0.10g/L組成。每周換液兩次，每次更換一半新鮮培養液。
（二）結果
1，pc12細胞 的生長發育和形態學特徵
pc12細胞種植後8小時，生長良好的pc12細胞開始分裂增殖並凝聚成團生長，pc12細胞呈圓形，胞體周圍有暈光。培養5~10天后，分裂增殖的pc12細胞已形成密集的細胞簇，布滿整個培養瓶。
