《OX40/PKC/NF-κB途徑在多發性肌炎發病中的作用及機制研究》是依託蘇州大學，由方琪擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：OX40/PKC/NF-κB途徑在多發性肌炎發病中的作用及機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：方琪
- 依託單位：蘇州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
多發性肌炎（polymyositis,PM）是一種以CD8+T細胞介導的嚴重自身免疫病，病程可遷延至數年。目前已經明確協同刺激分子在PM發病中起重要作用，但關鍵分子及機制尚不清楚。國外研究發現OX40通過PKC介導的NF-κB激活在T細胞增殖及維持存活中起重要作用；我們前期研究發現在PM患者中有OX40+CD8+T細胞增多，肌細胞上OX40L強陽性表達；因此推測PM中OX40/PKC/NF-κB途徑對CD8+T細胞的增殖、存活及對肌細胞毒性作用起重要調節作用。本項目通過對T細胞功能測定、PM患者肌組織協同刺激信號轉導相關分子的檢測、PM小鼠模型的各項功能研究以及抗體阻斷干預實驗，從細胞、組織、動物水平來研究PM中OX40/PKC/NF-κB途徑對CD8+T細胞維持肌細胞毒性的調節作用及其機制，為將來PM的新診斷標記及新治療策略打下理論基礎。
結題摘要
多發性肌炎（polymyositis, PM）是一種以CD8+T細胞介導的嚴重自身免疫病，病程可遷延至數年。目前已經明確協同刺激分子在PM發病中起重要作用，但關鍵分子及機制尚不清楚。國外研究發現OX40通過PKC介導的NF-κB激活在T 細胞增殖及維持存活中起重要作用；我們前期研究發現在PM患者中有OX40+CD8+T 細胞增多，肌細胞上OX40L強陽性表達；因此推測PM中OX40/PKC/NF-κB途徑對CD8+T 細胞的增殖、存活及對肌細胞毒性作用起重要調節作用。 本項目首先通過對PM組及健康對照肌組織免疫組化實驗及血液樣本流式細胞術分析，證實多發性肌炎患者肌組織及外周血中T細胞上存在OX40/TRAF2/PKC/NF-κB軸重要分子表達、相關協同刺激分子CD4、CD8、CD19、CD20、CD68表達以及外周血相關細胞因子IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-、INF-等的表達情況，證實其在多發性肌炎中對CD8+T 細胞起到一定的作用，並證實PM組與正常對照組存在明顯差異。 其次模擬PM 因素體外刺激T細胞後，研究分析T細胞的體外生物學效應。證實T細胞上協同刺激分子及細胞因子的分泌不同，OX40的表達較對照增加。 然後成功製備小鼠模型所需重組人快速型肌球蛋白結合蛋白C（MYBPC2）。採用MYBPC2免疫小鼠獲得自身免疫性肌炎模型，成功為後期實驗提供自身免疫性肌炎的經濟、高效且安全的新型動物模型。 最後研究PM小鼠模型表現，證實多發性肌炎小鼠模型肌組織及外周血中T細胞上OX40/TRAF2/PKC/NF-κB軸分子及相關分子、相關細胞因子在多發性肌炎中起重要作用。 本項目通過對PM患者肌組織協同刺激信號轉導相關分子的檢測、T細胞功能測定、PM小鼠模型的各項功能研究，從組織、細胞、動物水平來研究PM中OX40/PKC/NF-κB途徑對CD8+T細胞維持肌細胞毒性的調節作用及其機制，為將來PM的新診斷標記及新治療策略打下理論基礎。
